Western Blot Technique
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Questions and Answers

¿Cuál es el propósito de acoplar un anticuerpo secundario a una enzima como la fosfatasa alcalina?

  • Para detectar moléculas específicas
  • Para aumentar la especificidad de la prueba
  • Para reducir la sensibilidad de la prueba
  • Para amplificar la señal de detección (correct)

¿Cuál es el producto químico que se utiliza como sustrato colorimétrico cuando se utiliza la fosfatasa alcalina?

  • Nitroblue tetrazolium/bromocloroindolil fosfato (NBT/BCIP) (correct)
  • Peroxidasa de rábano
  • Luminol con peróxido de hidrógeno
  • Anti-Rabbit IgG

¿Cuál es el resultado esperado al utilizar la peroxidasa de rábano en una prueba inmunológica?

  • Un cambio de color azul
  • Un precipitado violeta
  • Un cambio de color amarillo
  • Una señal luminosa (correct)

¿Cuál es el nombre del anticuerpo secundario que se utilizará en este laboratorio?

<p>Anti-Rabbit IgG (whole molecule)- Alkaline Phosphatase developed in goat (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuáles son los dos métodos que se realizarán en el laboratorio?

<p>Método colorimétrico y quimio luminiscente (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el primer paso en un Western blot?

<p>Electrotransferencia (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ocurre con las proteínas durante la electrotransferencia?

<p>Se inmovilizan en la membrana (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué se puede evaluar en una proteína mediante Western blot?

<p>Cambios químicos y modificaciones post-traduccionales (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de membrana se puede utilizar en un Western blot?

<p>Membrana de nitrocelulosa, nilón o de difluoruro de poli vinilideno (PVDF) (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de la técnica de inmunodetección en un Western blot?

<p>Detectar proteínas específicas o diferencias en la expresión genética (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el componente que requiere una carga negativa en el montaje para la transferencia?

<p>Electrodo con carga negativa (cátodo) (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito del paso de bloqueo en la inmunodetección de proteínas?

<p>Prevenir interacciones no específicas entre la membrana y el anticuerpo (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la ventaja de utilizar Ponceau S para tinear la membrana?

<p>La tinción es rápida y no es permanente (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de utilizar anticuerpos secundarios en la inmunodetección?

<p>Detectar la proteína de interés (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el problema de utilizar anticuerpos secundarios policlonales?

<p>Reaccionan con otras proteínas (cross-react) (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de la transferencia de proteínas del gel de poliacrilamida a la membrana?

<p>Transferir las proteínas a una membrana para su detección (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuáles son las membranas más comúnmente utilizadas en la transferencia de proteínas?

<p>Membranas de nitrocelulosa y PVDF (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el nombre del anticuerpo primario que se utiliza en este laboratorio?

<p>Anti-GAPDH producido en conejo (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué es el GAPDH?

<p>Una proteína de interés (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el peso molecular de la proteína GAPDH?

<p>37 KDa (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de utilizar leche desnatada y Tween-20 en el bloqueo?

<p>Prevenir interacciones no específicas entre la membrana y el anticuerpo (A)</p> Signup and view all the answers

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