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Technologie de l'ADN Recombinant
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Technologie de l'ADN Recombinant

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Questions and Answers

Quel est le rôle principal d'un bioréacteur dans la culture cellulaire?

  • Produire des médicaments uniquement.
  • Extraire des protéines directement.
  • Contrôler et piloter les paramètres de culture. (correct)
  • Filtrer les cellules pour la purification.

    • Quelle technique est employée pour séparer les cellules du surnageant lors de la purification des protéines?

  • Ultra-filtration.
  • Chromatographie.
  • Centrifugation. (correct)
  • Micro-dialyse.

    • Quel est le rôle des enzymes de restriction dans la technologie de l'ADN recombinant?

  • Elles éliminent les contaminants biologiques.
  • Elles intègrent l'ADN dans des vecteurs.
  • Elles transcrivent l'ADN en ARNm.
  • Elles coupent l'ADN de manière définie et reproductible. (correct)

    • Quel paramètre n'est pas mentionné comme devant être maîtrisé dans un bioréacteur?

    <p>Humidité.</p> Signup and view all the answers

    Quels sont les avantages des technologies de l'ADN recombinant concernant les sources biologiques?

    <p>Elles évitent des problèmes de sécurité liés à des sources naturelles.</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui caractérise un médicament biologique?

    <p>Substance active d'origine biologique.</p> Signup and view all the answers

    Quelle étape est impliquée dans l'obtention de l'ADN à manipuler?

    <p>La précipitation de l'ADN génomique.</p> Signup and view all the answers

    Quel produit peut être obtenu par changement de la structure d'une protéine grâce à la technologie de l'ADN recombinant?

    <p>Insuline rapide.</p> Signup and view all the answers

    Quelle étape de purification implique de briser les cellules pour récupérer un produit?

    <p>Homogénéisation.</p> Signup and view all the answers

    Quel terme est synonyme de "médicaments biothérapeutiques"?

    <p>Biomédicaments.</p> Signup and view all the answers

    Comment l'ADN est-il extrait à partir de leucocytes selon le processus décrit?

    <p>Par centrifugation après traitement avec des détergents ioniques.</p> Signup and view all the answers

    Quelle méthode de purification utilise une membrane pour séparer des protéines spécifiques?

    <p>Ultra-filtration.</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'objectif principal de l'intégration de l'ADN dans des vecteurs durant les techniques d'ADN recombinant?

    <p>Transférer le matériel génétique dans une cellule hôte.</p> Signup and view all the answers

    Quel type d'ADN est principalement extrait pour obtenir de l'ADN génomique?

    <p>ADN provenant des leucocytes.</p> Signup and view all the answers

    Quelle découverte est associée à Alexander Fleming?

    <p>La pénicilline.</p> Signup and view all the answers

    Pourquoi est-il important d'utiliser une solution hypotonique lors de l'extraction de l'ADN?

    <p>Pour éclater les hématies dépourvues de noyaux.</p> Signup and view all the answers

    Quels symptômes peuvent être associés aux réactions à la perfusion des AcM ?

    <p>Bronchospasme</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle de la protéinase K dans le traitement du DNA?

    <p>Elle libère le DNA nucléaire en digérant les histones.</p> Signup and view all the answers

    Quel risque est associé à l'utilisation d'AcM ciblant des antigènes exprimés par le système immunitaire ?

    <p>Risque infectieux</p> Signup and view all the answers

    Comment est réalisée l'élimination des protéines non digérées et des lipides?

    <p>Par des précipitations et des extractions avec un mélange spécifique.</p> Signup and view all the answers

    Quels anticorps sont susceptibles de provoquer des effets indésirables cardiovasculaires ?

    <p>Anticorps anti-VEGF</p> Signup and view all the answers

    Quelles sont les caractéristiques des enzymes de restriction de type II?

    <p>Elles sont spécifiques à des séquences symétriques de quatre à six paires de bases.</p> Signup and view all the answers

    Quel est un effet possible des AcM qui ciblent des antigènes membranaires exprimés par les cellules immunitaires ?

    <p>Destruction des lymphocytes T et B</p> Signup and view all the answers

    Quel est l’usage principal des plasmides dans les laboratoires de biologie moléculaire?

    <p>Ils servent de vecteurs pour la propagation de gènes de résistance.</p> Signup and view all the answers

    Comment les effets indésirables des AcM peuvent-ils être anticipés ?

    <p>En connaissant les mécanismes d'action des AcM</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce que le phage λ?

    <p>Un phage à ADN double brin linéaire avec des caractéristiques spécifiques.</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle de la ribonucléase dans la purification du DNA?

    <p>Elle élimine l'ARN.</p> Signup and view all the answers

    Quels vecteurs sont des hybrides constitués de plasmides et de séquences spécifiques?

