Preparazione del Campione in Microbiologia

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Questions and Answers

Quale tecnica prevede l'aggiunta del substrato agarizzato a una sospensione di campione in una piastra sterile?

  • Tecnica per distribuzione superficiale
  • Tecnica per inclusione (correct)
  • Spatola sterile
  • Semina in piastra

Quale è il volume tipico di inoculo utilizzato nella tecnica per inclusione?

  • 12-15 ml
  • 1 ml (correct)
  • 24 ml
  • 0.1 ml

Quale temperatura viene mantenuta in fusione il substrato agarizzato per la tecnica per inclusione?

  • 90°C
  • 45-46°C (correct)
  • 37°C
  • 100°C

Qual è il ruolo della spatola sterile nella tecnica per distribuzione superficiale?

<p>Distribuire l'inoculo su tutta la superficie della piastra (B)</p> Signup and view all the answers

Quale è il consiglio per evitare di trascinare microrganismi da una piastra all'altra durante la tecnica per distribuzione superficiale?

<p>Utilizzare una spatola sterile per ogni diluizione (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è il primo passo nella preparazione di un campione solido per l'analisi batterica?

<p>Omogeneizzare il campione con un diluente sterile. (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa permette di ottenere la teoria delle diluizioni decimali applicata a un campione di latte?

<p>Contare le Unitá Formanti Colonia (UFC) dopo la diluizione. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è uno degli strumenti utilizzati per omogeneizzare un campione in laboratorio?

<p>Stomacher. (B)</p> Signup and view all the answers

In quale proporzione deve essere diluito un campione in preparazione per l'analisi batterica?

<p>1:10. (C)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni è vera riguardo alla pesata del campione per l'analisi?

<p>La quantità deve essere compresa tra 10-25 g. (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il primo passaggio per la preparazione delle diluizioni microbiche?

<p>Pesare 10 g di prodotto in sterilità. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la diluizione ottenuta dopo aver trasferito 1ml di omogenato in 9 ml di diluente sterile?

<p>10-2 (B)</p> Signup and view all the answers

Quale tecnica consente di rilevare teoricamente 10 UFC/ml?

<p>Tecnica di inclusione. (A)</p> Signup and view all the answers

Quale informazione è cruciale per determinare quante diluizioni realizzare?

<p>Approssimazione del carico di microrganismi presente nel campione. (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa si deve utilizzare per ogni nuova diluizione da realizzare?

<p>Una nuova pipetta sterile. (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è la diluizione finale più alta che può essere ottenuta nelle serie di diluizione descritte?

<p>10-4 (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni è vera riguardo il numero minimo di microrganismi rilevabili?

<p>Si possono rilevare 10 UFC/g con la tecnica di inclusione. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione principale del stomacher nell'analisi microbiologica?

<p>Omogeneizzare il campione. (D)</p> Signup and view all the answers

Quale di queste soluzioni viene utilizzata come diluente per le analisi microbiologiche?

<p>Soluzione fisiologica (NaCl, H2O) (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è il primo passo nel procedimento di diluizione seriale per la carica batterica?

<p>Prelevare 1ml di campione e diluirlo in 9 ml (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa indica la sigla UFC in microbiologia?

<p>Unità Formanti Colonie (D)</p> Signup and view all the answers

Quale diluizione si ottiene diluendo 1ml di una soluzione 1:10 in 9 ml di eluente?

<p>1:100 (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il materiale necessario per effettuare le diluizioni seriali?

<p>Pipette sterili da 1ml e tubi con 9 ml di diluente sterile (C)</p> Signup and view all the answers

Come deve avvenire l'omogeneizzazione del campione durante le analisi microbiologiche?

<p>Con un agitatore automatico (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il risultato corretto della diluizione 1:100 se si parte da un campione iniziale?

<p>$10^{-4}$ (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione principale delle diluizioni seriali in microbiologia?

<p>Determinare la carica batterica del campione (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la formula per calcolare il numero di unità formanti colonie (UFC) in un millilitro di prodotto?

