T10: MUESTRAS SANGUÍNEAS

Introducción y contextualización práctica

• Las muestras de sangre son comunes en laboratorios clínicos debido a la sencillez de las técnicas y la información relevante que proporcionan sobre la salud del paciente.
• Se pueden extraer de una vena, arteria, o de la zona blanda del dorso del dedo, requiriendo diferentes técnicas.

Generalidades de la sangre. Composición

• La sangre es un tejido líquido compuesto por plasma y elementos formes (células sanguíneas).
• El color rojo se debe a la hemoglobina en los glóbulos rojos.
• El plasma, de color amarillento, está formado por 95% de agua y sustancias disueltas como iones, componentes orgánicos y proteínas plasmáticas (albúminas, globulinas, factores de coagulación).
• Las células sanguíneas se originan en la médula ósea a partir de células madre en un proceso llamado hematopoyesis.

Tipos de células sanguíneas

• Glóbulos rojos (eritrocitos o hematíes): Son las células más abundantes (99%), sin núcleo, con una vida útil de 120 días. Transportan oxígeno a través de la hemoglobina y contribuyen al transporte de dióxido de carbono.
• Glóbulos blancos (leucocitos): Contienen núcleo y participan en la defensa contra patógenos.
• Granulocitos: Contienen gránulos y se dividen en neutrófilos (violetas), eosinófilos (rojos) y basófilos (azules intensos).
• Agranulocitos: No tienen gránulos y se dividen en linfocitos (núcleo grande, poco citoplasma) y monocitos (núcleo en forma de riñón).
• Los neutrófilos y monocitos fagocitan agentes extraños, los eosinófilos y basófilos actúan en reacciones alérgicas, y los linfocitos en la inmunidad específica.
• Plaquetas (trombocitos): Discos redondos sin núcleo que duran de 8 a 12 días y ayudan a la coagulación formando un tapón plaquetario.

Tipos de muestras sanguíneas

• Las muestras de sangre se utilizan para análisis de rutina que apoyan el diagnóstico o el seguimiento de patologías.
• Tipos de muestras según su procedencia: venosa, arterial o capilar.
• Muestra de sangre venosa: Extraída del torrente sanguíneo mediante punción venosa con aguja y jeringa o sistema Vacutainer. Es de color oscuro y mate.
• Muestra de sangre arterial: Extraída de una arteria para medir la presión parcial de oxígeno, dióxido de carbono y pH. Es roja, brillante y espumosa.
• Muestra de sangre capilar: Proviene de arteriolas, vénulas y capilares, usada en niños pequeños o para controlar la glucemia. Implica pequeñas cantidades de sangre.

Técnicas de extracción sanguínea

• La extracción de sangre es común debido a su facilidad y la información que proporciona.
• Métodos de extracción: Punción venosa, arterial y capilar.
• Extracción venosa: Se seleccionan venas del miembro superior como la cubital mediana y cefálica. La vena cefálica es propensa a hematomas y dolor.
• Extracción arterial: Se usa la arteria radial (circulación colateral con la arteria cubital). Se utiliza el test de Allen.
• Extracción capilar: Se selecciona y desinfecta la zona de punción, se usa una lanceta desechable, se descarta la primera gota y se recogen las demás, se cierra el contenedor y se presiona la zona con gasa estéril.
• El test de Allen se realiza antes de la punción en la extracción arterial para valorar la circulación colateral. Un resultado negativo indica riesgo de isquemia.

Caso práctico 1: "Consideraciones previas a la extracción"

• En la extracción de muestras biológicas, el personal debe conocer los aspectos relevantes para garantizar el éxito.
• La postura del paciente afecta la composición de la sangre. Pacientes encamados tienen una reducción del componente plasmático y aumento de componentes macromoleculares y celulares.
• La extracción tras transfusión sanguínea puede alterar las concentraciones de sustancias. En pacientes cateterizados, se recomienda extraer sangre del brazo opuesto una hora después de la infusión de sueros y ocho horas después de la nutrición parenteral.
• Las extracciones tras intervenciones pueden generar interferencias: aumento de reactantes de fase aguda por procesos inflamatorios o cambios hormonales por ansiedad o estrés emocional.

Aditivos. Anticoagulantes y conservantes

• La sangre tiene componentes poco estables que requieren aditivos o agentes estabilizantes para asegurar una correcta determinación analítica.
• Los aditivos se seleccionan según el destino de la muestra. Pueden ser agentes estabilizantes, geles separadores del suero y anticoagulantes.
• Agentes estabilizantes: Preservan un componente sanguíneo específico, como los relacionados con el ARN. Pueden almacenarse varios días a temperatura ambiente o refrigerada, o durante años a bajas temperaturas.
• Geles separadores del suero: Facilitan la separación de suero y coágulo tras la centrifugación para evitar cambios bioquímicos en la muestra.
• Anticoagulantes: Impiden la coagulación, facilitando la manipulación y análisis. No deben producir hemólisis, evitar la agregación plaquetaria ni alterar el tamaño de los hematíes o la morfología de los leucocitos. Los más comunes: EDTA, heparina y citrato.

