Simulacro Test 9B Prueba de conocimientos sobre electroforesis

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Questions and Answers

La electroforesis (EF) es una técnica:

  • en la que se utiliza una corriente eléctrica con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica
  • en la que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y carga eléctrica (correct)
  • en la que se utiliza una corriente eléctrica con la finalidad de separar biomoléculas según su tamaño y forma
  • en la que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas según su forma y carga eléctrica

La mayoría de las biomoléculas poseen una carga eléctrica, cuya magnitud depende de:

  • pH (correct)
  • Interacciones polares
  • La I eléctrica
  • Tamaño

No es medio de soporte para la electroforesis:

  • Papel
  • Vidrio (correct)
  • Agarosa
  • Poliacrilamida

Con SDS, la movilidad electroforética de la proteína depende exclusivamente de:

<p>Masa molecular (C)</p> Signup and view all the answers

Un volumen de muestra aproximado en SDS-PAGE es:

<p>5 uL (B)</p> Signup and view all the answers

El stacking gel tiene como función:

<p>Concentrar la muestra en una banda estrecha (D)</p> Signup and view all the answers

El isoelectroenfoque se basa en que:

<p>Al avanzar los componentes de la muestra a lo largo del gel se encuentran en entornos de pH diferente, y eventualmente alcanzan una región en la cual el pH es igual al punto isoeléctrico de la molécula muestra y, en consecuencia, ésta detiene su avance (B)</p> Signup and view all the answers

Tampón TAE se emplea habitualmente en electroforesis de agarosa con ADN, qué composición presenta:

<p>Tris 40 mM, ác. acético 19 mM, EDTA 1 mM, pH=7,5 (B)</p> Signup and view all the answers

El EDTA es de naturaleza:

<p>anfótera (D)</p> Signup and view all the answers

El bromuro de etidio es un agente:

<p>intercalante en ADN (B)</p> Signup and view all the answers

En la actualidad, el agente de visualización de ADN más empleado por su baja toxicidad es:

<p>SYBR Green (B)</p> Signup and view all the answers

El reactivo de visualización de ADN llamado GelRed™ se basa en:

<p>Emite fluorescencia de color rojo (C)</p> Signup and view all the answers

La electroforesis bidimensional es una técnica de alta resolución cuyo objetivo es:

<p>La separación de mezclas de proteínas altamente complejas (B)</p> Signup and view all the answers

En electroforesis de campo pulsante se emplean:

<p>geles de agarosa al 1% (D)</p> Signup and view all the answers

La movilidad electroforética μ es:

<p>La velocidad por unidad de campo (D)</p> Signup and view all the answers

La fórmula de la movilidad electroforética es:

<p>v/E = μ (A)</p> Signup and view all the answers

El movimiento de las moléculas en el seno de un E dentro de una matriz como un gel, esta gobernado también por dos fuerzas…:

<p>La fricción con el solvente y, por otro lado, las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano debido a que poseen energía cinética propia denominada difusión (D)</p> Signup and view all the answers

La Agarosa es un:

<p>Polisacárido, producto purificado de algas (composición similar al agar-agar). Se disuelve en caliente (aprox. 95 °C) y al enfriar solidifica formando un gel, de alta porosidad (D)</p> Signup and view all the answers

Es un detergente aniónico empleado en EF que se une a las proteínas, desnaturalizándolas en una conformación extendida recubierta de moléculas del detergente …:

<p>SDS (A)</p> Signup and view all the answers

En EF de proteínas, para reducir los enlaces S-S se suele emplear comúnmente el:

<p>β-mercaptoetanol (D)</p> Signup and view all the answers

Indique un agente iniciador de la polimerización del gel de acrilamida:

<p>Persulfato amónico en baja concentración (B)</p> Signup and view all the answers

Indique un agente catalizador de la polimerización del gel de acrilamida:

<p>TEMED (C)</p> Signup and view all the answers

Para controlar el avance del frente de electroforesis, se añade a la muestra un colorante marcador (“tracking dye”), molécula cargada y de pequeño tamaño, el más habitual es:

<p>Azul de bromofenol (B)</p> Signup and view all the answers

El colorante anterior…:

<p>Avanza más que cualquier componente de la muestra (B)</p> Signup and view all the answers

Señale la correcta:

<p>todas lo son (D)</p> Signup and view all the answers

bis. La Electroforesis de campo pulsante se basa en:

<p>Alterar periódicamente la orientación del campo eléctrico aplicado, activando alternativamente dos pares de electrodos. El frecuente cambio de dirección del campo eléctrico consigue que las moléculas se desplieguen y avancen a través de los poros en conformación extendida (D)</p> Signup and view all the answers

Se puede obtener una estimación de la masa molecular (en kDa) de proteínas empleando SDS-PAGE, y de fragmentos de DNA (en pb) empleando electroforesis en agarosa …:

<p>En ambos casos, en uno de los pocillos del gel se carga una mezcla de moléculas patrón de tamaño conocido, con el fin de poder trazar la curva de calibrado (C)</p> Signup and view all the answers

Una de las aplicaciones de la EF es la elaboración de Mapas de restricción de DNA que se basa en…:

