Mehanička inokulacija biljnih virusa

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to Lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson
Download our mobile app to listen on the go
Get App

Questions and Answers

Koje vrste virusnih inkluzija postoje?

  • Amorfne inkluzije (correct)
  • Kristalne inkluzije (correct)
  • Kugličaste inkluzije
  • Cilindrične inkluzije

Koje je svojstvo koje karakterizira amorfne inkluzije?

  • Cilindrični oblik
  • Nepravilan oblik (correct)
  • Pravilni oblik
  • Sferični oblik

U kojoj se vrsti biljaka proizvode pravih kristali virusa mozaika duhana?

  • U stanicama čempresa
  • U stanicama rajčice
  • U stanicama jabuka
  • U stanicama duhana (correct)

Koji virus tvori parakristale unutar stanica?

<p>X-virus kakteja (D)</p> Signup and view all the answers

Koji tip inkluzija se javlja u citoplazmi stanica biljaka zaraženih virusima?

<p>Poliedarske okluzije (C)</p> Signup and view all the answers

Kako se nazivaju proteinska vretena koja se javljaju kod X-virusa kakteja?

<p>Parakristali (D)</p> Signup and view all the answers

Koji virus uzrokuje poliedarske okluzije kod kukaca?

<p>Virus citoplazmatske poliedroze (A)</p> Signup and view all the answers

Koji proces dovodi do nakupljanja virusnih inkluzija u stanicama?

<p>Virusna replikacija (A)</p> Signup and view all the answers

Koji je pH vrednost Sörensenovog pufera korištenog za pripremu podloge?

<p>pH 7 (C)</p> Signup and view all the answers

Koja je svrha dodavanja NaN3 u agar?

<p>Konzerviranje agara (C)</p> Signup and view all the answers

Kako se priprema binarna razrjeđivanje infektivnog soka virusa soja Y?

<p>Dodavanjem Sörensenovog pufera (C)</p> Signup and view all the answers

Kako se postavlja reakcija DRID?

<p>Prema shemi s virusima Y i N (C)</p> Signup and view all the answers

Koliko kapi pufera treba dodati prije pripreme razrjeđivanja?

<p>5 kapi (A)</p> Signup and view all the answers

Za koliko sati postaje reakcija vidljiva?

<p>24-48 sati (D)</p> Signup and view all the answers

Koja je metoda koristena za homogenizaciju infektivnog soka virusa?

<p>Homogenizacija u tarioniku (D)</p> Signup and view all the answers

Što se koristi za fiksiranje reakcije nakon pojave rezultata?

<p>Octena kiselina (B)</p> Signup and view all the answers

Što predstavlja serološki titar?

<p>Najmanju koncentraciju antigena ili protutijela koja uzrokuje vidljivu reakciju. (C)</p> Signup and view all the answers

Koji od navedenih izraza najbolje opisuje proces u DRID-u?

<p>Reakcija je vidljiva kroz imunoprecipitat. (A)</p> Signup and view all the answers

Koja je osnovna razlika između DRID-a i SRID-a?

<p>DRID koristi dva reaktanta, dok SRID koristi samo jedan. (A)</p> Signup and view all the answers

Koji oblik ELISA-reakcije je posebno prikazan?

<p>DAS-ELISA (double antibody sandwich). (B)</p> Signup and view all the answers

Što se u ELISA tehnici koristi kao znak pozitivne serološke reakcije?

<p>Promjena boje uzorka. (C)</p> Signup and view all the answers

Koji element nije uključen u SRID proceduru?

<p>Dva reaktanta. (D)</p> Signup and view all the answers

Što se odvija unutar DRID-a kod vezivanja Fab fragmenta?

<p>Fragmenti vezuju molekule antigena. (C)</p> Signup and view all the answers

Što je ključno za analizu u SRID-u?

<p>Promjer prstena ovisi o koncentraciji reaktanta. (C)</p> Signup and view all the answers

Koji virus se koristi za zaražavanje pilećeg embrija?

