Membrana Celular - Práctica No. 5

Membrana Celular - Práctica No. 5

• Objetivos:
  • Provocar y observar el pasaje de disolvente a través de una membrana química semipermeable (ferrocianuro de cobre).
  • Comprobar experimentalmente la difusión y ósmosis a través de la membrana plasmática.
  • Determinar los componentes químicos de la membrana celular mediante enzimas específicas.
  • Demostrar el paso de solutos a través de la membrana celular.

Introducción

• La permeabilidad celular es esencial para la fisiología celular, condicionando la entrada y salida de sustancias para mantener los procesos vitales y la síntesis de nuevas sustancias.
• La ósmosis es el movimiento de solventes a través de una membrana semipermeable, de regiones de menor concentración de soluto a mayor. La difusión no requiere una membrana semipermeable y las moléculas se mueven de mayor a menor concentración.

Parte A: Producción de Membranas Químicas

• Los experimentos de ósmosis ilustran el pasaje de disolventes a través de membranas químicas semipermeables, usando la reacción del ferrocianuro de cobre.
• Esta membrana se forma como una película.

Bioseguridad

• La preparación no necesita repeticiones.
• Colocar el matraz en un lugar visible.
• Observar durante 20 minutos.
• Usar cantidades mínimas de reactivos tóxicos y desecharlos por el fregadero con abundante agua.

Materiales (Parte A)

• Beakers pequeños
• Cristales de ferrocianuro de potasio.
• Solución de sulfato de cobre.

Procedimiento (Parte A)

• Colocar una solución diluida de sulfato de cobre en un beaker, formando una columna de 7 cm.
• Esperar a que no haya corrientes líquidas en el beaker.
• Dejar caer cuidadosamente cristales de ferrocianuro de potasio en la solución de sulfato de cobre, sin tocar las paredes del beaker.
• Observar y describir las modificaciones que se producen, anotando el tiempo que tardan en manifestarse.

Parte B: Membrana Celular en Células Animales

• Las células animales son adecuadas para el estudio de las membranas celulares debido a la facilidad en la observación de los cambios.

Materiales (Parte B)

• Sangre humana
• Tubos de ensayo
• Soluciones de cloruro de sodio (0.9%, 1%, 0.1%)
• Agua destilada
• Goteros
• Gradillas
• Portaobjetos
• Cubiertas
• Microscopio

Método (Parte B)

• Preparar tres tubos de ensayo numerados.
• Llenar cada tubo hasta la mitad con las soluciones correspondientes.
• Agregar dos gotas de sangre a cada tubo.
• Mezclar suavemente cada tubo.
• Observar los tubos bajo iluminación.
• Registrar las observaciones microscopicas.

Parte C: Determinación de los Componentes Químicos de la Membrana Celular

• Los componentes principales de la membrana celular son la bicapa lipídica, la red de espectrina y las proteínas globulares.
• Los eritrocitos tienen un 40% de fosfolípidos, 50% de proteínas y 10% de carbohidratos.
• Las proteínas en la membrana celular, como la hemoglobina, se encargan del transporte de oxígeno.
• Las glucoforinas mantienen a la célula aislada de otras células.

Materiales (Parte C)

• Sangre humana
• Tubos de ensayo
• Soluciones de pepsina, lipasa y amilasa en suero fisiológico
• Goteros
• Gradillas
• Portaobjetos
• Cubiertas
• Microscopio

Método (Parte C)

• Preparar 4 tubos y marcarlos.
• Agregar suero fisiológico a cada tubo hasta la marca de 3 cm.
• Agregar dos gotas de sangre a cada tubo hasta la marca de 4 cm.
• Agregar pepsina al tubo A, amilasa al tubo B y lipasa al tubo C.
• Mezclar cuidadosamente y observar.
• Registrar las observaciones.

Parte D: Paso de Solutos a través de la Membrana Vegetal (opcional)

• Se utilizan las hojas de Elodea canadiensis para estudiar el paso de solutos a través de la membrana.
• Las células clorofílicas de esta planta son traslucidas y sus células en la parte superior son más grandes que las de la parte inferior de la hoja. Usualmente están acostumbradas a aguas dulces.
• El procedimiento involucra cambios en la concentración de solutos para observar el transporte activo a través de la membrana.
• La solubilidad en lípidos de una sustancia es un factor importante en su paso a través de la membrana. Las sustancias solubles en lípidos penetran con mayor facilidad.
• Se pueden utilizar otros solutos como el ácido oxálico.

Materiales (Parte D)

• Hojas de Elodea
• Solución de ácido oxálico al 1.0%
• Portaobjetos
• Cubiertas
• Microscopio

Preguntas de Estudio

• Se presentan preguntas sobre concentración, membrana, movimiento del agua, y homeostasis.