Unidad 4: Diagnóstico con Cultivos Celulares

Unidad 4. Técnicas de diagnóstico mediante el uso de cultivos celulares

• La unidad describe diversas técnicas para el diagnóstico, enfocándose en el uso de cultivos celulares.
• Se aborda la necesidad del diagnóstico, enfermedades genéticas, tipos de mutaciones, herencia y citogenética.
• Se mencionan técnicas para el diagnostico genético como el análisis de muestras biológicas, obtención de imágenes, y pruebas funcionales, así como técnicas de diagnóstico clínico, diagnósticos prenatales y preimplantacionales.

Diagnóstico

• Es el proceso para identificar una enfermedad, afección o lesión, usando signos y síntomas, antecedentes de salud, examen físico y pruebas de diagnóstico clínico.
• Las técnicas de diagnóstico clínico permiten la evaluación objetiva de enfermedades, condiciones médicas, y el estado de salud general del paciente, para realizar diagnósticos precisos y planificar tratamientos efectivos.
• Se mencionan diferentes tipos de pruebas de laboratorio, diagnósticos por imagen, pruebas funcionales y endoscopia, pruebas genéticas y moleculares.

Diagnóstico Genético

• Se enfoca en el análisis del ADN, cromosomas o proteínas de una persona para detectar mutaciones asociadas a enfermedades genéticas.
• Las razones para el diagnóstico genético incluyen la confirmación de sospechas clínicas y la realización de un diagnóstico definitivo, la identificación de portadores de mutaciones genéticas, la detección de enfermedades genéticas fetales, la selección de embriones sin mutaciones específicas en la fertilización in vitro, la identificación de mutaciones en personas asintomáticas y la adaptación de los tratamientos según la genética individual.

Enfermedades Hereditarias y Congénitas

• Una enfermedad hereditaria se transmite a través del material genético de padres a hijos.
• Puede no manifestarse desde el nacimiento.
• Una enfermedad congénita está presente desde el nacimiento del bebé y/o puede ser transmitida por los progenitores, o no.
• Muchas de estas enfermedades tienen una base genética, pero algunas pueden ser debidas a factores ambientales, como la exposición de la madre a ciertos fármacos, sustancias tóxicas o infecciones durante el embarazo.
• Se mencionan varias enfermedades con diferentes gravedades.
• Se explica que una misma enfermedad puede ser congénita y hereditaria, pero no todas las enfermedades congénitas son hereditarias y viceversa.
• No todas las enfermedades hereditarias se manifiestan al momento del nacimiento.
• No todas las enfermedades presentes al nacer son hereditarias; de forma que no se puede deducir que una enfermedad presente al nacer sea de origen hereditario.

Tipos de mutaciones

• Se clasifican las mutaciones según su origen (espontáneas e inducidas) y efectos (somáticas y germinales).
• Se detallan los tipos de mutaciones (transiciones, transversiones, silenciosas, de sentido erróneo, sin sentido, inserciones y deleciones), así como los efectos en las proteínas.
• Algunas mutaciones se manifiestan desde el nacimiento, otras no, y se explica por qué.

Tipos de mutaciones cromosómicas y genómicas

• Se describen alteraciones en la secuencia de genes en un cromosoma.
• Pueden ser de cuatro tipos: deleción, duplicación, inversión y translocación.
• También se describen alteraciones en la dotación cromosómica, las cuales pueden ser: euploidias, monosomías, y trisomías.
• Se proporcionan ejemplos de enfermedades relacionadas con estas alteraciones (síndrome de Turner).

Obtención de preparaciones cromosómicas

• Se pueden usar distintos tejidos para obtener preparaciones de cromosomas; por ejemplo, sangre periférica, médula ósea, fluido amniótico y productos de la concepción.
• Se detallan varios pasos en los procesos de obtención (cultivo de la muestra, detención del cultivo con colchicina e hipotónico, fijación, etc.).

Técnicas para el estudio de la Citogenética

• Se describen técnicas de bandeo cromosómico como: Giemsa, R (Reverse), así como técnicas especiales como: Q(Quinacrina), C(Centromérico), Ag-NOR.
• Se explica el uso de la técnica de Hibridación Genómica Comparativa (CGH), Hibridación In Situ Fluorescente (FISH) y Bandeo Multicolor de Alta Resolución (MCB) o tipo SKY (Spectral Karyotyping)

Técnica de PCR Cuantitativa Fluorescente (QF-PCR)

• Es una técnica para identificar variaciones en el número de copias en genes y regiones cromosómicas.
• Se utiliza marcadores STR en los cromosomas.
• Se puede usar en análisis de paternidad.
• Es rápida con resultados en 48 horas.

Inmunohistoquímica e Inmunofluorescencia

• Estas técnicas usan anticuerpos para identificar proteínas específicas en tejidos, cortes de tejidos o células.
• Se describe cómo funcionan y las proteínas diana que se buscan.
• Se menciona el método ABC (Avidina-biotina-peroxidasa) que es más frecuente hoy día.
• Se explica el protocolo para la realización de IHC.