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Questions and Answers
En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es… :
En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es… :
- Al azar (correct)
- En orden
- De menor a mayor
- De mayor a menor
En la pirosecuenciación la reacción de detección viene dada por la liberación previa de …:
En la pirosecuenciación la reacción de detección viene dada por la liberación previa de …:
- Pirofosfato o P2O7^4- (correct)
- ddNTP
- dNTP
- Pirofosfato o ATP
Existe un método de secuenciación por semiconductores …:
Existe un método de secuenciación por semiconductores …:
- No
- en que se ancla la polimerasa al chip
- está en estudio
- que carece de un sistema óptico de detección, se trata de una detección electroquímica (correct)
En la secuenciación por reversión del terminador (CRT) …:
En la secuenciación por reversión del terminador (CRT) …:
Es importante recordar que la molécula de ADN está formada por tres componentes:
Es importante recordar que la molécula de ADN está formada por tres componentes:
La característica más importante de la Taq polimerasa que la distingue de otras
polimerasas es:
La característica más importante de la Taq polimerasa que la distingue de otras polimerasas es:
Los primers generalmente oscilan entre ............ pares de bases:
Los primers generalmente oscilan entre ............ pares de bases:
Otra característica interesante Los primers es que …:
Otra característica interesante Los primers es que …:
Recordar que en la desnaturalización, las cadenas de ADN son calentadas a 95 ºC durante:
Recordar que en la desnaturalización, las cadenas de ADN son calentadas a 95 ºC durante:
En la etapa de hibridación la Tª correcta es:
En la etapa de hibridación la Tª correcta es:
En la etapa de extensión ...:
En la etapa de extensión ...:
En Secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina ...:
En Secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina ...:
El ADN fragmentado se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas. Las
perlas se incrustan en micropocillos en un semiconductor, se trata de ...:
El ADN fragmentado se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas. Las perlas se incrustan en micropocillos en un semiconductor, se trata de ...:
Señale la incorrecta acerca de Oxford Nanopore ...:
Señale la incorrecta acerca de Oxford Nanopore ...:
....... se pueden usar para medir la abundancia de transcritos específicos de una manera de
rendimiento bastante bajo. Aprovechando el concepto de transcripción inversa y acoplándolo
a tecnologías de secuenciación de alto rendimiento, los transcritos pueden secuenciarse y
mapearse a un genoma para representar la cantidad de transcritos representados por el
número de lecturas:
....... se pueden usar para medir la abundancia de transcritos específicos de una manera de rendimiento bastante bajo. Aprovechando el concepto de transcripción inversa y acoplándolo a tecnologías de secuenciación de alto rendimiento, los transcritos pueden secuenciarse y mapearse a un genoma para representar la cantidad de transcritos representados por el número de lecturas:
En el método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de
Sanger, se requieren nucleótidos didesoxi que son:
En el método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de Sanger, se requieren nucleótidos didesoxi que son:
Indique la correcta sobre el método didesoxi de Sanger:
Indique la correcta sobre el método didesoxi de Sanger:
En primer lugar, deben realizarse en cuatro tubos diferentes, cuatro mezclas de reacción.
