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Questions and Answers
En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es… :
En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es… :
- Al azar (correct)
- En orden
- De menor a mayor
- De mayor a menor
En la pirosecuenciación la reacción de detección viene dada por la liberación previa de …:
En la pirosecuenciación la reacción de detección viene dada por la liberación previa de …:
- Pirofosfato o P2O7^4- (correct)
- ddNTP
- dNTP
- Pirofosfato o ATP
Existe un método de secuenciación por semiconductores …:
Existe un método de secuenciación por semiconductores …:
- No
- en que se ancla la polimerasa al chip
- está en estudio
- que carece de un sistema óptico de detección, se trata de una detección electroquímica (correct)
En la secuenciación por reversión del terminador (CRT) …:
En la secuenciación por reversión del terminador (CRT) …:
Es importante recordar que la molécula de ADN está formada por tres componentes:
Es importante recordar que la molécula de ADN está formada por tres componentes:
La característica más importante de la Taq polimerasa que la distingue de otras
polimerasas es:
La característica más importante de la Taq polimerasa que la distingue de otras polimerasas es:
Los primers generalmente oscilan entre ............ pares de bases:
Los primers generalmente oscilan entre ............ pares de bases:
Otra característica interesante Los primers es que …:
Otra característica interesante Los primers es que …:
Recordar que en la desnaturalización, las cadenas de ADN son calentadas a 95 ºC durante:
Recordar que en la desnaturalización, las cadenas de ADN son calentadas a 95 ºC durante:
En la etapa de hibridación la Tª correcta es:
En la etapa de hibridación la Tª correcta es:
En la etapa de extensión ...:
En la etapa de extensión ...:
En Secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina ...:
En Secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina ...:
El ADN fragmentado se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas. Las
perlas se incrustan en micropocillos en un semiconductor, se trata de ...:
El ADN fragmentado se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas. Las perlas se incrustan en micropocillos en un semiconductor, se trata de ...:
Señale la incorrecta acerca de Oxford Nanopore ...:
Señale la incorrecta acerca de Oxford Nanopore ...:
....... se pueden usar para medir la abundancia de transcritos específicos de una manera de
rendimiento bastante bajo. Aprovechando el concepto de transcripción inversa y acoplándolo
a tecnologías de secuenciación de alto rendimiento, los transcritos pueden secuenciarse y
mapearse a un genoma para representar la cantidad de transcritos representados por el
número de lecturas:
....... se pueden usar para medir la abundancia de transcritos específicos de una manera de rendimiento bastante bajo. Aprovechando el concepto de transcripción inversa y acoplándolo a tecnologías de secuenciación de alto rendimiento, los transcritos pueden secuenciarse y mapearse a un genoma para representar la cantidad de transcritos representados por el número de lecturas:
En el método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de
Sanger, se requieren nucleótidos didesoxi que son:
En el método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de Sanger, se requieren nucleótidos didesoxi que son:
Indique la correcta sobre el método didesoxi de Sanger:
Indique la correcta sobre el método didesoxi de Sanger:
En primer lugar, deben realizarse en cuatro tubos diferentes, cuatro mezclas de reacción.
Cada mezcla de reacción contiene los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP, dCTP, de dTTP y
dGTP), la enzima y …:
En primer lugar, deben realizarse en cuatro tubos diferentes, cuatro mezclas de reacción. Cada mezcla de reacción contiene los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP, dCTP, de dTTP y dGTP), la enzima y …:
Señale la correcta:
Señale la correcta:
En vista de la siguiente autorradiografía
indique el fragmento de
secuencia correcta de ADN obtenido en dirección 5’à 3’:
En vista de la siguiente autorradiografía indique el fragmento de secuencia correcta de ADN obtenido en dirección 5’à 3’:
Una modificación de la técnica anterior facilita un análisis más rápido y económico,
además de su automatización:
Una modificación de la técnica anterior facilita un análisis más rápido y económico, además de su automatización:
La mayor ventaja de este método es que la secuenciación se puede llevar a cabo en una
sola reacción, en lugar de en cuatro reacciones como en el método del cebador marcado, cuál
es:
La mayor ventaja de este método es que la secuenciación se puede llevar a cabo en una sola reacción, en lugar de en cuatro reacciones como en el método del cebador marcado, cuál es:
En el método de la cuestión anterior, el sistema de detección y secuenciación es:
En el método de la cuestión anterior, el sistema de detección y secuenciación es:
Indique la correcta sobre Secuenciación alelo-específica por bisulfito:
Indique la correcta sobre Secuenciación alelo-específica por bisulfito:
Qué es la pirosecuenciación:
Qué es la pirosecuenciación:
El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en:
El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta
fidelidad no se encuentran:
Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta fidelidad no se encuentran:
Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde:
En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde:
La amplificación con arranque en caliente ...:
La amplificación con arranque en caliente ...:
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Study Notes
Técnicas de Secuenciación
- En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es un proceso fundamental.
- En la pirosecuenciación, la reacción de detección se produce mediante la liberación previa de pirofosfato.
- Existe un método de secuenciación por semiconductores que utiliza la tecnología de Oxford Nanopore.
Estructura del ADN
- La molécula de ADN está formada por tres componentes: azúcares, fosfatos y bases nitrogenadas.
- La Taq polimerasa se caracteriza por ser termoestable, lo que la distingue de otras polimerasas.
PCR y Primers
- Los primers generalmente oscilan entre 18-24 pares de bases.
- Otra característica interesante de los primers es que son específicos para una región determinada del genoma.
- En la desnaturalización, las cadenas de ADN se calientan a 95 ºC durante 30 segundos.
- En la etapa de hibridación, la temperatura correcta es de 55-65 ºC.
- En la etapa de extensión, la temperatura es de 72 ºC.
Secuenciación de Lectura Corta
- En la secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina, el ADN se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas que se incrustan en micropocillos en un semiconductor.
- El método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de Sanger requiere nucleótidos didesoxi.
Otros Métodos de Secuenciación
- La secuenciación alelo-específica por bisulfito se utiliza para medir la abundancia de transcritos específicos.
- La pirosecuenciación es un método de secuenciación que utiliza la liberación previa de pirofosfato para detectar la incorporación de nucleótidos.
- El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en la secuenciación de una sola molécula de ADN a la vez.
- Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante la utilización de primers específicos.
- En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde una sola célula o incluso desde un fragmento de ADN degradado.
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