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Questions and Answers
¿Qué característica diferencia el ADN eucariota del ADN procariota?
¿Qué característica diferencia el ADN eucariota del ADN procariota?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones es incorrecta respecto a la producción de proteínas de mamíferos en microorganismos?
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¿Qué ocurre con los intrones durante el proceso de maduración del ARN?
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¿Cuál es una de las dos alternativas para la producción de proteínas en microorganismos?
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¿Qué tipo de ADN no contiene intrones?
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¿Cuál es la función principal de las enzimas de restricción?
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¿Qué se obtiene tras el corte del ADN por enzimas de restricción?
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¿Cuál es un uso de la clonación molecular?
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¿Qué caracteriza al ADN sintético?
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¿Cómo se produce la mutagénesis dirigida?
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¿Cuál es la principal función del sistema CRISPR Cas?
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¿Qué se requiere para sintetizar ADN en un proceso en fase sólida?
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¿Quién es conocido como el pionero en la investigación del CRISPR?
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¿Cuál es el hongo identificado que produce penicilina y se aisla en el desarrollo del proceso?
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¿Qué rendimiento de penicilina se logra tras las rondas de mutagénesis y selección?
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¿Cuál de los siguientes componentes regula la biosíntesis de penicilina?
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¿Qué tipo de medio se desarrolla para el crecimiento de Penicillium?
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¿Cuál es una de las condiciones óptimas mencionadas para la producción de penicilina?
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¿Cuál es el principal objetivo en el desarrollo de cepas de penicilina?
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¿Qué sustancia se utiliza como uno de los sustratos en el proceso de producción de penicilina?
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¿Qué concentración de penicilina se alcanza con la cepa inicial de Penicillium chrysogenum?
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¿Cuál de las siguientes no es un tipo de penicilinas?
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¿Qué compuesto se utiliza para acilar químicamente el núcleo central de las penicilinas semisintéticas?
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¿Cuál de las siguientes características no se menciona como propiedad de las cefalosporinas?
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¿Qué organismo fue clave en el descubrimiento de las cefalosporinas?
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¿Cuál es el componente clave en la fermentación para producir penicilinas naturales?
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¿Qué tipo de penicilinas requiere un control específico de la fermentación?
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¿Qué nombre recibe el núcleo central que se utiliza en la modificación para obtener penicilinas semisintéticas?
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¿Qué año se relaciona con la creación de cefamicinas, que son una clase de cefalosporinas?
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¿Qué enzima se utiliza para convertir D,L-hidantoína en D o L-aminoácidos?
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¿Cuál de los siguientes microorganismos es un ejemplo de aquellos que producen L-aminoácidos?
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¿Qué tipo de reacción se emplea para la producción de D-p-hidroxifenilglicina a partir de DL-5-p-hidroxifenilhidantoína?
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¿Qué tipo de hidantoinas se utilizan para obtener aminoácidos D o L?
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¿Qué enzima se necesita para la producción de L-aminoácidos a partir de un α-cetoácido?
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¿Cuál de los siguientes productos se puede obtener a partir de D,L-hidantoína?
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¿Qué tipo de microorganismos tienen un papel en la producción de D-hidantoinasas?
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¿Cuál es la función de las enzimas o células inmovilizadas en la producción de aminoácidos?
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Study Notes
Enzimas de restricción
- Las enzimas de restricción reconocen secuencias específicas de nucleótidos en el ADN y cortan la molécula en ese punto (sitio de restricción).
- El corte se realiza por la ruptura de enlaces fosfodiéster en las dos hebras del ADN.
- Existen dos tipos de extremos generados: romos (de doble cadena) y cohesivos (de una sola cadena).
- Los fragmentos de ADN generados se pueden unir mediante enzimas llamadas ligasas.
Clonación molecular
- Permite la obtención de grandes cantidades de genes específicos o fragmentos cromosómicos de forma pura.