Cada mezcla de reacción contiene los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP, dCTP, de dTTP y
dGTP), la enzima y …:
En primer lugar, deben realizarse en cuatro tubos diferentes, cuatro mezclas de reacción. Cada mezcla de reacción contiene los cuatro nucleótidos trifosfato (dATP, dCTP, de dTTP y dGTP), la enzima y …:
Señale la correcta:
Señale la correcta:
En vista de la siguiente autorradiografía
indique el fragmento de
secuencia correcta de ADN obtenido en dirección 5’à 3’:
En vista de la siguiente autorradiografía indique el fragmento de secuencia correcta de ADN obtenido en dirección 5’à 3’:
Una modificación de la técnica anterior facilita un análisis más rápido y económico,
además de su automatización:
Una modificación de la técnica anterior facilita un análisis más rápido y económico, además de su automatización:
La mayor ventaja de este método es que la secuenciación se puede llevar a cabo en una
sola reacción, en lugar de en cuatro reacciones como en el método del cebador marcado, cuál
es:
La mayor ventaja de este método es que la secuenciación se puede llevar a cabo en una sola reacción, en lugar de en cuatro reacciones como en el método del cebador marcado, cuál es:
En el método de la cuestión anterior, el sistema de detección y secuenciación es:
En el método de la cuestión anterior, el sistema de detección y secuenciación es:
Indique la correcta sobre Secuenciación alelo-específica por bisulfito:
Indique la correcta sobre Secuenciación alelo-específica por bisulfito:
Qué es la pirosecuenciación:
Qué es la pirosecuenciación:
El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en:
El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante:
Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta
fidelidad no se encuentran:
Entre las características técnicas más importantes de las polimerasas de alta fidelidad no se encuentran:
Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
Las curvas de desnaturalización pueden utilizarse cuando ...:
La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
La síntesis de ADN termina cuando se añade ...:
En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde:
En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde:
La amplificación con arranque en caliente ...:
La amplificación con arranque en caliente ...:
Flashcards
Sanger Sequencing: ddNTPs
Sanger Sequencing: ddNTPs
Incorporation of ddNTPs is essential for chain termination.
Pyrosequencing Detection
Pyrosequencing Detection
Pirosequencing detects nucleotide incorporation via pyrophosphate release.
Semiconductor Sequencing
Semiconductor Sequencing
Oxford Nanopore uses semiconductor technology for sequencing.
DNA Components
DNA Components
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Taq Polymerase Feature
Taq Polymerase Feature
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Primer Length
Primer Length
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Primers Bind Where?
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Denaturation Temperature
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Hybridization Temperature
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Extension Temperature
Extension Temperature
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Illumina Sequencing
Illumina Sequencing
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Sanger's Method
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Bisulfite Sequencing
Bisulfite Sequencing
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Pyrosequencing Mechanism
Pyrosequencing Mechanism
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tSMS Meaning
tSMS Meaning
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PCR Specificity
PCR Specificity
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Forensic Amplification
Forensic Amplification
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Study Notes
Técnicas de Secuenciación
- En el método de Sanger, la incorporación de los ddNTPs es un proceso fundamental.
- En la pirosecuenciación, la reacción de detección se produce mediante la liberación previa de pirofosfato.
- Existe un método de secuenciación por semiconductores que utiliza la tecnología de Oxford Nanopore.
Estructura del ADN
- La molécula de ADN está formada por tres componentes: azúcares, fosfatos y bases nitrogenadas.
- La Taq polimerasa se caracteriza por ser termoestable, lo que la distingue de otras polimerasas.
PCR y Primers
- Los primers generalmente oscilan entre 18-24 pares de bases.
- Otra característica interesante de los primers es que son específicos para una región determinada del genoma.
- En la desnaturalización, las cadenas de ADN se calientan a 95 ºC durante 30 segundos.
- En la etapa de hibridación, la temperatura correcta es de 55-65 ºC.
- En la etapa de extensión, la temperatura es de 72 ºC.
Secuenciación de Lectura Corta
- En la secuenciación de lectura corta por síntesis Illumina, el ADN se liga a secuencias adaptadoras y se adhiere a microperlas que se incrustan en micropocillos en un semiconductor.
- El método de secuenciación enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de Sanger requiere nucleótidos didesoxi.
Otros Métodos de Secuenciación
- La secuenciación alelo-específica por bisulfito se utiliza para medir la abundancia de transcritos específicos.
- La pirosecuenciación es un método de secuenciación que utiliza la liberación previa de pirofosfato para detectar la incorporación de nucleótidos.
- El método tSMS (True Single-Molecule Sequencing) consiste en la secuenciación de una sola molécula de ADN a la vez.
- Una forma de incrementar la especificidad en la técnica de PCR es mediante la utilización de primers específicos.
- En medicina forense, se puede amplificar un ADN desde una sola célula o incluso desde un fragmento de ADN degradado.
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