<p>Virus bronhitisa peradi (B)</p> Signup and view all the answers

Kako se kultiviraju animalni virusi prema prikazanim rezultatima?

<p>In vitro na 37-39 °C (A)</p> Signup and view all the answers

Koji je značaj bakteriofaga T4 u istraživanju?

<p>Inficira bakterije (D)</p> Signup and view all the answers

Tko je otkrio bakteriofage kao specifične viruse bakterija?

<p>Frederick Twort i Felix d'Herelle (B)</p> Signup and view all the answers

Što se događa s razvojem pilećeg embrija zaraženog virusom bronhitisa?

<p>Embrij se prestaje razvijati 19. dana (C)</p> Signup and view all the answers

Koji je uzrok lezija na korio-alantoisnoj membrani u zaraženom embriju?

<p>Virus boginja peradi (C)</p> Signup and view all the answers

Koji od navedenih uvjeta nije idealan za kultiviranje animalnih virusa in vitro?

<p>UV zračenje (B)</p> Signup and view all the answers

Koja je primjena bakteriofaga u biomedicini?

<p>Kontrola bakterijskih infekcija (B)</p> Signup and view all the answers

Zašto je polučvrsta hranjiva podloga LB pogodna za uzgoj bakterija i faga?

<p>Ograničava širenje virusa na susjedne stanice. (B)</p> Signup and view all the answers

Koja je optimalna temperatura za inkubaciju bakterija E.coli tijekom noći?

<p>37°C (A)</p> Signup and view all the answers

Koja je koncentracija agara dodana u polučvrstu LB hranjivu podlogu?

<p>0.8% (A)</p> Signup and view all the answers

Što se dogodi ako se Petrijeva zdjelica pomakne nakon što se agar stvrdne?

<p>Sloj agara postaje zrnat. (C)</p> Signup and view all the answers

Koliko mililitara polučvrste LB hranjive podloge se dodaje u epruvetu?

<p>5 mL (B)</p> Signup and view all the answers

Što se događa s temperaturom agara dok se hladi u vodenoj kupelji?

<p>Smanjuje se na 45°C. (D)</p> Signup and view all the answers

Koja je svrha dodavanja bakterijske kulture u polučvrstu hranjivu podlogu?

<p>Stimulirati rast bakterija i faga. (D)</p> Signup and view all the answers

Koja je svrha inkubacije polučvrste LB hranjive podloge u vodenoj kupelji?

<p>Da se osigura ravnomjerna temperatura. (D)</p> Signup and view all the answers

Koji je ispravan postupak sterilizacije pipete prije upotrebe?

<p>Sterilizirati 70% EtOH (A)</p> Signup and view all the answers

Kako se priprema razrjeđenje virusnog pripravka u epruvetama?

<p>Pri pripremi razrjeđenja treba koristiti novi plastični nastavak za pipetu svaki put (C)</p> Signup and view all the answers

Koju temperaturu treba održavati tijekom inkubacije ploča s bakteriofagima?

<p>37°C (B)</p> Signup and view all the answers

Kako se izračunava titar faga izbrojanih plakova?

<p>Broj plakova pomnožen s faktorom za svako razrjeđenje (D)</p> Signup and view all the answers

Koji je dodatni faktor razrjeđenja koji se mora uzeti u obzir prilikom izračuna titra?

<p>$10^2$ (B)</p> Signup and view all the answers

Koji korak treba poduzeti nakon nanošenja razrjeđivanja faga na agaru?

<p>Prenijeti ploče u inkubator nakon 1h na sobnoj temperaturi (C)</p> Signup and view all the answers

Što učiniti ako plakovi nisu jasno razdvojeni tijekom brojanja?

<p>Upisati 'previše za izbrojati' u tablicu (D)</p> Signup and view all the answers

Koliko mikrolitara razrjeđenja se nanosi na agaru?

