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Questions and Answers
Quel est le but principal de la fixation dans la préparation des échantillons?
Quel est le but principal de la fixation dans la préparation des échantillons?
- Augmenter le contraste
- Durcir l'échantillon
- Conserver l’échantillon dans un état vivant tout en le rendant imputrescible (correct)
- Remplacer l'eau par un solvant
Quel solvant est utilisé dans la déshydratation pour les échantillons préparés en Métallographie?
Quel solvant est utilisé dans la déshydratation pour les échantillons préparés en Métallographie?
- Eau
- Ethanol
- Acétone (correct)
- Méthanol
Quel est l'objectif de l'inclusion dans les matériaux de préparation d’échantillons?
Quel est l'objectif de l'inclusion dans les matériaux de préparation d’échantillons?
- Augmenter le contraste des structures
- Durcir et inclure l'échantillon dans un milieu solide (correct)
- Fixer l'échantillon
- Obtenir des coupes ultrafines
Quelle méthode est utilisée pour réaliser des coupes fines des échantillons?
Quelle méthode est utilisée pour réaliser des coupes fines des échantillons?
Quel type de coloration est utilisé dans la métallographie pour une 'coloration négative'?
Quel type de coloration est utilisé dans la métallographie pour une 'coloration négative'?
Quels éléments lourds sont fréquemment utilisés dans la métallographie?
Quels éléments lourds sont fréquemment utilisés dans la métallographie?
Quel est l'effet de l'ombrage métallique sur un échantillon?
Quel est l'effet de l'ombrage métallique sur un échantillon?
Quels types de coupes sont réalisés pour les échantillons en métallographie?
Quels types de coupes sont réalisés pour les échantillons en métallographie?
Pourquoi utilise-t-on des sels de métaux lourds dans la préparation des échantillons?
Pourquoi utilise-t-on des sels de métaux lourds dans la préparation des échantillons?
Quel est le but de la méthode de congélation dans la préparation des échantillons?
Quel est le but de la méthode de congélation dans la préparation des échantillons?
Qu'est-ce qui est utilisé pour augmenter le contraste dans la préparation d'échantillons pour la MET?
Qu'est-ce qui est utilisé pour augmenter le contraste dans la préparation d'échantillons pour la MET?
Quelle est la résolution minimale d'un microscope électronique ?
Quelle est la résolution minimale d'un microscope électronique ?
Quelle caractéristique de l'inclusion dans une résine synthétique est importante pour la MET?
Quelle caractéristique de l'inclusion dans une résine synthétique est importante pour la MET?
Quel est le rôle de la pompe à vide dans un microscope électronique ?
Quel est le rôle de la pompe à vide dans un microscope électronique ?
Quel processus suit la déshydratation dans la préparation des échantillons?
Quel processus suit la déshydratation dans la préparation des échantillons?
Quel processus n'est pas utilisé pour préparer un échantillon pour un microscope électronique à transmission (MET) ?
Quel processus n'est pas utilisé pour préparer un échantillon pour un microscope électronique à transmission (MET) ?
Quel est l'objectif principal de la coloration topographique dans les échantillons préparés?
Quel est l'objectif principal de la coloration topographique dans les échantillons préparés?
Pour quelle type d'échantillon un microscope électronique à balayage (MEB) est-il nécessaire ?
Pour quelle type d'échantillon un microscope électronique à balayage (MEB) est-il nécessaire ?
Quel type de lentilles est utilisé dans un microscope électronique ?
Quel type de lentilles est utilisé dans un microscope électronique ?
Quelle est une caractéristique principale de l'image produite par un microscope électronique à balayage (MEB) ?
Quelle est une caractéristique principale de l'image produite par un microscope électronique à balayage (MEB) ?
À quelle température le filament de tungstène doit-il être porté pour émettre des électrons ?
À quelle température le filament de tungstène doit-il être porté pour émettre des électrons ?
Pourquoi les électrons émis sont-ils focalisés en un rayon fin ?
Pourquoi les électrons émis sont-ils focalisés en un rayon fin ?
Quel est le type de faisceau utilisé dans la microscopie électronique à transmission (MET) ?
Quel est le type de faisceau utilisé dans la microscopie électronique à transmission (MET) ?
Quel est l'objectif principal de la déshydratation dans la préparation d'échantillons pour MET ?
Quel est l'objectif principal de la déshydratation dans la préparation d'échantillons pour MET ?
Comment se fait l'observation dans un microscope électronique ?
Comment se fait l'observation dans un microscope électronique ?
À quelle vitesse les électrons sont-ils accélérés par l'anode dans un microscope électronique ?
À quelle vitesse les électrons sont-ils accélérés par l'anode dans un microscope électronique ?
Quel est le rôle du détecteur dans un microscope électronique à balayage (MEB) ?
Quel est le rôle du détecteur dans un microscope électronique à balayage (MEB) ?
Quel type d'image est produit par le MET ?
Quel type d'image est produit par le MET ?
Flashcards
Microscopie électronique
Microscopie électronique
La microscopie électronique utilise des électrons au lieu de la lumière, ce qui permet une résolution beaucoup plus élevée.
