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Questions and Answers
¿Cuál es el propósito de la Curva de Calibración en el método Lambert-Beer?
¿Cuál es el propósito de la Curva de Calibración en el método Lambert-Beer?
El intercepto de la curva de calibración debe ser distinto de cero para que la ley de Lambert-Beer se cumpla.
El intercepto de la curva de calibración debe ser distinto de cero para que la ley de Lambert-Beer se cumpla.
False (B)
¿Qué relación se utiliza para determinar la concentración de una solución desconocida?
¿Qué relación se utiliza para determinar la concentración de una solución desconocida?
Relación de tres
La Absorbancia se mide a una longitud de onda de _______ nm en el ejemplo dado.
La Absorbancia se mide a una longitud de onda de _______ nm en el ejemplo dado.
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Relaciona los siguientes términos con sus descripciones:
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¿Cuál de las siguientes condiciones debe cumplir una sustancia para ser cuantificada mediante Absorciometría?
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La ley de Lambert-Beer indica que la absorbancia es proporcional a la concentración de la sustancia medida.
La ley de Lambert-Beer indica que la absorbancia es proporcional a la concentración de la sustancia medida.
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¿Qué método se utiliza para obtener la concentración de una solución problema?
¿Qué método se utiliza para obtener la concentración de una solución problema?
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Para cuantificar una sustancia, generalmente se escogen cromógenos cuyo coeficiente de __________ molar sea alto.
Para cuantificar una sustancia, generalmente se escogen cromógenos cuyo coeficiente de __________ molar sea alto.
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Empareja los términos con su definición:
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¿Qué se debe hacer si una sustancia no tiene color para su cuantificación?
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La curva de calibración siempre debe resultar en una línea recta si se sigue la ley de Lambert-Beer.
La curva de calibración siempre debe resultar en una línea recta si se sigue la ley de Lambert-Beer.
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¿Qué variable se necesita conocer para calcular la concentración de un cromóforo puro?
¿Qué variable se necesita conocer para calcular la concentración de un cromóforo puro?
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¿Cuál es una de las aplicaciones más comunes de la espectrofotometría UV-Visible?
¿Cuál es una de las aplicaciones más comunes de la espectrofotometría UV-Visible?
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La ley de Lambert-Beer se aplica independientemente de la longitud de onda utilizada.
La ley de Lambert-Beer se aplica independientemente de la longitud de onda utilizada.
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¿Qué se debe utilizar para analizar una muestra con espectrofotometría?
¿Qué se debe utilizar para analizar una muestra con espectrofotometría?
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En el análisis cuantitativo, se puede determinar la concentración de sustancias como __________ en muestras clínicas.
En el análisis cuantitativo, se puede determinar la concentración de sustancias como __________ en muestras clínicas.
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Relaciona los componentes del espectrofotómetro con su función:
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¿Qué ocurre a elevadas concentraciones de soluto durante un análisis espectrofotométrico?
¿Qué ocurre a elevadas concentraciones de soluto durante un análisis espectrofotométrico?
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El análisis cualitativo en espectrofotometría se utiliza para medir la concentración exacta de un compuesto.
El análisis cualitativo en espectrofotometría se utiliza para medir la concentración exacta de un compuesto.
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¿Qué permite la curva de calibrado en un análisis espectrofotométrico?
¿Qué permite la curva de calibrado en un análisis espectrofotométrico?
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¿Cuál es la concentración de calcio de la muestra problema, según la interpolación de la absorbancia?
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La ecuación para calcular la absorbancia es y = 0.04x + 0.
La ecuación para calcular la absorbancia es y = 0.04x + 0.
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¿Qué representa el 'b' en la ecuación de la recta y = bx + a?
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El factor de calibración (FC) se calcula como FC = [X + ___].
El factor de calibración (FC) se calcula como FC = [X + ___].
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Relaciona las concentraciones de calcio con su respectiva absorbancia:
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Si 10 mg/dl corresponse a 0,4 en la absorbancia, ¿qué valor representa 0,5 en la regla de tres?
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El intercepto 'a' de la ecuación de la recta es igual a 0.
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¿Cuál es el promedio de las concentraciones de los estándares usado para calcular el FC?