<p>Consiste en tratarlo con distintas enzimas de restricción, analizar mediante electroforesis en gel de agarosa los fragmentos resultantes e intentar reconstruir la secuencia de la molécula original (C)</p> Signup and view all the answers

El xileno-cianol …:

<p>Es de color azul (A)</p> Signup and view all the answers

En la electroforesis bidimensional …:

<p>1º las proteínas son separadas en un gel con gradiente de pH en condiciones desnaturalizantes de acuerdo con su punto isoeléctrico (A)</p> Signup and view all the answers

La electroforesis bidimensional:

<p>Es una técnica de alta resolución (D)</p> Signup and view all the answers

La electroforesis de campo pulsante se emplea para poder separar y visualizar:

<p>Moléculas o fragmentos de DNA de longitud superior a 20-40 kb (A)</p> Signup and view all the answers

El fundamento de la técnica anterior es:

<p>Se emplean geles de agarosa al 1 %, y se altera periódicamente la orientación del campo eléctrico aplicado, activando alternativamente dos pares de electrodos (A)</p> Signup and view all the answers

La electroforesis preparativa tiene como objetivo:

<p>Obtener cantidades significativas de los componentes de la muestra por separado (A)</p> Signup and view all the answers

Cuántas pb presenta aproximadamente la banda B en el electroferograma superior:

<p>1960 (C)</p> Signup and view all the answers

De qué molécula hablamos en la cuestión anterior:

<p>ADN (B)</p> Signup and view all the answers

El campo eléctrico necesario para llevar a cabo una separación por electroforesis capilar es usualmente:

<p>10-30 kV (D)</p> Signup and view all the answers

No es una ventaja de la electroforesis capilar:

<p>Empleo de colorantes no tóxicos en muy pequeñas cantidades (A)</p> Signup and view all the answers

Qué caracteriza al flujo electroosmótico de la electroforesis capilar:

<p>Su perfil de avance plano (C)</p> Signup and view all the answers

La separación en electroforesis capilar se lleva a cabo en un tubo capilar de diámetro interno:

<p>10-75 um (D)</p> Signup and view all the answers

Algunos medios de soporte (“geles”, medios semisólidos o gelatinosos) están formados por polímeros que forman una malla, matriz o red tridimensional a través de la cual deben avanzar las moléculas de la muestra, que queda embebida en el medio de soporte electroforético. Como consecuencia, la fricción es notable y los factores de …………. y … ……… adquieren una alta relevancia en la separación:

<p>forma y tamaño (D)</p> Signup and view all the answers

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Study Notes

Propiedades de las Biomoléculas

  • La mayoría de las biomoléculas tienen una carga eléctrica, cuya magnitud depende de la proteína o molécula en cuestión.

Electroforesis (EF)

  • La electroforesis es una técnica que separa moléculas según su carga eléctrica y tamaño.
  • La movilidad electroforética de una proteína depende exclusivamente de su masa molecular cuando se utiliza SDS (detergente aniónico).
  • Un volumen de muestra aproximado en SDS-PAGE es de 10-20 μl.

Funciones del Stacking Gel

  • El stacking gel se encarga de concentrar las moléculas de la muestra en una zona pequeña antes de ingresan al gel de separación.

Isoelectroenfoque

  • El isoelectroenfoque se basa en la capacidad de las moléculas de migrar hacia el polo de carga opuesta hasta alcanzar su punto isoeléctrico.

Tampón TAE

  • El tampón TAE se utiliza habitualmente en electroforesis de agarosa con ADN y presenta una composición de 40 mM de tris, 20 mM de ácido acético y 1 mM de EDTA.

EDTA y Bromuro de Etidio

  • El EDTA es un agente quelante que se utiliza como anticoagulante.
  • El bromuro de etidio es un agente intercalante que se utiliza para la visualización de ADN.

Electroforesis Bidimensional

  • La electroforesis bidimensional es una técnica de alta resolución que tiene como objetivo separar proteínas según su carga y masa molecular.

Electroforesis de Campo Pulsante

  • La electroforesis de campo pulsante se utiliza para separar moléculas que tienen cargas eléctricas similares.

Movilidad Electroforética

  • La movilidad electroforética (μ) se calcula mediante la fórmula μ = q/E * η, donde q es la carga eléctrica, E el campo eléctrico y η la viscosidad del medio.

Agarosa y SDS

  • La agarosa es un polisacárido que se utiliza como medio de soporte en electroforesis.
  • El SDS es un detergente aniónico que se utiliza para desnaturalizar proteínas y unirles para obtener una conformación extendida.

Agentes de Visualización

  • El GelRed™ es un reactivo de visualización de ADN que se basa en la intercalación de moléculas entre las bases nitrogenadas del ADN.
  • El xileno-cianol es un agente iniciador de la polimerización del gel de acrilamida.

Electroforesis Capilar

  • La electroforesis capilar es una técnica que se utiliza para separar moléculas en un tubo capilar de diámetro interno.
  • La separación en electroforesis capilar se lleva a cabo mediante la acción del campo eléctrico y la fricción.

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