Obtención de muestras de suero

• El suero es el componente de la sangre que permanece tras retirar el coágulo sanguíneo, similar al plasma pero sin proteínas de coagulación.
• El plasma se usa para medir parámetros de coagulación, mientras que el suero se usa para electroforesis de proteínas.
• El suero puede obtenerse sin aditivos, o con activadores o gel separador.
• La separación del suero debe realizarse 30 minutos (máximo 2 horas) después de la extracción, cuando se haya formado el coágulo; se centrifuga la muestra durante 10 minutos a cierta fuerza, con los tubos cerrados.
• El suero puede mantenerse a temperatura ambiente no más de 8 horas, luego se refrigera a 4°C. Para conservarlo más de 48 horas, se congela a -20°C o -80°C.

Posibles complicaciones. Prevención de errores

• Tras el procesamiento de muestras de sangre, pueden aparecer sustancias interferentes que provocan errores en el análisis.
• Hemólisis: Destrucción de hematíes, liberando su contenido y alterando la composición. Puede deberse a factores intrínsecos del paciente o extrínsecos relacionados con la extracción o el procesamiento.
• Ictericia: Exceso de bilirrubina en la muestra, produciendo un color amarillo intenso.
• Lipemia: Exceso de lípidos (colesterol o triglicéridos), dando a la muestra una apariencia turbia o requiriendo análisis para conocer los niveles de lípidos.
• Un procesamiento preanalítico adecuado debe evitar la hemólisis y la coagulación.

Tipos de pruebas según las áreas del laboratorio

• Las muestras sanguíneas son versátiles en cuanto a las pruebas que se pueden realizar.
• Bioquímica: Se obtienen parámetros bioquímicos con suero o plasma. Se suele usar plasma por su rápida obtención, mientras que el suero se destina a pruebas especiales.
• Biología molecular: La PCR detecta microorganismos amplificando su material genético. La muestra más habitual es sangre entera con EDTA refrigerada.
• Hematología: Se realizan frotis sanguíneos (muestra capilar) y hemogramas (sangre entera con EDTA).
• Inmunología: Se utilizan distintas muestras para pruebas rápidas clínicas. Para serologías, la muestra es suero conservado. Los análisis inmunohematológicos necesitan sangre entera con EDTA refrigerada.
• Microbiología: Los hemocultivos detectan microorganismos en sangre. Requieren condiciones asépticas, gran volumen de muestras y requisitos específicos de conservación y transporte.

Análisis de la muestra. El hemograma

• A partir de muestras sanguíneas, se analiza el estado de salud mediante bioquímica sanguínea y hemograma.
• La analítica de bioquímica estudia la concentración de sustancias químicas como glucosa, urea, ácido úrico, creatinina, colesterol, triglicéridos, transaminasas, fosfatasa alcalina, calcio, hierro, potasio, sodio y bilirrubina.
• El hemograma determina la concentración de elementos formes (glóbulos rojos, blancos y plaquetas), así como su morfología y estructura.
• Glóbulos rojos, glóbulos blancos (linfocitos) y plaquetas.
• Hemoglobina (Hb): Proteína que transporta oxígeno o dióxido de carbono.
• Hematocrito (Hto): Proporción de glóbulos rojos.
• Volumen corpuscular medio (VCM): Tamaño promedio de los glóbulos rojos.
• Hemoglobina corpuscular media (HCM): Cantidad de hemoglobina por glóbulo rojo.
• Velocidad de sedimentación globular: Indica actividad inflamatoria.

Caso práctico 2: "Hemocultivos"

• El hemocultivo es el estudio microbiológico de una muestra de sangre. En el diagnóstico, se debe complementar con análisis de otros fluidos.
• La extracción debe ser desde diferentes lugares a partir de punción venosa, sin intervalo entre extracciones. Se deposita primero la sangre en los frascos anaerobios y luego en los aerobios, invirtiendo los frascos para mezclar la sangre con el medio de cultivo.
• Número de extracciones: Lo ideal es entre 2 o 3.
• Volumen de extracción: 10 ml por toma en adultos, 2 ml en neonatos y niños de hasta 1 año, y 4 ml en niños mayores de 1 año.
• Frascos usados: 10 ml de caldo de cultivo en cada frasco. En adultos, hay que poner 5 ml de sangre en cada frasco (anaerobio y aerobio); en neonatos y niños menores de un año, 1 ml, y en niños mayores de 1 año, hay que añadir 2 ml en cada frasco.
• El transporte debe hacerse lo antes posible y solo a temperatura ambiente durante cortos periodos. Los hemocultivos nunca deben refrigerarse ni congelarse.

Resumen y resolución del caso práctico de la unidad

• La sangre está compuesta por plasma sanguíneo y elementos celulares: eritrocitos (glóbulos rojos), leucocitos (glóbulos blancos) y trombocitos (plaquetas). Dependiendo del tipo de extracción (punción venosa, arterial y capilar), y se usarán aditivos para garantizar la manipulación y el transporte.
• Los niveles de glucosa plasmática en ayunas deben estar por debajo de 99. Entre 100 y 125 se considera prediabetes y por encima de 126 diabetes.

Descripción general de las muestras de sangre, su composición y los diferentes tipos de células sanguíneas. Se explica cómo se obtienen las muestras y su importancia en el laboratorio clínico. Se detalla la composición de la sangre.