Enzimología y Conservación de Tejidos

Una alta concentración de sustrato soluble puede inhibir la tasa de hidrólisis del sustrato por una enzima.

El pH del medio buffer debe ser el que permita la máxima actividad enzimática y una solubilidad razonable del sustrato.

Método enzimático que implica una primera reacción con el sustrato que genera un producto primario; luego, un paso de incubación adicional que produce un producto final coloreado e insoluble.

Método que emplea un sustrato coloreado inicial (soluble) que, durante la reacción enzimática, pierde grupos solubles sin alterarse el color, resultando en un producto final insoluble y coloreado.

Método donde un sustrato soluble e incoloro en su forma oxidada, se convierte en un producto coloreado e insoluble al reducirse. Es un método importante en la localización de reacciones.

Proceso para preservar la morfología de los tejidos y solubilizar las enzimas, aumentando la permeabilidad celular para reacciones histoquímicas.

Preservar la morfología, insolubilizar enzimas y aumentar la permeabilidad celular para facilitar la reacción histoquímica.

Enzimas que permanecen disueltas; su fijación las hace insolubles.

Método histoquímico que usa la unión inmediata de un sustrato particular con una sal de diazonio para generar un producto visible, localizando la enzima.

Resultado coloreado de la reacción enzimática en el método de copulación simultánea

Método antiguo, de múltiples pasos, para la demostración enzimática. Su principio se basa en una serie de reacciones químicas para crear un precipitado.

Técnicas como congelación con criosustitución o cortes por congelación para mantener la actividad enzimática durante el proceso de estudio del tejido.

Proteínas que catalizan reacciones bioquímicas dentro de las células. Son eficientes y específicas.

Disminuir la energía de activación, acortar tiempos de reacción y reducir la temperatura necesaria para las reacciones.

Presentan regulación, pueden ser reguladas por diferentes aspectos dependiendo de la vía metabólica. Tienen subunidades catalíticas y regulatorias.

Determina la localización e información sobre la enzima como proteína antigénica, analizando su presencia o actividad.

La temperatura óptima para la actividad enzimática suele ser la fisiológica (a 37°C).

El pH óptimo de cada enzima influye en su actividad, por lo que debe considerarse.

El tejido para IHQ debe congelarse rápidamente o preservarse sin fijación química para evitar inhibir la actividad enzimatica.

Compuestos químicos que se utilizan en la tinción de tejidos para producir un producto de reacción altamente coloreado e insoluble.

Reacción química donde las sales de diazonio se acoplan con un sustrato para formar un grupo cromóforo azo, que da color a la muestra.

Se clasifican en diferentes grupos (hidrolasas, oxidoreductasas, etc.) basado en la reacción que catalizan.

Enzimas que hidrolizan ésteres de ácidos fosfóricos

Tipo de fosfatasa que tiene su actividad máxima alrededor de un pH 9.0.

Tipo de fosfatasa que tiene su actividad máxima alrededor de un pH 5.0.

Muestra de tejido que se incuba con todas las soluciones excepto el sustrato específico de la enzima.

Muestra de tejido que se incuba con inhibidores competitivos para comprobar la especificidad de la reacción.

Las técnicas enzimáticas son útiles para el diagnóstico de enfermedades, como la enfermedad de Hirschprung y alteraciones enzimáticas en el intestino.