Vectores de Expresión y Clonación en Células Animales
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Questions and Answers

¿Cuál es el primer paso en la preparación del molde para la secuenciación?

  • Introducir los fragmentos en una célula de flujo.
  • Marcar los fragmentos de DNA con secuencias adaptadoras.
  • Clonar el DNA en un elevado número de veces.
  • Extraer y purificar el DNA de la muestra objetivo. (correct)

    • ¿Qué se añade a los extremos del DNA marcado tras la amplificación de ciclo reducido?

  • Nucleótidos no marcados.
  • Un índice y una región de complementariedad. (correct)
  • Una secuencia de hibridación.
  • Un solo adaptador.

    • ¿Qué técnica se utiliza para polimerizar la hebra complementaria durante la preparación del molde?

  • Electroforesis.
  • Amplificación de ciclo aumentado.
  • Amplificación isoterma. (correct)
  • Secuenciación por síntesis.

    • ¿Cuál es el objetivo de introducir los fragmentos de DNA en la célula de flujo?

    <p>Asociar los fragmentos con oligos inmovilizados.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué sucede después de que se forman los clústeres de hebras durante la secuenciación?

    <p>Se bloquean los oligos libres.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué materiales se añaden durante la secuenciación en la plataforma Illumina?

    <p>Un primer específico y nucleótidos marcados con fluorocromos.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué indica la señal emitida durante el proceso de polimerización?

    <p>La secuencia del fragmento polimerizado.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se hace tras el lavado del fragmento sintetizado?

    <p>Se mantiene el fragmento en espera de nuevos pasos.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el papel de la helicasa en el proceso de secuenciación de DNA?

    <p>Deshibridizar el DNA.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la principal ventaja de utilizar tecnologías de secuenciación basadas en nanoporos?

    <p>Obtención de secuencias de mayor longitud.</p> Signup and view all the answers

    En la metodología de alineamiento de DNA de novo, ¿qué significa el término 'tiling path'?

    <p>Identificación de fragmentos sucesivos clonados de un mismo genoma.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe una limitación de las tecnologías de secuenciación basadas en nanoporos?

    <p>Tienen un mayor grado de error que tecnologías anteriores.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función de las porinas en la generación de nanoporos?

    <p>Formar la estructura del nanoporo.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de alineamiento se realiza sin utilizar un genoma de referencia?

    <p>Alineamiento de novo.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el propósito principal de la resecuenciación en las nuevas tecnologías de secuenciación?

    <p>Buscar variantes en múltiples genomas de una misma especie.</p> Signup and view all the answers

    Una de las siguientes características no es una ventaja de la tecnología de secuenciación mediante nanoporos. ¿Cuál es?

    <p>Bajo grado de error.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cómo se estiman la presencia y el efecto de un QTL durante el mapeo de QTLs?

    <p>Evaluando marcadores que flanquean un intervalo específico.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué función se utiliza para medir la probabilidad de asociación entre un intervalo y la expresión de una característica cuantitativa?

    <p>LOD score.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la principal diferencia en la herencia de caracteres asociados a QTLs en comparación con caracteres cualitativos?

    <p>Los caracteres a QTLs muestran una distribución en la descendencia.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el objetivo último de la elaboración de mapas genéticos?

    <p>La identificación de genes y regiones candidatas.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes opciones describe mejor la técnica de 'paseo cromosómico'?

    <p>Secuenciación a partir de marcadores cercanos a la ubicación del gen.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es uno de los principales campos de aplicación de la ingeniería genética en la actualidad?

    <p>Producción de hormonas humanas y fármacos</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué metodología se considera especialmente relevante para la identificación de genes en organismos difíciles de secuenciar?

    <p>Búsqueda de genes basada en marcadores.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué son las tecnologías ómicas?

    <p>Conjunto de técnicas de biología basadas en la obtención masiva de datos</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función principal de un promotor en un sistema de vectores de expresión?

    <p>Permitir la expresión de proteínas</p> Signup and view all the answers

    ¿Cómo se determina si un carácter se expresa de forma cuantitativa o cualitativa?

    <p>Mediante experimentos de cruzamiento previos.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el objetivo principal de la genómica?

    <p>Estudiar el contenido, organización y función del genoma completo</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué implica la transfección en células animales?

    <p>Introducir material genético ajeno en células animales</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se considera genoma?

    <p>La totalidad de genes, secuencias reguladoras e información no codificante de un organismo</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de datos se usa en la elaboración de mapas genéticos para la identificación de genes de interés?

    <p>Datos de marcadores y valores cuantizados.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué factor puede influir en la expresión génica además del promotor?

    <p>La secuencia de terminación</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre los terminadores es correcta?

    <p>Permiten terminar la traducción del gen</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué estudia la genómica estructural?

