Technologie de l'ADN Recombinant
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Questions and Answers

Quel est le rôle principal d'un bioréacteur dans la culture cellulaire?

  • Produire des médicaments uniquement.
  • Extraire des protéines directement.
  • Contrôler et piloter les paramètres de culture. (correct)
  • Filtrer les cellules pour la purification.

Quelle technique est employée pour séparer les cellules du surnageant lors de la purification des protéines?

  • Ultra-filtration.
  • Chromatographie.
  • Centrifugation. (correct)
  • Micro-dialyse.

Quel est le rôle des enzymes de restriction dans la technologie de l'ADN recombinant?

  • Elles éliminent les contaminants biologiques.
  • Elles intègrent l'ADN dans des vecteurs.
  • Elles transcrivent l'ADN en ARNm.
  • Elles coupent l'ADN de manière définie et reproductible. (correct)

Quel paramètre n'est pas mentionné comme devant être maîtrisé dans un bioréacteur?

<p>Humidité. (B)</p> Signup and view all the answers

Quels sont les avantages des technologies de l'ADN recombinant concernant les sources biologiques?

<p>Elles évitent des problèmes de sécurité liés à des sources naturelles. (B)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce qui caractérise un médicament biologique?

<p>Substance active d'origine biologique. (B)</p> Signup and view all the answers

Quelle étape est impliquée dans l'obtention de l'ADN à manipuler?

<p>La précipitation de l'ADN génomique. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel produit peut être obtenu par changement de la structure d'une protéine grâce à la technologie de l'ADN recombinant?

<p>Insuline rapide. (D)</p> Signup and view all the answers

Quelle étape de purification implique de briser les cellules pour récupérer un produit?

<p>Homogénéisation. (C)</p> Signup and view all the answers

Quel terme est synonyme de "médicaments biothérapeutiques"?

<p>Biomédicaments. (B)</p> Signup and view all the answers

Comment l'ADN est-il extrait à partir de leucocytes selon le processus décrit?

<p>Par centrifugation après traitement avec des détergents ioniques. (A)</p> Signup and view all the answers

Quelle méthode de purification utilise une membrane pour séparer des protéines spécifiques?

<p>Ultra-filtration. (B)</p> Signup and view all the answers

Quel est l'objectif principal de l'intégration de l'ADN dans des vecteurs durant les techniques d'ADN recombinant?

<p>Transférer le matériel génétique dans une cellule hôte. (C)</p> Signup and view all the answers

Quel type d'ADN est principalement extrait pour obtenir de l'ADN génomique?

<p>ADN provenant des leucocytes. (D)</p> Signup and view all the answers

Quelle découverte est associée à Alexander Fleming?

<p>La pénicilline. (A)</p> Signup and view all the answers

Pourquoi est-il important d'utiliser une solution hypotonique lors de l'extraction de l'ADN?

<p>Pour éclater les hématies dépourvues de noyaux. (C)</p> Signup and view all the answers

Quels symptômes peuvent être associés aux réactions à la perfusion des AcM ?

<p>Bronchospasme (D)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle de la protéinase K dans le traitement du DNA?

<p>Elle libère le DNA nucléaire en digérant les histones. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel risque est associé à l'utilisation d'AcM ciblant des antigènes exprimés par le système immunitaire ?

<p>Risque infectieux (C)</p> Signup and view all the answers

Comment est réalisée l'élimination des protéines non digérées et des lipides?

<p>Par des précipitations et des extractions avec un mélange spécifique. (D)</p> Signup and view all the answers

Quels anticorps sont susceptibles de provoquer des effets indésirables cardiovasculaires ?

<p>Anticorps anti-VEGF (D)</p> Signup and view all the answers

Quelles sont les caractéristiques des enzymes de restriction de type II?

<p>Elles sont spécifiques à des séquences symétriques de quatre à six paires de bases. (B)</p> Signup and view all the answers

Quel est un effet possible des AcM qui ciblent des antigènes membranaires exprimés par les cellules immunitaires ?

<p>Destruction des lymphocytes T et B (B)</p> Signup and view all the answers

Quel est l’usage principal des plasmides dans les laboratoires de biologie moléculaire?

<p>Ils servent de vecteurs pour la propagation de gènes de résistance. (C)</p> Signup and view all the answers

Comment les effets indésirables des AcM peuvent-ils être anticipés ?

