Techniques chromatographiques - Partie 2
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Questions and Answers

Quel paramètre augmente lorsque la polarité du mélange de solvants en HPLC augmente ?

  • Le temps de rétention des solutés moins polaires
  • La force éluante (correct)
  • Le facteur de capacité (k’)
  • Le pouvoir d’élution de la phase stationnaire

    • Comment le temps de rétention (tR) des solutés polaires se compare-t-il à celui des solutés moins polaires en HPLC ?

  • Il est identique
  • Il varie en fonction du mix de solvants utilisés
  • Il est toujours plus élevé (correct)
  • Il est toujours plus faible

    • Quel effet a un solvant apolaire sur l'éluabilité des composés polaires en chromatographie de partage ?

  • Il augmente leur temps de rétention
  • Il n'a pas d'effet sur leur élution
  • Il les retarde dans le processus d'élution
  • Il les fait éluer en premier (correct)

    • Quel est le lien entre la polarité d'un soluté et son facteur de capacité (k’) en HPLC ?

    <p>Plus le soluté est polaire, plus k’ est faible</p> Signup and view all the answers

    Quel type de phase stationnaire est utilisé dans la phase normale de la chromatographie HPLC ?

    <p>Phase polaire</p> Signup and view all the answers

    Quel est le temps de rétention (tR) dans la chromatographie?

    <p>Temps écoulé entre l'injection de l'échantillon et l'apparition d'un pic.</p> Signup and view all the answers

    Quel facteur décrit la vitesse à laquelle un analyte migre dans une colonne?

    <p>Facteur de rétention (k')</p> Signup and view all the answers

    Que représente un facteur de rétention (k') supérieur à 20?

    <p>Une élution prenant beaucoup de temps.</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la formule pour calculer le facteur de rétention (k')?

    <p>k' = (tR - tM) / tM</p> Signup and view all the answers

    Que signifie un facteur de sélectivité (α) supérieur à 1?

    <p>Une séparation efficace entre les deux espèces.</p> Signup and view all the answers

    Que décrit le temps mort (tM) dans une colonne chromatographique?

    <p>Le temps pris par la phase mobile pour traverser la colonne.</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle du facteur de résolution dans un chromatogramme?

    <p>Mesurer la qualité de la séparation des pics.</p> Signup and view all the answers

    Quel type de composé sort de la colonne au temps tM?

    <p>Un constituant non retenu.</p> Signup and view all the answers

    Quel facteur influence directement le temps de rétention dans une chromatographie en phase liquide?

    <p>La vitesse d'écoulement de la phase mobile</p> Signup and view all the answers

    Comment peut-on réduire H dans une chromatographie HPLC?

    <p>En diminuant l'épaisseur du film liquide</p> Signup and view all the answers

    Quelle est la formule de l'efficacité de la colonne en chromatographie?

    <p>E = L/H</p> Signup and view all the answers

    Quel type de chromatographie utilise un liquide comme phase mobile et une phase stationnaire solide?

    <p>Chromatographie liquide-solide</p> Signup and view all the answers

    Quel impact a une vitesse d'écoulement trop rapide sur la séparation chromatographique?

    <p>Diminue l'efficacité de séparation</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'effet de l'augmentation de la température sur le coefficient de capacité?

    <p>Il peut diminuer selon l'analyte</p> Signup and view all the answers

    Quelle solution est employée pour optimiser la performance de la colonne chromatographique?

    <p>Optimiser la vitesse d'écoulement</p> Signup and view all the answers

    Quels types de phases stationnaires sont utilisés dans la chromatographie en phase gazeuse?

    <p>Solides et liquides</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'effet d'une épaisseur trop importante du film liquide sur HPLC?

    <p>Augmente H et diminue la résolution</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui peut affecter le coefficient de capacité en chromatographie?

    <p>La nature de l'analyte</p> Signup and view all the answers

    Quel est le rôle du temps de rétention (tR) dans la chromatographie?

    <p>Il mesure la durée pendant laquelle un soluté reste dans la colonne.</p> Signup and view all the answers

    Quels facteurs influencent l'efficacité d'une colonne chromatographique?

    <p>La hauteur équivalente à un plateau théorique (H) et le nombre de plateaux (N).</p> Signup and view all the answers

    Quel est le coefficient de capacité pour qu'une substance soit considérée comme bien séparée en chromatographie?

    <p>Supérieur à 1,5.</p> Signup and view all the answers

    Comment peut-on réduire la hauteur équivalente à un plateau théorique (H) dans une colonne?

    <p>En utilisant des particules de support plus petites.</p> Signup and view all the answers

    Quelle formule représente le nombre de plateaux théoriques dans une colonne?

