Vectores de Expresión y Clonación en Células Animales

Vectores de Expresión

• Para expresar genes en un organismo, se utilizan vectores de expresión.
• Los vectores de expresión contienen elementos que controlan la expresión del gen, incluyendo:
  • Promotores: regiones que inician la transcripción
  • Secuencias de terminación: indican el fin de la transcripción y la liberación de la proteína.
• La intensidad del promotor influye en la cantidad de proteína producida.
• El terminador también afecta la expresión génica.

Clonación en Células Animales

• La introducción de material genético en células animales es más compleja que en procariotas.
• La introducción de material genético en células animales se denomina transfección.
• La transfección puede realizarse mediante métodos físicos, químicos, virales o bactoinfección.
• La integración del DNA puede ser transitoria (no se integra en el genoma) o estable (se integra y se replica con las células).

Tecnologías Ómicas

• Las tecnologías ómicas son técnicas para obtener una gran cantidad de datos biológicos.
• Ejemplos de tecnologías ómicas incluyen: genómica, proteómica, metabolómica, transcriptómica.
• Las tecnologías ómicas se basan en el dogma central de la biología molecular.
• Las herramientas de bioinformática son cruciales para analizar e interpretar los datos obtenidos.

Genómica

• La genómica estudia el contenido, organización, función y evolución de la información genética en un genoma completo.
• Genómica estructural: estudia la estructura del genoma, incluyendo la cartografía y la secuenciación.
• Genómica funcional: estudia la función de los genes y su regulación.
• Genómica comparada: compara genomas de diferentes organismos para comprender la evolución.

Genómica Estructural

• La genómica estructural se basa en técnicas que permiten la secuenciación completa de genomas.
• El material genético a secuenciar se extrae, purifica y se divide en fragmentos aleatorios.
• Los fragmentos se marcan con secuencias adaptadoras para facilitar la secuenciación.
• La secuenciación por síntesis utiliza fluorocromos para identificar los nucleótidos durante la polimerización.

Técnicas de Secuenciación

• Secuenciación de siguiente generación: técnicas que permiten secuenciar grandes cantidades de DNA de forma rápida y eficiente.
• Secuenciación Illumina: técnica basada en la síntesis de DNA con fluorocromos.
• Secuenciación Nanopore: técnica que utiliza nanoporos para determinar la secuencia del DNA.

Alineamiento del Genoma

• Alineamiento del genoma: proceso de ordenación de los fragmentos de DNA secuenciados para obtener la secuencia completa.
• Alineamiento de referencia: utiliza un genoma de referencia para organizar los fragmentos.
• Alineamiento de novo: ensambla los fragmentos sin un genoma de referencia.

Aplicaciones de la Secuenciación del Genoma

• Estudios de diversidad genética.
• Identificación de genes relacionados con enfermedades.
• Desarrollo de nuevas terapias.
• Estudios de evolución.

Recursos Genómicos

• GOLD (Genomes Online Database): base de datos que contiene información sobre la práctica totalidad de genomas secuenciados.

Mapeo Genético

• Mapeo genético: proceso de identificación de la ubicación de genes en el genoma.
• QTLs (rasgos cuantitativos de loci): regiones del genoma asociadas con rasgos cuantitativos.
• Mapeo por intervalos: técnica que utiliza marcadores para identificar regiones que controlan la expresión de un rasgo cuantitativo.

Selección de Genes Candidatos

• Genómica directa: técnicas que utilizan la información del genoma para identificar genes.
• Genómica comparativa: compara genomas de diferentes organismos para identificar genes conservados.
• Genómica funcional: estudia la función de los genes mediante experimentos.

Este cuestionario explora el uso de vectores de expresión y los procesos de clonación en células animales. Se abarcan conceptos clave como promotores, terminadores y métodos de transfección. Ideal para estudiantes de biología celular y genética que buscan fortalecer su comprensión de la expresión génica.