<p>En connaissant les mécanismes d'action des AcM (B)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce que le phage λ?

<p>Un phage à ADN double brin linéaire avec des caractéristiques spécifiques. (C)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle de la ribonucléase dans la purification du DNA?

<p>Elle élimine l'ARN. (C)</p> Signup and view all the answers

Quels vecteurs sont des hybrides constitués de plasmides et de séquences spécifiques?

<p>Les cosmides. (D)</p> Signup and view all the answers

Comment les fragments d’ADN sont-ils séparés après leur coupure par des enzymes de restriction?

<p>Par électrophorèse sur gel. (D)</p> Signup and view all the answers

Quel est le principe du clonage thérapeutique ?

<p>Reproduire un embryon précoce pour remplacer des cellules malades. (A)</p> Signup and view all the answers

Quels types de pathologies sont éligibles pour le clonage thérapeutique ?

<p>Myopathies et greffes. (C)</p> Signup and view all the answers

Quelle classe d'immunoglobulines est définie par la chaîne lourde portant le symbole 'µ'?

<p>Ig M. (A)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la principale méthode utilisée pour produire des anticorps monoclonaux ?

<p>La technique des hybridomes. (B)</p> Signup and view all the answers

Quelles cellules sont impliquées dans la formation des hybridomes pour le clonage d'anticorps ?

<p>Lymphocytes B de souris immunisées et cellules de myélome murin. (C)</p> Signup and view all the answers

Quels types d'anticorps sont considérés comme homogènes ?

<p>Anticorps monoclonaux. (C)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la principale lignée cellulaire utilisée pour la production d'anticorps monoclonaux ?

<p>Lignée CHO. (B)</p> Signup and view all the answers

Dans quel type de traitements médicaux les anticorps monoclonaux sont-ils principalement utilisés ?

<p>Cancérologie et maladies auto-immunes. (B)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Molecular Mechanisms of Diseases

The study of how molecular mechanisms of diseases can be understood to create targeted therapies by identifying key targets within the disease process.

Recombinant DNA Technology

Techniques used to cut and manipulate DNA, involving enzymes that make specific cuts in DNA and vectors for transferring genes.

Restriction Enzymes

Enzymes that specifically cut DNA at precise sequences, used in recombinant DNA technology.

Vectors

Molecules that act as carriers for DNA, allowing for the transfer of genetic material into other cells.

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Reverse Transcription

The process of converting RNA into DNA using reverse transcriptase.

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DNA Extraction

A technique in recombinant DNA technology that involves extracting DNA from cells, usually from white blood cells.

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Restriction Enzymes

Enzymes that protect bacteria from foreign DNA by cutting it up.

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Gel Electrophoresis

A technique used to separate DNA fragments based on their size, using an electric current to move them through a gel.

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Plasmid Vectors

Small circular DNA molecules that can replicate independently of the host chromosome, used as vectors to carry genes of interest.

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Bioreactors

Large-scale production systems for culturing cells and producing proteins, with controlled conditions such as pH, temperature, and agitation.

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Protein Purification

The process of isolating and purifying proteins of interest from cell cultures, often involving filtration, centrifugation, and chromatography techniques.

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Biologics or Biomedicines

Therapeutic agents derived from biological sources, often produced using recombinant DNA technology.

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Therapeutic Cloning

Therapeutic cloning involves creating embryos to replace diseased cells, potentially treating diseases like muscle disorders.

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Therapeutic Proteins

Proteins that have therapeutic effects, including cytokines, growth factors, and plasma proteins.

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Monoclonal Antibodies

Proteins that specifically target and bind to a specific antigen, used in various clinical applications like cancer treatment and autoimmune diseases.

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Infusion Reactions

Infusion reactions associated with monoclonal antibody therapy, sometimes leading to bronchospasm or low blood pressure.

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Cardiovascular Risks

Risks associated with monoclonal antibody therapy, particularly targeting vascular endothelial growth factor (VEGF) pathways, potentially leading to cardiovascular problems.

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Discovery of Cells

The discovery of cells, opening the door to understanding their role in life.

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Discovery of Penicillin

The discovery of penicillin, a groundbreaking antibiotic for treating bacterial infections.

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Recombinant DNA Technology

A process that involves cutting and pasting DNA fragments to create new combinations of genetic material.