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Study Notes
Guía Espectrofotometría I y II
- Instrumentos analíticos: diferentes modelos de espectrofotómetros UV-VIS (ultravioleta-visible) se muestran en imágenes. Estos incluyen espectrofotómetros de haz simple, espectrofotómetros UV/Vis (haz simple o doble) e instrumentos analíticos de laboratorio.
- Química clínica: la asignatura en la que se usa la espectrofotometría para analizar muestras biológicas.
Objetivos de la Espectrofotometría UV-VIS
- Conocer los fundamentos básicos de la técnica y su uso en química clínica.
- Saber operar un espectrofotómetro.
- Ejecutar un espectro de absorción de soluciones coloreadas.
- Realizar una curva de calibrado y determinar el coeficiente de extinción molar.
- Determinar la concentración de una muestra problema utilizando la ley de Lambert-Beer.
Introducción a la Espectrofotometría
- La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que mide la cantidad de luz absorbida por una sustancia en solución.
- La cantidad de luz absorbida depende linealmente de la concentración de la sustancia.
- Se utiliza un espectrofotómetro para seleccionar la longitud de onda de la luz y medir la cantidad de luz absorbida.
Importancia de la Técnica
- Es una técnica útil y accesible para determinar la concentración de biomoléculas en soluciones y muestras biológicas.
- Se utiliza para identificar y cuantificar compuestos, así como caracterizarlos. Se usa mediante reacciones con reactivos específicos para obtener un producto coloreado detectable.
Fundamentos Teóricos
- Absorción de luz: las moléculas absorben luz en el rango UV-VIS dependiendo de su estructura.
- Radiación electromagnética: la luz es una forma de transmisión de energía a través del vacío u otro medio. Una onda tiene amplitud y longitud de onda (expresada en nanómetros (nm) o angstroms (Å)).
- Espectro electromagnético: el espectro de la radiación electromagnética muestra diferentes longitudes de onda, incluyendo el rango visible.
Región UV y Visible
- El rango UV cercano (180-380 nm) es de alta energía, causando daño a los ojos y quemaduras en la piel.
- La región visible (400-780 nm) es la porción del espectro que percibimos como colores.
- El espectro UV-visible es crítico para analizar compuestos orgánicos.
Aspectos Cualitativos de la Espectroscopía
- Los espectros de absorción muestran la cantidad de luz absorbida por una sustancia en diferentes longitudes de onda.
- Los picos de absorción son únicos para moléclas (clorofila, carotenoides).
Aspectos Cuantitativos: Ley de Lambert-Beer
- La absorbancia (A) es proporcional a la concentración (C) de la sustancia, la longitud de la trayectoria (l) de la luz a través de la muestra y el coeficiente de extinción molar (ε).
- Formula: A = εcl
- Se necesita una curva de calibración para que los cálculos sean correctos.
Equipo Utilizado en Espectrofotometría UV-VIS
- Fuentes de radiación (lamparas). Lampas de tungsteno para región visible y de hidrógeno o deuterio para la región UV.
- Selectores de longitud de onda. (monocromador)
- Recipientes para la muestra (cubetas)
- Detectores miden la intensidad de la radiación para obtener la absorbancia de la muestra.
Aplicaciones de la Espectrofotometría UV-VIS
- Análisis cualitativo: identificación de sustancias.
- Análisis cuantitativo: determinación de concentraciones en diversos fluidos (suero, plasma, orina).
- Métodos cuantitativos: curva de calibración.
Unidades de medida
- Absorbancia (A): unidad adimensional.
- Longitud (l): comúnmente en cm.
- Concentración (C): varias unidades posibles (molar (M), milimolar (mM), g/100mL, etc.)
- Coeficiente de extinción (ε): unidades dependen de la unidad de concentración.
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Description
Este cuestionario evalúa tu comprensión sobre la Curva de Calibración en el método de Lambert-Beer. Se abordarán conceptos clave como la absorbancia, las condiciones de cuantificación y la relación para determinar la concentración de soluciones. Ideal para estudiantes de química que buscan reforzar sus conocimientos sobre técnicas analíticas.