<p>10 µL (D)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Virusne inkluzije

Tvorbe unutar stanica, nastale kao rezultat virusne replikacije, koje se koriste za dijagnosticiranje virusnih bolesti. Oblik i sastav se razlikuju ovisno o vrsti virusa.

Amorfne inkluzije

Nepravilnog su oblika i često se nazivaju X-tijela.

Kristalne inkluzije

Virusne inkluzije koje se sastoje od virusnih proteina poredanih u pravilne strukture - kristale (ili parakristale).

Parakristali

Vrsta kristalne inkluzije, s nešto manje savršenom organizacijom od pravih kristala.

Signup and view all the flashcards

Pravi kristali

Virusni kristali s potpunom pravilnom strukturom i geometrijom.

Signup and view all the flashcards

Virus mozaika duhana

Virus koji uzrokuje bolest kod duhana, poznat po stvaranju pravih kristala unutar stanica.

Signup and view all the flashcards

Vanjski simptomi infekcija biljnim virusima

Vidljivi promjene na izgledu biljke koje su dio infekcije. Promjene u boji, obliku lišća, deformacije

Signup and view all the flashcards

Unutrašnji simptomi infekcija biljnim virusima

Promjene u strukturi i sastavu biljne stanice, na koje se ne utječu spolja vidljivo.

Signup and view all the flashcards

DRID

Dvostruka radijalna imunodifuzija. Tehnika za razlikovanje virusnih sojeva, temeljena na reakciji imunoprecipitacije u inertnoj podlozi.

Signup and view all the flashcards

SRID

Jednostruka radijalna imunodifuzija. Tehnika koja analizira koncentraciju antigena ili protutijela u uzorku.

Signup and view all the flashcards

ELISA

Enzimsko povezani imunosoresorpcijski test koristan za detekciju antigena i protutijela u uzorcima.

Signup and view all the flashcards

Imunoprecipitacija

Serološka reakcija gdje se antigeni i protutijela spajaju i tvore veće agregate (precipitate).

Signup and view all the flashcards

Serološki titar

Najmanja koncentracija antigena ili protutijela koja izaziva vidljivu reakciju.

Signup and view all the flashcards

Inertna podloga

Materijal koji ne utječe na biološke reaktante u reakciji.

Signup and view all the flashcards

DAS-ELISA

Varijanta ELISA tehnike koja koristi dva protutijela za zarobljavanje antigena.

Signup and view all the flashcards

AgY

Srodni antigeni; ovdje se ne određuje točna definicija, već se koristi za označavanje antigena.

Signup and view all the flashcards

Priprema podloge za DRID

Proces pripreme gel agara sa konzervansom NaN3 u Sörensenovom puferu, nanošenje na predmetno stakalce i polimerizacija.

Signup and view all the flashcards

Priprema antigena

Homogenizacija virusa u Sörensenovom puferu i priprema binarnih razrjeđenja.

Signup and view all the flashcards

Binarna razrjeđenja

Niz razrjeđenja antigena pripremljenog soka virusa.

Signup and view all the flashcards

DRID reakcija

Serološka imunokemijska reakcija za detekciju virusnih antigena.

Signup and view all the flashcards

Postavljanje reakcije

Dodavanje pufera i antitijela na gel podlogu, prema shemi reakcije.

Signup and view all the flashcards

Serološka reakcija

Reakcija koja detektira antigene na imunokemijskom nivou.

Signup and view all the flashcards

Rezultati reakcije

Vidljive promjene na podlozi nakon 24-48 sati, koje ukazuju na prisutnost antigena i antitijela.

Signup and view all the flashcards

TYMV sojevi

Različiti sojevi virusa Tobacco mosaic virus (TMV).

Signup and view all the flashcards

DRID reakcija

Laboratorijski postupak za kultiviranje animalnih virusa u in vitro uvjetima, koristeći pileće embrije.

Signup and view all the flashcards

Kultiviranje animalnih virusa

Proces uzgoja virusa u kontroliranim laboratorijskim uvjetima (npr. korištenjem pilećih embrija).