    <p>La estructura y secuencia del genoma</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es uno de los métodos de transfección mencionados?

    <p>Transfección mediante electroporación</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es una de las ramas principales de la genómica?

    <p>Genómica funcional</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué significa que la integración del DNA sea 'estable' en células animales?

    <p>El inserto se integra en el genoma</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué ha permitido el desarrollo de la bioinformática en el contexto de la ingeniería genética?

    <p>El tratamiento e interpretación de datos biológicos</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué caracteriza a las tecnologías de secuenciación masiva?

    <p>Facilitan la obtención masiva de datos sobre el genoma</p> Signup and view all the answers

    ¿Cómo afectan los ribosomas a la expresión del gen?

    <p>Aumentando la tasa de traducción de proteínas</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué es un marcador en el contexto de la clonación?

    <p>Una secuencia que permite identificar transformantes</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Vectores de Expresión

    • Para expresar genes en un organismo, se utilizan vectores de expresión.
    • Los vectores de expresión contienen elementos que controlan la expresión del gen, incluyendo:
      • Promotores: regiones que inician la transcripción
      • Secuencias de terminación: indican el fin de la transcripción y la liberación de la proteína.
    • La intensidad del promotor influye en la cantidad de proteína producida.
    • El terminador también afecta la expresión génica.

    Clonación en Células Animales

    • La introducción de material genético en células animales es más compleja que en procariotas.
    • La introducción de material genético en células animales se denomina transfección.
    • La transfección puede realizarse mediante métodos físicos, químicos, virales o bactoinfección.
    • La integración del DNA puede ser transitoria (no se integra en el genoma) o estable (se integra y se replica con las células).

    Tecnologías Ómicas

    • Las tecnologías ómicas son técnicas para obtener una gran cantidad de datos biológicos.
    • Ejemplos de tecnologías ómicas incluyen: genómica, proteómica, metabolómica, transcriptómica.
    • Las tecnologías ómicas se basan en el dogma central de la biología molecular.
    • Las herramientas de bioinformática son cruciales para analizar e interpretar los datos obtenidos.

    Genómica

    • La genómica estudia el contenido, organización, función y evolución de la información genética en un genoma completo.
    • Genómica estructural: estudia la estructura del genoma, incluyendo la cartografía y la secuenciación.
    • Genómica funcional: estudia la función de los genes y su regulación.
    • Genómica comparada: compara genomas de diferentes organismos para comprender la evolución.

    Genómica Estructural

    • La genómica estructural se basa en técnicas que permiten la secuenciación completa de genomas.
    • El material genético a secuenciar se extrae, purifica y se divide en fragmentos aleatorios.
    • Los fragmentos se marcan con secuencias adaptadoras para facilitar la secuenciación.
    • La secuenciación por síntesis utiliza fluorocromos para identificar los nucleótidos durante la polimerización.

    Técnicas de Secuenciación

    • Secuenciación de siguiente generación: técnicas que permiten secuenciar grandes cantidades de DNA de forma rápida y eficiente.
    • Secuenciación Illumina: técnica basada en la síntesis de DNA con fluorocromos.
    • Secuenciación Nanopore: técnica que utiliza nanoporos para determinar la secuencia del DNA.

    Alineamiento del Genoma

    • Alineamiento del genoma: proceso de ordenación de los fragmentos de DNA secuenciados para obtener la secuencia completa.
    • Alineamiento de referencia: utiliza un genoma de referencia para organizar los fragmentos.
    • Alineamiento de novo: ensambla los fragmentos sin un genoma de referencia.

    Aplicaciones de la Secuenciación del Genoma

    • Estudios de diversidad genética.
    • Identificación de genes relacionados con enfermedades.
    • Desarrollo de nuevas terapias.
    • Estudios de evolución.

    Recursos Genómicos

    • GOLD (Genomes Online Database): base de datos que contiene información sobre la práctica totalidad de genomas secuenciados.

    Mapeo Genético

    • Mapeo genético: proceso de identificación de la ubicación de genes en el genoma.
    • QTLs (rasgos cuantitativos de loci): regiones del genoma asociadas con rasgos cuantitativos.
    • Mapeo por intervalos: técnica que utiliza marcadores para identificar regiones que controlan la expresión de un rasgo cuantitativo.

    Selección de Genes Candidatos

    • Genómica directa: técnicas que utilizan la información del genoma para identificar genes.
    • Genómica comparativa: compara genomas de diferentes organismos para identificar genes conservados.
    • Genómica funcional: estudia la función de los genes mediante experimentos.

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    Description

    Este cuestionario explora el uso de vectores de expresión y los procesos de clonación en células animales. Se abarcan conceptos clave como promotores, terminadores y métodos de transfección. Ideal para estudiantes de biología celular y genética que buscan fortalecer su comprensión de la expresión génica.

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