<p>$ rac{ ext{ΣC}}{n_1 imes n_2 imes d}$ (D)</p> Signup and view all the answers

Cosa indica il fattore di diluizione relativo alla prima diluizione contabile?

<p>Il rapporto di diluizione applicato al campione (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il risultato dell'esempio dato per le UFC quando le colonie contate sono 83, 97, 13 e 10?

<p>9.1 x 10^3 ufc/g (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa rappresenta 'ΣC' nella formula per il calcolo delle UFC?

<p>La somma del numero di colonie contate (A)</p> Signup and view all the answers

Quali valori sono stati ottenuti dalla conta delle colonie per la seconda diluizione?

<p>13 e 10 colonie (C)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti è una forma corretta di diluizione buone da utilizzare nei calcoli?

<p>10-3 e 10-6 (D)</p> Signup and view all the answers

Nella conta delle colonie, cosa indica un 'Inc.' superiore a 300?

<p>Un numero elevato di colonie per volume di campione (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa indica 'n1' nella formula delle UFC?

<p>Il numero di piastre per la prima diluizione (A)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni è corretta riguardo alle unità formanti colonie (UFC)?

<p>Un'unità formante colonia è visibile ad occhio nudo quando ci sono più di 10 milioni di cellule. (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è la temperatura più comunemente utilizzata per l'incubazione delle piastre?

<p>37°C (C)</p> Signup and view all the answers

Come viene calcolata la carica batterica iniziale partendo dalle piastre contabili?

<p>Moltiplicando il numero di colonie per il fattore di diluizione. (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è la condizione necessaria affinché una piastra sia considerata contabile?

<p>Deve contenere un numero non superiore a 200 colonie. (D)</p> Signup and view all the answers

Quale dei seguenti fattori non è fondamentale nella scelta delle condizioni di incubazione per i microrganismi?

<p>Tipo di agar (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni sulle diluizioni seriali è corretta?

<p>Le colonie diminuiscono di un fattore 10 con ogni diluizione successiva. (D)</p> Signup and view all the answers

Che cosa rappresenta una colonia in un terreno di coltura?

<p>Un solo tipo di cellula derivante da una cellula originaria. (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni è vera riguardo all'incubazione delle piastre?

<p>La scelta delle condizioni di incubazione deve essere ottimale per i microrganismi specifici. (A)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti condizioni di incubazione è essenziale per garantire la crescita dei microrganismi ricercati?

<p>Tutte le opzioni sono essenziali (D)</p> Signup and view all the answers

Quale è il significato di "Unità Formanti Colonie" (UFC) in microbiologia?

<p>Numero di cellule batteriche che formano una colonia visibile su un terreno di coltura (B)</p> Signup and view all the answers

Quali sono le piastre "contabili" nelle diluizioni seriali?

<p>Le piastre con un numero di colonie inferiore a 200 (D)</p> Signup and view all the answers

Se si esegue una diluizione seriale decimale di un campione, come cambia il numero di colonie visibili su ogni piastra?

<p>Riduce di un fattore 10 per ogni diluizione (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il vantaggio principale dell'utilizzo delle diluizioni seriali per l'identificazione della carica batterica?

<p>Permette di ottenere piastre con un numero di colonie facilmente contabili (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il fattore principale che determina la scelta del tipo di terreno di coltura per un'analisi batterica?

<p>Il tipo di microrganismo da ricercare (A)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti azioni può contribuire a ridurre il rischio di contaminazione durante la preparazione delle diluizioni seriali?

<p>Tutte le opzioni sono corrette (A)</p> Signup and view all the answers

Per quale motivo è importante utilizzare una diluizione seriale quando si analizza un campione con alta carica batterica?

<p>Permette di ottenere risultati più accurati (A)</p> Signup and view all the answers

Quale dei seguenti fattori non influenza il numero di colonie contate su una piastra dopo l'incubazione?

<p>Tipo di piastra utilizzata (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni descrive correttamente il processo di formazione di una colonia batterica su un terreno di coltura?

<p>Una singola cellula batterica si divide in due cellule figlie, che si dividono ancora, formando un ammasso di cellule visibile ad occhio nudo (B)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Diluizioni contabili

Si usano le ultime tre diluizioni in piastra per analisi.