Signup and view all the flashcards

Virus bronhitisa peradi

Tip virusa koji uzrokuje bolest kod peradi, te može zaustaviti razvoj pilećeg embriona.

Signup and view all the flashcards

Korio-alantoisna membrana

Dio pilećeg embriona gdje se mogu pojaviti lezije uzrokovane infekcijom.

Signup and view all the flashcards

Bakteriofagi

Virusi koji inficiraju bakterije.

Signup and view all the flashcards

Frederick Twort i Felix d'Herelle

Znanstvenici koji su neovisno otkrili bakteriofage.

Signup and view all the flashcards

Određivanje titra bakteriofaga T4

Tehnika za određivanje koncentracije (titara) bakteriofaga u uzorku, često pomoću metoda nazvanih "čistina".

Signup and view all the flashcards

Lezije

Oštećenja nastala infekcijom na tkivima ili organima.

Signup and view all the flashcards

Priprema bakterija

Postupak uzgoja bakterije E. coli u tekućem hranjivom mediju za kasniju upotrebu u eksperimentima.

Signup and view all the flashcards

Polučvrsta hranjiva podloga

Hranjiva podloga koja ograničava širenje virusa na susjedne bakterije, omogućujući nastanak plakova.

Signup and view all the flashcards

Plakovi

Vidljive zone inhibicije bakterije na polučvrstim podlogama, nastale djelovanjem virusa.

Signup and view all the flashcards

Priprema ploča

Postupak pripreme ploča s polučvrstim hranjivim medijem za testiranje virusa.

Signup and view all the flashcards

Određivanje OD600

Metoda za procjenu gustoće bakterijske kulture.

Signup and view all the flashcards

Decimalna razrjeđenja

Postupak postepenog smanjivanja koncentracije bakterija u sterilnim epruvetama.

Signup and view all the flashcards

Luria–Bertani medij

Hranjivi medij za bakterijski uzgoj.

Signup and view all the flashcards

Čvrsta hranjiva podloga LB

Hranjiva podloga pogodna za uzgoj bakterija na čvrstim površinama.

Signup and view all the flashcards

Priprema razrjeđenja faga

Postupak stvaranja različitih koncentracija bakteriofaga za eksperiment.

Signup and view all the flashcards

Faktor razrjeđenja

Broj puta koliko je originalna otopina razrijeđena.

Signup and view all the flashcards

Titar faga

Mjera infektivnosti faga u suspenziji - mjeri se broj infektivnih čestica bakteriofaga (PFU) po mililitru.

Signup and view all the flashcards

Nanošenje na ploču

Postupak stavljanja razrjeđene otopine faga na agar ploču za testiranje, gdje se virus množi i stvara plakove.

Signup and view all the flashcards

Brojanje plakova

Brojanje vidljivih zona inhibicije rasta bakterija na ploči, koje nastaju nakon razmnožavanja bakteriofaga.

Signup and view all the flashcards

Izračunavanje titra

Metoda za određivanje broja infektivnih čestica faga (PFU/mL) pomoću broja plakova i faktora razrjeđenja.

Signup and view all the flashcards

PFU/mL

Jedinica za mjerenje titra faga. Prikazuje broj infektivnih čestica virusa bakteriofaga po mililitru otopine.

Signup and view all the flashcards

Sterilizacija pipete

Postupak dekontaminiranja pipete 70% etanolom prije upotrebe.

Signup and view all the flashcards

Study Notes

Mehanička inokulacija biljnih virusa - teorijski dio

  • Virusi su obvezni paraziti koji se prenose s zaraženog na zdravog domaćina.
  • Biljni virusi su predmet istraživanja u virologiji.
  • Biljni virusi se ne mogu adsorbirati na stanice domaćina jer nemaju receptora na staničnoj stijenci.
  • Nisu sposobni samostalno ući u stanice domaćina, već ulaze kroz oštećenja.
  • Prenose se posredstvom vektora (npr. kukaca).
  • Najvažniji vektori su kukci (oko 360 vrsta) iz porodice Aphididae (lisne uši).