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DNA

A molecule that carries genetic information, consisting of a chain of nucleotides

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Restriction Digestion

A process that uses enzymes to cut DNA at specific sequences.

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Plasmid

A small, circular DNA molecule that can replicate independently of the host chromosome.

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Electrophoresis

A technique that separates molecules based on their size and charge.

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Gene Cloning

A process that involves inserting a gene into a vector and then transferring the vector into a host cell.

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Cloning

A process that creates an exact copy of an organism.

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RNA

A molecule that carries genetic information, similar to DNA but with Uracil (U) instead of Thymine (T).

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Reverse Transcription

A process that converts RNA into DNA using the enzyme reverse transcriptase.

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Study Notes

Exploration des Mécanismes Moléculaires

  • Comprendre les mécanismes moléculaires des maladies pour développer des thérapies ciblées.
  • Identification des cibles clés au sein des processus physiopathologiques.

Technologie de l'ADN Recombinant

  • Techniques de biologie moléculaire pour couper et manipuler l’ADN.
  • Utilisation d'enzymes de restriction pour effectuer des coupures spécifiques.
  • Intégration d'ADN dans des vecteurs pour le transfert de matériel génétique.
  • Transcription in vitro de l'ARNm en ADNc par transcriptase inverse.

Avantages des Technologies de l'ADN Recombinant

  • Résolution des problèmes de disponibilité des protéines comme l'interféron.
  • Réduction des risques liés à la transmission de maladies par des sources biologiques naturelles.
  • Alternatifs aux extractions dangereuses de substances biologiques.
  • Possibilité de modifier des structures protéiques pour créer des entités nouvelles, telles que l'insuline rapide.

Obtention de l'ADN à Manipuler

  • Extraction de l’ADN génomique principalement à partir de leucocytes.
  • Volume de sang de 5 à 10 ml peut produire environ 20 µg d’ADN.
  • Processus de centrifugation et traitement avec des détergents pour libérer l'ADN nucléaire.

Fragmentation de l'ADN

  • Couverture par les enzymes de restriction qui protègent les bactéries des ADN étrangers.
  • Isolation des fragments d'ADN par électrophorèse sur gel d'agarose.
  • Vecteurs plasmidiques utilisés pour la réplication autonome de gènes d'intérêt.

Bioréacteurs pour la Production à Grande Échelle

  • Capacité de 2 à 100 000 litres pour cultiver diverses cellules.
  • Conditionnement précis des paramètres physiques et chimiques (pH, température, agitation).

Purification des Protéines Synthétisées

  • Filtration et centrifugation pour éliminer les débris cellulaires.
  • Séparation, homogénéisation, et concentration des protéines d'intérêt.
  • Techniques de purification, y compris la chromatographie.

Médicaments Issus de la Biotechnologie

  • Médicaments biologiques ou biomédicaments définis comme agents thérapeutiques dérivés de sources biologiques.
  • Nécessitent des essais physico-chimico-biologiques pour caractérisation.

Historique de la Biotechnologie

  • 1680 : Découverte des cellules par Leuwenhock.
  • 1929 : Découverte de la pénicilline par Fleming.

Clonage Thérapeutique

  • Reproduction d'embryons pour remplacer des cellules malades.
  • Ciblage potentiel pour des maladies comme les myopathies.

Protéines Thérapeutiques

  • Catégories comprennent cytokines, facteurs de croissance, et protéines plasmatiques.
  • Exemple : EPO, albumine, facteurs de coagulation.

Anticorps Monoclonaux

  • Glycoprotéines constituées de chaînes légères et lourdes.
  • Reconnaissance d'un type spécifique de site antigénique.
  • Utilisation croissante pour des applications cliniques variées (cancérologie, maladies auto-immunes).

Effets Indésirables des Anticorps Monoclonaux

  • Réactions de perfusion pouvant entraîner des bronchospasmes et hypotension.
  • Risques d'effets cardiovasculaires associés à certaines thérapies ciblant des voies comme le VEGF.

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Description

Ce quiz explore les mécanismes moléculaires des maladies ainsi que les processus physiopathologiques. Vous découvrirez l'identification de cibles clés pour le développement de traitements adaptés. Testez vos connaissances en biologie moléculaire et en technologies de l'ADN recombinant!

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