    <p>Les cosmides.</p> Signup and view all the answers

    Comment les fragments d’ADN sont-ils séparés après leur coupure par des enzymes de restriction?

    <p>Par électrophorèse sur gel.</p> Signup and view all the answers

    Quel est le principe du clonage thérapeutique ?

    <p>Reproduire un embryon précoce pour remplacer des cellules malades.</p> Signup and view all the answers

    Quels types de pathologies sont éligibles pour le clonage thérapeutique ?

    <p>Myopathies et greffes.</p> Signup and view all the answers

    Quelle classe d'immunoglobulines est définie par la chaîne lourde portant le symbole 'µ'?

    <p>Ig M.</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la principale méthode utilisée pour produire des anticorps monoclonaux ?

    <p>La technique des hybridomes.</p> Signup and view all the answers

    Quelles cellules sont impliquées dans la formation des hybridomes pour le clonage d'anticorps ?

    <p>Lymphocytes B de souris immunisées et cellules de myélome murin.</p> Signup and view all the answers

    Quels types d'anticorps sont considérés comme homogènes ?

    <p>Anticorps monoclonaux.</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la principale lignée cellulaire utilisée pour la production d'anticorps monoclonaux ?

    <p>Lignée CHO.</p> Signup and view all the answers

    Dans quel type de traitements médicaux les anticorps monoclonaux sont-ils principalement utilisés ?

    <p>Cancérologie et maladies auto-immunes.</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Exploration des Mécanismes Moléculaires

    • Comprendre les mécanismes moléculaires des maladies pour développer des thérapies ciblées.
    • Identification des cibles clés au sein des processus physiopathologiques.

    Technologie de l'ADN Recombinant

    • Techniques de biologie moléculaire pour couper et manipuler l’ADN.
    • Utilisation d'enzymes de restriction pour effectuer des coupures spécifiques.
    • Intégration d'ADN dans des vecteurs pour le transfert de matériel génétique.
    • Transcription in vitro de l'ARNm en ADNc par transcriptase inverse.

    Avantages des Technologies de l'ADN Recombinant

    • Résolution des problèmes de disponibilité des protéines comme l'interféron.
    • Réduction des risques liés à la transmission de maladies par des sources biologiques naturelles.
    • Alternatifs aux extractions dangereuses de substances biologiques.
    • Possibilité de modifier des structures protéiques pour créer des entités nouvelles, telles que l'insuline rapide.

    Obtention de l'ADN à Manipuler

    • Extraction de l’ADN génomique principalement à partir de leucocytes.
    • Volume de sang de 5 à 10 ml peut produire environ 20 µg d’ADN.
    • Processus de centrifugation et traitement avec des détergents pour libérer l'ADN nucléaire.

    Fragmentation de l'ADN

    • Couverture par les enzymes de restriction qui protègent les bactéries des ADN étrangers.
    • Isolation des fragments d'ADN par électrophorèse sur gel d'agarose.
    • Vecteurs plasmidiques utilisés pour la réplication autonome de gènes d'intérêt.

    Bioréacteurs pour la Production à Grande Échelle

    • Capacité de 2 à 100 000 litres pour cultiver diverses cellules.
    • Conditionnement précis des paramètres physiques et chimiques (pH, température, agitation).

    Purification des Protéines Synthétisées

    • Filtration et centrifugation pour éliminer les débris cellulaires.
    • Séparation, homogénéisation, et concentration des protéines d'intérêt.
    • Techniques de purification, y compris la chromatographie.

    Médicaments Issus de la Biotechnologie

    • Médicaments biologiques ou biomédicaments définis comme agents thérapeutiques dérivés de sources biologiques.
    • Nécessitent des essais physico-chimico-biologiques pour caractérisation.

    Historique de la Biotechnologie

    • 1680 : Découverte des cellules par Leuwenhock.
    • 1929 : Découverte de la pénicilline par Fleming.

    Clonage Thérapeutique

    • Reproduction d'embryons pour remplacer des cellules malades.
    • Ciblage potentiel pour des maladies comme les myopathies.

    Protéines Thérapeutiques

    • Catégories comprennent cytokines, facteurs de croissance, et protéines plasmatiques.
    • Exemple : EPO, albumine, facteurs de coagulation.

    Anticorps Monoclonaux

    • Glycoprotéines constituées de chaînes légères et lourdes.
    • Reconnaissance d'un type spécifique de site antigénique.
    • Utilisation croissante pour des applications cliniques variées (cancérologie, maladies auto-immunes).

    Effets Indésirables des Anticorps Monoclonaux

    • Réactions de perfusion pouvant entraîner des bronchospasmes et hypotension.
    • Risques d'effets cardiovasculaires associés à certaines thérapies ciblant des voies comme le VEGF.

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