- Las etapas de la clonación molecular incluyen:
- Aislamiento del fragmento de ADN de interés.
- Inserción del fragmento en un vector (plásmido o virus).
- Introducción del vector en una célula huésped.
- Selección de células huésped que contienen el fragmento de ADN.
- Multiplicación de las células huésped y obtención del fragmento de ADN clonado.
ADN Sintético
- Segmentos de ADN de cadena sencilla que se sintetizan de forma automatizada.
- Se requiere el conocimiento de la secuencia del ADN que se va a sintetizar.
- La síntesis del ADN se realiza en fase sólida, donde el primer nucleótido se fija a un soporte sólido.
- El ADN sintético tiene múltiples aplicaciones en ingeniería genética.
Mutagénesis dirigida
- Inducción de mutaciones precisas en sitios específicos de los genes.
- Se realiza in vitro.
- Permite obtener microorganismos que producen proteínas diferentes a las cepas silvestres, con propiedades predecibles.
Sistema CRISPR-Cas
- Acrónimo de "Repeticiones Palindrómicas Cortas Agrupadas y Regularmente Espaciadas" (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats).
- Descubierto por Francis Mojica en la bacteria Haloferax mediterranei.
- Una herramienta de edición genética que permite modificar secuencias de ADN de forma precisa y eficiente.
Producción de proteínas de mamíferos por microorganismos
- Las células procariotas no pueden procesar el ARN premensajero (ARNm) de eucariotas, debido a la presencia de intrones (secuencias no codificantes).
- Para producir proteínas de mamíferos en organismos procariotas, se necesitan dos alternativas:
- Obtener genes sintéticos sin intrones.
- Eliminar los intrones del ARNm mediante técnicas de ingeniería genética.
Producción de penicilina
- La penicilina se produce por el hongo Penicillium chrysogenum.
- Se ha desarrollado y mejorado la producción de penicilina mediante técnicas de mejora de cepas y optimización del proceso de fermentación.
Tipos de penicilinas
- Penicilinas naturales: se producen sin la adición de precursores.
- Penicilinas biosintéticas: se producen controlando la adición de precursores de la cadena lateral.
- Penicilinas semisintéticas: se obtienen modificando químicamente el núcleo central de la penicilina (6-APA) con diferentes compuestos.
Obtención de penicilinas semisintéticas
- Se utiliza la enzima penicilina acilasa para obtener 6-APA (ácido 6-aminopenicilánico).
- Se acopla químicamente la cadena lateral deseada al 6-APA para obtener diferentes penicilinas semisintéticas.
Cefalosporinas
- Descubiertas por Giuseppe Brotzu en Cephalosporium acremonium en 1945.
- Se han desarrollado diferentes tipos de cefalosporinas, las naturales y las semisintéticas.
- Poseen un amplio espectro de acción antibacteriana y son poco tóxicas.
- Se utilizan ampliamente en el tratamiento de infecciones.
Aminoácidos
- Se pueden producir mediante la utilización de enzimas o células inmovilizadas.
- La producción de L-aminoácidos se realiza con aminoácido deshidrogenasas específicas.
- La producción de D o L-aminoácidos se puede realizar utilizando hidantoinas, por medio de D-L-hidantoinasa o D-L-carbamoilasa.
Producción de D-p-hidroxifenilglicina (D-PHG)
- La D-PHG es un aminoácido que se utiliza en la síntesis de medicamentos.
- Se puede producir mediante un proceso químico y enzimático a partir de DL-5-p-hidroxifenilhidantoína.
- Se emplean D-hidantoinasa y D-carbamoilasa para obtener D-PHG.
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Description
Este cuestionario explora el papel de las enzimas de restricción en la clonación molecular, además de describir los procesos involucrados en la obtención y manipulación de fragmentos de ADN. Aprenderás sobre los tipos de extremos de ADN generados y las etapas de la clonación. Ideal para estudiantes de biología molecular.