Inglobamento

Tecnica di mescola dell’inoculo con substrato agarizzato.

Spatolamento

Distribuzione superficiale dell’inoculo su substrato solido.

Solidificazione del substrato

Il substrato agarizzato deve solidificarsi prima dell'incubazione.

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Sterilizzazione del terreno

Preparare il terreno specifico e sterilizzarlo prima dell'uso.

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Preparazione del campione

Processo per analizzare microrganismi in campioni alimentari.

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Omogeneizzazione

Distribuzione uniforme di microrganismi in un campione solido.

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Diluizioni decimali

Tecnica per ridurre la concentrazione di microrganismi in un campione.

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Contare le UFC

Contare le Unità Formatrici di Colonia per valutare la carica batterica.

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Piastra nutritiva

Supporto per la crescita di microrganismi durante l'analisi.

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UFC

Unità Formanti Colonie, misura della carica batterica.

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Formula UFC

ΣC / (n1 * n2 * d) per calcolare UFC.

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ΣC

Somma del numero totale di colonie contate.

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n1 e n2

Numero di piastre usate per le prime due diluizioni.

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d (fattore di diluizione)

Fattore che rappresenta la diluizione iniziale.

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Esempi di diluizioni

Distribuzione di colonie attraverso diverse diluizioni.

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Calcolo UFC con esempi

Applicazione pratica della formula con dati di esempio.

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Diluizioni 10-1, 10-2...

Esempi di diverse diluizioni usate nel calcolo.

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Soluzione fisiologica

Soluzione di NaCl e H2O utilizzata per diluizioni.

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Sale peptone o triptone

Miscela di peptone, NaCl e H2O per crescita microbica.

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Soluzione di Ringer

Contiene NaCl, KCl, CaCl2 e NaHCO3, usata in biologica.

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Diluizioni seriali

Procedure per determinare la carica batterica di campioni.

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Carica batterica

Numero di Unità Formanti Colonie (UFC) per ml o g.

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Procedimento di diluizione

Passaggio per ottenere diluizioni decimali dai campioni.

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Pipette sterili

Strumenti utilizzati per prelevare campioni liquidi in microbiologia.

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Terreno nutritivo

Substrato usato per crescere batteri in laboratorio.

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Incubazione delle piastre

Processo di selezione di temperatura, tempo e condizioni per la crescita dei microrganismi in laboratorio.

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Unità Formanti Colonie (UFC)

Numero di cellule che formano una colonia visibile ad occhio nudo sul terreno di coltura.

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Colonia

Ammasso di cellule uguali derivante da una singola cellula in un terreno di coltura.

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Piastre contabili

Piastre che contengono un numero di colonie che è misurabile e utile per il calcolo.

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Carica batterica iniziale

Quantità di batteri presenti in un campione prima della diluizione.

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Tecniche di conta

Metodi usati per determinare il numero di colonie su piastra.

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Condizioni di ana/aerobiosi

Ambiente privo di ossigeno o con ossigeno per la crescita dei microrganismi.

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Numero convenzionale

Limite di 200 colonie per conteggio su piastre.

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Fattore 10

Riduzione della concentrazione di cellule in ogni passaggio di diluizione seriale.

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Campione solido

Un campione in forma solida per l'analisi microbica.

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Diluzione 1/10

Diluzione ottenuta aggiungendo 90 ml di diluente a 10 g di campione.

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Omogeneizzatore Stomacher

Strumento utilizzato per omogeneizzare campioni solidi.

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Technique di spatolamento

Metodo usato per contare microrganismi su piastra.

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Colonie contabilabili

Numero di colonie che possono essere contate sull'agar.

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Carico microbico

Numero di microrganismi presenti in un campione.

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Diluizione secondo

La diluizione 10^-2 ottenuta dopo la diluizione iniziale.

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Study Notes

Preparazione del campione

  • I campioni alimentari liquidi possono essere analizzati direttamente o dopo diluizione.
  • I campioni alimentari solidi devono essere omogeneizzati in un adatto diluente per disperdere i microrganismi nella fase liquida.
  • L'omogeneizzazione viene effettuata con uno Stomacher per sfibrare il campione.
  • Il tempo di omogeneizzazione dipende dalla durezza e consistenza del campione.