    <p>N = L/H.</p> Signup and view all the answers

    Que se passe-t-il lorsque la largeur du pic à la mi-hauteur (Wh) augmente?

    <p>La résolution des pics diminue.</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce qui constitue les différentes sections d'une colonne chromatographique?

    <p>Des plateaux théoriques.</p> Signup and view all the answers

    La modification de quelle variable joue un rôle clé dans la chromatographie en phase gazeuse?

    <p>La température.</p> Signup and view all the answers

    Quelle est l'importance de la longueur de la colonne (L) dans la chromatographie?

    <p>Elle détermine le nombre total de plateaux théoriques.</p> Signup and view all the answers

    Quel est le temps de rétention (RT) pour l'acide caféique dans l'extrême phénolique?

    <p>20.84 min</p> Signup and view all the answers

    Quel détecteur est utilisé pour analyser l'acide caféique?

    <p>Détecteur à barrette de diodes</p> Signup and view all the answers

    Qu'est-ce que le mode gradient utilisé dans la chromatographie implique?

    <p>Un changement progressif de la composition du solvant.</p> Signup and view all the answers

    À quelle longueur d'onde est mesurée l'absorbance maximale de l'acide caféique?

    <p>230.1 nm</p> Signup and view all the answers

    Que représente le terme 'NL' dans le chromatogramme?

    <p>Niveau de lumière</p> Signup and view all the answers

    Quel rôle joue le solvant acétonitrile dans la séparation chromatique?

    <p>Un solvant polaire apolaire.</p> Signup and view all the answers

    Quel est l'objectif principal de l'utilisation d'un chromatogramme?

    <p>Séparer et identifier des composants dans un mélange.</p> Signup and view all the answers

    Quel est un facteur important pour déterminer le coefficient de capacité dans une analyse chromatographique?

    <p>La longueur de la colonne.</p> Signup and view all the answers

    Quel est le signe de l'absorbance pour l'acide caféique dans le chromatogramme?

    <p>Positif</p> Signup and view all the answers

    Lors de l'analyse DAD, quelle propriété est principalement étudiée?

    <p>L'absorption de la lumière par les composés</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Partie 2 : Techniques chromatographiques

    • La chromatographie est une méthode de séparation et d'analyse des composants d'un mélange, basée sur leur distribution différentielle entre une phase stationnaire et une phase mobile.

    1- Principes de Base et Théorie

    • La chromatographie est une méthode de séparation et d'analyse des composants d'un mélange, basée sur leur distribution différentielle entre une phase stationnaire (solide ou liquide fixe) et une phase mobile (liquide ou gaz).
    • La chromatographie sur colonne est une technique utilisant des colonnes en verre pour séparer les composants d'un mélange.
    • La séparation des constituants est due aux interactions variées avec la phase stationnaire sous l'influence de la gravité.
    • La chromatographie haute pression (HPLC) améliore l'efficacité et le débit de séparation en utilisant des pressions plus élevées et des colonnes plus petites.

    2- Chromatographie en phase gazeuse (CPG ou CG)

    • Le principe de la CPG implique la vaporisation de l'échantillon et son injection au sommet de la colonne.
    • Un courant de gaz inerte (gaz vecteur) transporte l'échantillon à travers la colonne.
    • La séparation est basée sur la répartition différentielle des composants entre une phase stationnaire et une phase gazeuse.
    • Les instruments de la CPG incluent l'injecteur, le gaz vecteur, la colonne, le four et le détecteur (comme le détecteur à ionisation de flamme (FID)).
    • Des types de colonnes incluent les colonnes remplies (plus anciennes) et les colonnes capillaires (faibles débits), avec des types d'injection tels que split et splitless.
    • L'alimentation en gaz vecteur utilise des gaz inertes (Hélium, Azote, Hydrogène ou Argon) en pureté, avec des régulations de débit spécifiques pour les colonnes remplies ou capillaires.

    3- Chromatographie en phase liquide (HPLC)

    • La HPLC utilise un liquide comme phase mobile.
    • La séparation est basée sur la répartition différentielle des composants entre une phase stationnaire et une phase liquide.
    • L'instrumentation HPLC comprend les réservoirs de phase mobile, le dégazeur, la pompe, l'injecteur, la colonne thermostatée, le détecteur et le micro-ordinateur.
    • Les détecteurs d'absorption UV-Visible sont fréquemment utilisés en HPLC.
    • Les types de détecteurs comprennent les détecteurs à longueur d'onde fixe, à longueurs d'ondes variables et à barrette de diodes.
    • La colonne est généralement placée dans un four ou une chambre thermostatée pour régler la température souhaitée.

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