T6: RECEPCIÓN, ALMACENAMIENTO Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS

Introducción y Contextualización

• La recepción, el archivo y el registro son pasos previos al análisis de muestras biológicas.
• La conservación de las muestras es primordial para mantener su integridad durante un tiempo determinado.
• El establecimiento de criterios asegura buenas prácticas de conservación.

Recepción de Muestras en el Laboratorio

• Tras la extracción, se deben enviar las muestras al área de análisis acompañadas de las solicitudes correspondientes.
• Las muestras se remiten a la Unidad de Recepción de Muestras mediante los sistemas habilitados.
• La recepción es la zona previa al laboratorio donde se reciben las muestras y se realizan las siguientes tareas:
  • Verificación del estado de las muestras.
  • Comprobación del etiquetado y embalaje.
  • Verificación del acta de extracción.
  • Registro de anomalías.
• Las muestras con actas incorrectas o faltantes no se pueden analizar hasta obtener la información necesaria.
• Las satisfactorias se registran y clasifican.
• La automatización de acciones mediante el SIL es una tendencia actual en laboratorios con gran volumen de muestras.
• El archivo y el registro de las muestras son tareas del técnico de laboratorio tras la recepción.
• Se debe registrar la filiación del paciente, el lugar de procedencia, la fecha y la hora de llegada.
• En la gestión se asigna un número específico a cada muestra.
• Las muestras se clasifican y las alícuotas se usan para conservación o investigación.
• Se distribuyen al área específica para ser analizadas, en su contenedor original o en uno específico.
• El sistema de seguimiento es fundamental para la gestión de muestras.
• El registro permite abordar nuevos análisis, gestionar incidencias e intercambiar datos entre servicios.
• Los softwares de seguimiento de muestras (SIL) ayudan a controlar el rendimiento del laboratorio.
• Estos sistemas deben:
  • Procesar y almacenar datos.
  • Mostrar resultados de análisis.
  • Gestionar el intercambio de información.
  • Programar y calibrar equipos.
  • Establecer flujos de trabajo.
  • Asegurar la calidad de muestras.

Caso Práctico 1: Derivación de Muestras

• Los laboratorios pueden subcontratar análisis o consultas.
• La selección de laboratorios de derivación requiere un exhaustivo procedimiento por el coordinador.
• Se deben contemplar las siguientes condiciones:
  • Requisitos documentados sin conflictos de interés.
  • Procedimientos idóneos, registro de muestras derivadas conservado y cumplimiento de requerimientos legales.
  • Condiciones específicas en contratos donde el laboratorio no pueda modificar resultados emitidos por el subcontratado.
• Hay que revisar el análisis de subcontratos revisando periódicamente las condiciones establecidas.

Almacenamiento de Muestras

• Las muestras deben analizarse lo antes posible para evitar errores en los resultados.
• Si no, se almacenan hasta su procesamiento.
• Si son demasiado grandes, se toman submuestras representativas.
• El objetivo del almacenamiento es mantener la estabilidad.
• Se recomienda realizar estudios de estabilidad para validar los protocolos de almacenamiento.

Conservación de Muestras Biológicas

• Tras el análisis, las muestras pueden conservarse por si se necesita un análisis extra.
• Las muestras conservadas deben mantener su calidad e integridad.
• Registrar la temperatura de conservación es fundamental.
  • Para siete días, se deben mantener las muestras a 4°C.
  • Para dos o tres meses, a -20°C.
• Debe evitarse la exposición al aire, la luz y la humedad.
• Se debe considerar la esterilidad del lugar y el registro de su localización física.
• Se conservarán ciertas muestras para proyectos de investigación.

Métodos de Conservación de las Muestras

• Los principales métodos son la criopreservación y la liofilización, ambos basados en la inmovilización del agua.
• El método se lleva a cabo por:
  • Cambio de temperatura
  • Cambio de fase
  • Uso de estabilizantes.
• El objetivo es, mantener la integridad o estabilidad de la muestra.
• El técnico es el encargado de seguir los protocolos.
• Criopreservación (-80 °C a -196 °C):
  • Conserva las muestras en solución acuosa a bajas temperaturas.
  • Minimiza el daño celular.
  • Deshidrata la célula y la mantiene estable a nivel intracelular.
• Liofilización:
  • Elimina el agua de la muestra por congelación y sublimación del hielo a presión reducida.
  • Se lleva a cabo al vacío (0,01 mbar) y a baja temperatura (de 20 °C a -40 °C).
  • No afecta la composición de las muestras y permite obtener muestras secas para su posterior uso.
• Existen otros métodos como la conservación en formol o las preparaciones microscópicas que no requieren condiciones especiales.

Tipos de Criopreservación

• Congelación lenta:
  • Congela las muestras con rampas de temperaturas programadas hasta -40 °C o -70 °C y se conservan en nitrógeno líquido (-196 °C).
  • Usa crioprotectores para la deshidratación celular.
  • No produce cristales de hielo, pero puede tener un efecto tóxico por la exposición a los crioprotectores.
• Vitrificación:
  • Es una técnica moderna de criopreservación.
  • La congelación ultrarrápida deshidrata la muestra minimizando la desnaturalización proteica.
  • Se usa una temperatura por debajo del punto de fusión.
  • La solución aumenta en viscosidad sin quedar cristales de hielo.
  • El riesgo de cristalización es menor, pero la técnica es más experta y laboriosa y necesita crioprotectores.

Caducidad de las Muestras y Criterios de Conservación

• Todas las muestras tienen un tiempo de caducidad tras el cual pierden sus propiedades iniciales.
• Se recomienda refrigerar las muestras de sangre (4 °C) en las primeras 24 horas.
• Si se analizan después de 24 horas, separar el suero, que se puede conservar a 4 °C hasta siete días o congelarse.
• Cada tipo de muestra presenta unas características.
• Muestra y temperatura de conservación:
  • Fluidos (sangre, orina):
    • Temperatura ambiente: 2-4 horas,
    • 4 °C: 24 horas.
  • Muestras liofilizadas:
    • -20 °C: hasta cuatro semanas.
  • Muestras con algún conservante:
    • -70 °C: hasta medio año.
  • Tejidos embebidos en parafina:
    • -80 a -150 °C: largos períodos.
    • -20 °C: cortos períodos.
  • ADN:
    • -80 °C: largos períodos.
  • ARN:
    • -80 °C: cortos-largos períodos.
  • Tejidos, células y órganos:
    • -80 a -196 °C: cortos-largos períodos.
• Especificaciones de muestras según la temperatura:
  • Sangre total con DMSO a -80 °C.
  • Tejidos homogeneizados a -80 a -150 °C.
  • Linfocitos y monocitos, capa leucoplaquetaria, líneas celulares a - 150 °C.

Caso Práctico 2: Criopreservación

• La criopreservación se usa para mantener muestras destinadas principalmente a investigación.
• Principios éticos en la obtención, manipulación y procesamiento de muestras criopreservadas para investigación:
  • Respetar toda muestra humana.
  • Contar con autorización del paciente.
  • Informar previamente del análisis a realizar.
  • Mantener la confidencialidad.
• El nitrógeno líquido se usa en contenedores apropiados diseñados para almacenar las muestras.

Este documento describe el proceso de recepción y conservación de muestras biológicas en el laboratorio. Incluye la verificación del estado de las muestras, la comprobación del etiquetado y embalaje, y el registro de anomalías. Se destaca la importancia de la conservación para mantener la integridad de las muestras.