Soluzioni diluenti

  • Servono per realizzare le diluizioni decimali.
  • Soluzioni fisiologiche (NaCl, Hâ‚‚O).
  • Sale peptone o triptone (peptone/triptone, NaCl, Hâ‚‚O).
  • Soluzione di Ringer (NaCl, KCl, CaClâ‚‚, NaHCO₃).
  • Citrato di sodio.

Diluizioni Seriali

  • Sono necessarie in microbiologia quantitativa per determinare la carica batterica.
  • Il procedimento si basa su diluizioni decimali seriali del campione.
  • Si preleva 1 ml di campione e si diluisce in 9 ml di diluente sterile.
  • Il procedimento può essere ripetuto per ottenere diverse diluizioni.
  • Le diluizioni vengono piastrate su un terreno nutritivo.
  • I metodi di piastramento sono: inclusione e spatolamento.

Analisi microbiologiche - campioni liquidi

  • Si usano pipette sterili da 1 ml e tubi contenenti 9 ml di diluente sterile.
  • Si preleva 1 ml di campione liquido con una pipetta sterile.
  • Si trasferisce il campione in 9 ml di diluente sterile.
  • Si effettua una diluizione 1/10.
  • Si omogeneizza con cura mediante agitatore automatico.
  • Si ripetono le operazioni per ottenere diluizioni decimali successive.
  • Si usa sempre una nuova pipetta sterile per ogni diluizione.

Analisi microbiologiche - campioni solidi

  • Si usano pipette sterili da 1 ml, tubi contenenti 9 ml di diluente sterile, sacchetti e stomacher sterili.
  • Si pesano 10 g del prodotto in sterilità.
  • Si aggiungono 90 ml di diluente sterile per una diluizione 1/10.
  • Si omogeneizza il campione mediante stomacher.
  • Si preleva 1 ml dell'omogenato e si trasferisce in provetta con 9 ml di diluente sterile.
  • Si ripetono le operazioni per ottenere altre diluizioni decimali successive.
  • Si usa sempre una nuova pipetta sterile per ogni diluizione.

Diluizioni Seriali (considerazioni)

  • Le diluizioni sono effettuate per conoscere la carica batterica.
  • Si considera il numero di cellule tra le diluizioni e si sceglie le diluizioni contabili.
  • Per i campioni liquidi, l'UFC/ml si ottiene con le tecniche di inclusione.
  • Per i campioni solidi, l'UFC/g si ottiene con le tecniche di spatolamento.

Incubazione delle piastre

  • La scelta della temperatura, tempo e condizioni ana/aerobiosi dipende dal tipo di microrganismi da ricercare.
  • Gli ottimi parametri vengono applicati al processo di incubazione.

Unità Formanti Colonie (UFC)

  • Le cellule che rimangono unite in colonie sono visibili ad occhio nudo.
  • L'ammasso di cellule uguali si chiama colonia.
  • Il numero di UFC rappresenta la carica batterica del campione.

Diluizioni Seriali (piastre)

  • Le piastre che derivano da diverse diluizioni hanno un numero di colonie progressivamente minore.
  • Si considerano contabili le piastre con un numero di colonie inferiore o uguale a 200.
  • Le piastre non contabili hanno un numero di colonie superiore a 200.

Tecniche di conta

  • La conta in piastra si usa per determinare la concentrazione batterica.
  • È considerata solo le piastre con un numero di colonie non superiore a 200.
  • La formula di calcolo si basa sulla somma delle colonie di tutte le piastre contabili e il fattore di diluizione.

Esempi

  • Vengono mostrati esempi pratici con vari valori di diluizione e numero di colonie.
  • I risultati vengono usati per calcolare la carica batterica iniziale.

Tecniche di semina in piastra

  • La tecnica di inclusione prevede il versamento del campione e la sospensione nel substrato solidificabile.
  • La tecnica di spatolamento prevede di distribuire la sospensione microbica su tutta la superficie del substrato solido.

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