Longueur d'onde des électrons
Longueur d'onde des électrons
La longueur d'onde des électrons est beaucoup plus petite que celle des photons, ce qui permet d'observer des détails beaucoup plus petits.
Résolution en microscopie électronique
Résolution en microscopie électronique
La résolution dans la microscopie électronique est la capacité à distinguer deux points proches l'un de l'autre. Elle est de l'ordre de 0,1 nm.
Grossissement en microscopie électronique
Grossissement en microscopie électronique
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Canon à électrons
Canon à électrons
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Filament de tungstène
Filament de tungstène
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Lentilles électromagnétiques
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Microscopie électronique à transmission (MET)
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Microscopie électronique à balayage (MEB)
Microscopie électronique à balayage (MEB)
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Électrons secondaires
Électrons secondaires
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Métallisation
Métallisation
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Préparation de l'échantillon en MET
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Coloration en microscopie électronique
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Ultrastructure cellulaire
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Différences entre MET et MEB
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Fixation
Fixation
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Glutaraldéhyde en microscopie électronique
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Tétraoxyde d'osmium en microscopie électronique
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Déshydratation en microscopie
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Inclusion en microscopie
Inclusion en microscopie
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Paraffine en microscopie photonique
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Résines synthétiques en microscopie électronique
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Coupe en microscopie
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Microtome en microscopie photonique
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Ultramicrotome en microscopie électronique
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Contrastes en microscopie
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Coloration topographique en microscopie photonique
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Coloration cytochimique en microscopie photonique
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Fluorochromes en microscopie
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Contrastes en microscopie électronique
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Électronographie
Électronographie
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Study Notes
TD5: La Microscopie Electronique
- La microscopie électronique utilise des électrons, dont la longueur d'onde est nettement inférieure à celle des photons, ce qui permet une résolution plus élevée.
- La résolution est de 0,1 nm, avec un grossissement de 200 à 500 000 fois.
- Le canon à électrons émet des électrons à partir d'un filament de tungstène porté à haute température.
- Les électrons sont focalisés en un faisceau fin par un cylindre de Wehnelt puis accélérés par une anode à une tension élevée (vi = 164 000 km/s).
- L'observation se fait dans le vide pour éviter les collisions avec les molécules d'air.
- Les images sont focalisées par des lentilles électromagnétiques.
- L'observation n'est pas directe car la rétine humaine ne perçoit pas les électrons. L'image est projetée sur un écran.
- Il existe différents types de microscopes électroniques : à transmission (MET) et à balayage (MEB).
Microscope Électronique à Transmission (MET)
- Les électrons traversent l'échantillon.
- L'échantillon doit être extrêmement fin (3-10 µm ou 50-80 nm).
- Les électrons déviés par l'échantillon sont focalisés par un objectif et projetés sur un écran fluorescent pour créer l'image.
- L'image agrandie est obtenue par des objectifs, puis un projecteur.
- La préparation comprend la fixation, la déshydratation, l'inclusion et la coloration.
Microscope Électronique à Balayage (MEB)
- Les électrons ne traversent pas l'échantillon, mais le balaient.
- L'échantillon est recouvert d'une fine couche métallique.
- L'interaction des électrons avec l'échantillon génère des électrons secondaires.
- Les électrons secondaires sont détectés et utilisés pour créer l'image.
- L'image est une représentation de la surface de l'échantillon.
Préparation de l'échantillon pour la MET
- Fixation : Conserver l'échantillon dans un état proche de l'état vivant tout en le rendant imputrescible. Méthodes physiques (congélations) ou chimiques (glutaraldéhyde, tétroxyde d'osmium).
- Déshydratation : Remplacer l'eau du spécimen par un solvant compatible avec le milieu d'inclusion (éthanol, xylène pour le paraffine ; acétone pour les résines synthétiques).
- Inclusion : Durcir l'échantillon en l'incluant dans un milieu solide (paraffine, résine synthétique).
- Coupes : Couper l'échantillon en sections fines (3-10 µm pour la microscopie optique, 50-80 nm pour l'ultramicrotomie).
- Contrastes : Utiliser la coloration topographique, cytochimiques, utilisation de fluorochromes pour la microscopie optique, ou des sels de métaux lourds pour la microscopie électronique.
Types de Colorations pour la MET
- Coloration positive : Imprégner l'échantillon de sels de métaux lourds (uranium, plomb).
- Coloration négative : Utiliser un milieu dense aux électrons (comme l'acide phosphotungstique) autour de l'échantillon.
- Ombrage métallique : Vaporiser des atomes métalliques sur le spécimen sous vide pour créer un relief.
Autres informations
- La résolution maximale est de 0,2 nm avec un grossissement de 200-500 000 fois pour la microscopie optique et 1 nm en MEB.
- Les coupes fines du MET permettent une observation d'organites, molécules, etc.
- La microscopie à transmission balayage (MEB) est utilisée pour obtenir une image pseudo en 3D d'une surface pour voir le relief d'un échantillon.
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