Prenošenje biljnih virusa

  • Vektor „usputno" prenosi virus hraneći se ili parazitirajući na zaraženim biljkama.
  • Stvaranjem oštećenja već na biljnim stanicama vektor dolazi do virusa.
  • Najvažniji vektori su životinje (člankonošci- uglavnom kukci)
  • Članovi porodice Aphididae (lisne uši).
  • Cikada
  • Cvrčci
  • Kornjaši
  • Grinje
  • Oblići (Nematoda)
  • Čovjek

Načini prijenosa virusa

  • Neperzistentan prijenos: Virus se kratko zadržava u vektoru (neke sekunde do minuta) i odmah prenosi na novu biljku. Vektor gubi sposobnost prijenosa brzo (nekoliko sati) nakon prekida hranjenja.
  • Perzistentan prijenos: Virus ostaje u vektoru duže (6-12 sati) i vektor ga prenosi do kraja života. Nakon perioda latencije, vektor ostaje izvor zaraze.
  • Semiperzistentan prijenos: Kombinacija prethodna dva, virus se relativno brzo prenosi u vektoru, ali duži vremenski period (3-4 dana)

Prijenos bez vektora

  • Izravni mehanički prijenos: Trljanje zaraženih i zdravih biljaka (npr. virus mozaika duhana i virus krumpira).
  • Vegetativno razmnožavanje: Preko gomolja, lukovica.
  • Prenošenje sjemenom.
  • Prenošenje polenom.

Pokusne biljke

  • Za proučavanje simptoma i kultiviranja virusa u većim količinama.
  • Biljke moraju lako rasti, imati velike i glatke listove i brzo reagirati na infekciju.
  • Primjeri su Nicotiana spp., Chenopodium spp., Phaseolus spp. i drugi.

Mehanička inokulacija

  • Postupak unošenja virusa u biljnu stanicu trljanjem soka s zaražene biljke na zdrave listove listova.
  • Često se koristi silicijev karbid ili slični abraziv.

Kultiviranje animalnih virusa u oplođenim kokošjim jajima

  • Laboratorijske životinje (miševi, zečevi, zamorčići).
  • Kulture stanica. i tkiva in vitro.
  • Oplođena jaja.
  • Održavaju se na 37-39°C.
  • Za proizvodnju vakcina.
  • Virusi se razmnožavaju u zamecima.
  • Oplođena jaja su sterilna i imaju hranjive tvari.
  • Čestice virusa se talože u određenim strukturama zametka za kasniju primjenu.

Pročišćavanje virusnih čestica

  • Izolacija virusa.
  • Homogenizacija zaraženog tkiva.
  • Bistrenje
  • Izdvajanje i koncentriranje virusnih čestica (fizički ili fizikalno-kemijski postupci).
  • Centrifugiranje visokih okretaja (diferencijalno centrifugiranje).
  • Centrifugiranje u gradijentu gustoće (isotropičko i zonalno).
  • Spektrofotometrijska analiza.

Serološke reakcije - imunokemijske reakcije

  • Anrigen-antitijela interakcija na inertnoj podlozi.
  • Razrada dijagnostike antigena ili protutijela.
  • Identifikacija, kvantifikacija i karakterizacija.
  • Važna tehnika u imunologiji.

Određivanje titra bakteriofaga T4

  • Bakteriofagi su virusi koji inficiraju bakterije.
  • Mogu biti izolirani iz različitih izvora.
  • Litički ciklus: uništava bakterijsku stanicu.
  • Lizogeni ciklus: integracija virusne DNA u bakterijski kromosom.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Quiz Team

More Like This

Plant Virus Quiz
9 questions

Plant Virus Quiz

LeadingLime avatar
LeadingLime
Plant Virus Transmission and Symptoms Quiz
15 questions
Plant Virus Transmission by Insect Vectors
30 questions
Use Quizgecko on...
Browser
Browser