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Western Blot Technique
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Western Blot Technique

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Questions and Answers

¿Cuál es el propósito de acoplar un anticuerpo secundario a una enzima como la fosfatasa alcalina?

  • Para detectar moléculas específicas
  • Para aumentar la especificidad de la prueba
  • Para reducir la sensibilidad de la prueba
  • Para amplificar la señal de detección (correct)

    • ¿Cuál es el producto químico que se utiliza como sustrato colorimétrico cuando se utiliza la fosfatasa alcalina?

  • Nitroblue tetrazolium/bromocloroindolil fosfato (NBT/BCIP) (correct)
  • Peroxidasa de rábano
  • Luminol con peróxido de hidrógeno
  • Anti-Rabbit IgG

    • ¿Cuál es el resultado esperado al utilizar la peroxidasa de rábano en una prueba inmunológica?

  • Un cambio de color azul
  • Un precipitado violeta
  • Un cambio de color amarillo
  • Una señal luminosa (correct)

    • ¿Cuál es el nombre del anticuerpo secundario que se utilizará en este laboratorio?

    <p>Anti-Rabbit IgG (whole molecule)- Alkaline Phosphatase developed in goat</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuáles son los dos métodos que se realizarán en el laboratorio?

    <p>Método colorimétrico y quimio luminiscente</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el primer paso en un Western blot?

    <p>Electrotransferencia</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué ocurre con las proteínas durante la electrotransferencia?

    <p>Se inmovilizan en la membrana</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se puede evaluar en una proteína mediante Western blot?

    <p>Cambios químicos y modificaciones post-traduccionales</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de membrana se puede utilizar en un Western blot?

    <p>Membrana de nitrocelulosa, nilón o de difluoruro de poli vinilideno (PVDF)</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito de la técnica de inmunodetección en un Western blot?

    <p>Detectar proteínas específicas o diferencias en la expresión genética</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el componente que requiere una carga negativa en el montaje para la transferencia?

    <p>Electrodo con carga negativa (cátodo)</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito del paso de bloqueo en la inmunodetección de proteínas?

    <p>Prevenir interacciones no específicas entre la membrana y el anticuerpo</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la ventaja de utilizar Ponceau S para tinear la membrana?

    <p>La tinción es rápida y no es permanente</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito de utilizar anticuerpos secundarios en la inmunodetección?

    <p>Detectar la proteína de interés</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el problema de utilizar anticuerpos secundarios policlonales?

    <p>Reaccionan con otras proteínas (cross-react)</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito de la transferencia de proteínas del gel de poliacrilamida a la membrana?

    <p>Transferir las proteínas a una membrana para su detección</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuáles son las membranas más comúnmente utilizadas en la transferencia de proteínas?

    <p>Membranas de nitrocelulosa y PVDF</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el nombre del anticuerpo primario que se utiliza en este laboratorio?

    <p>Anti-GAPDH producido en conejo</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es el GAPDH?

    <p>Una proteína de interés</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el peso molecular de la proteína GAPDH?

    <p>37 KDa</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito de utilizar leche desnatada y Tween-20 en el bloqueo?

    <p>Prevenir interacciones no específicas entre la membrana y el anticuerpo</p> Signup and view all the answers

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