RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Quel est le pourcentage d'ARNm par rapport au total des ARN dans les cellules?

10-15%

3-5% (correct)

20-25%

1-2%

Quel est le rôle de la queue polyA des ARNm lors de la purification?

elpermet de dégrader les ARN non intéressants

sert d'étiquette pour l'hybridation avec les oligo dT (correct)

permet de synthétiser de l'ADN

active les RNases

À quelle température se fait l'élargation lors de la réaction de transcription inverse?

60°C

37°C

50°C

42°C (correct)

Quel est l'objectif de l'ajout d'inhibiteurs chimiques de RNases lors de la réaction de transcription inverse?

de freiner les RNases Signup and view all the answers

Quel est le rôle de l'ADN polymérase lors de la synthèse du second brin d'ADNc?

de synthétiser de l'ADN à partir d'une matrice d'ADN Signup and view all the answers

Quel est le rôle de l'ARNase H lors de la synthèse du second brin d'ADN?

Degrader l'ARN uniquement lorsqu'il est complexé à de l'ADN Signup and view all the answers

Quel est le résultat final de la réaction de transcription inverse?

un ADNc simple brin Signup and view all the answers

Pourquoi ajoute-t-on une extension polyG lors de la synthèse du second brin d'ADN?

Pour hybridiser avec une amorce oligo dC Signup and view all the answers

Quel est le rôle de l'oligo dC lors de la synthèse du second brin d'ADN?

Hybridiser avec l'extension polyG Signup and view all the answers

Quel est le résultat de la ligation d'adaptateur lors du clonage d'une banque d'ADNc?

Une ligation de part et d'autre de l'ADNc double brin Signup and view all the answers

Dans le processus de clonage, quelle est la raison pour laquelle on utilise un antibiotique dans le milieu de sélection?

Pour éliminer les bactéries non transformées Signup and view all the answers

Quel est le résultat attendu de l'hybridation spécifique entre la sonde et les colonies bactériennes?

La visualisation des colonies qui contiennent une partie du gène ou le gène Signup and view all the answers

Quelle est la méthode utilisée pour identifier les colonies qui ont la séquence du gène d'intérêt?

L'hybridation sur colonies Signup and view all the answers

Quel est le produit obtenu par réverse-transcription de l'ARNm?

Un ADNc Signup and view all the answers

Quel est le but de la construction d'une banque d'ADN?

De stocker des séquences de gènes Signup and view all the answers

Quel est le rôle de la digestion enzymatique partielle dans la construction d'une banque d'ADN génomique ?

Pour fragmenter l'ADN en plusieurs parties pour insertion dans un vecteur Signup and view all the answers

Quel est le produit final obtenu après la synthèse de la deuxième chaîne d'ADNc ?

Un ADNc double brin Signup and view all the answers

Pourquoi est-il important de supprimer les inhibiteurs de RNAse lors de la préparation de l'ARNm ?

Pour éviter la dégradation de l'ARNm Signup and view all the answers

Quel est le rôle de l'hybridation avec l'oligo dC dans la préparation de l'ADNc ?

Sélectionner les séquences d'ADNc spécifiques Signup and view all the answers

Quel est le but de la réaction de transcription inverse dans la préparation de l'ADNc ?

Synthétiser l'ADNc à partir de l'ARNm Signup and view all the answers