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Questions and Answers
Quel est le principe de détection utilisé dans les techniques d'immuno-enzymologie ?
Quel est le principe de détection utilisé dans les techniques d'immuno-enzymologie ?
Quelle est la méthode de lecture utilisée dans les techniques d'immunofluorescence ?
Quelle est la méthode de lecture utilisée dans les techniques d'immunofluorescence ?
Quel est le type de marquage utilisé dans les techniques de radio-immunologie ?
Quel est le type de marquage utilisé dans les techniques de radio-immunologie ?
Quel est le résultat de la réaction Ag-Ac dans les techniques en phase homogène ?
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Quel est le principe de la méthode de dosage par compétition ?
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Quel est le but du marquage dans les techniques immunologiques ?
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Quel est le type de signal obtenu avec la technique de Radio Immuno-sorbent assay (RIST) ?
Quel est le type de signal obtenu avec la technique de Radio Immuno-sorbent assay (RIST) ?
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Quel est le but de la séparation des protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide dans l'immunoblot ?
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Quel type de marqueur est utilisé dans la révélation des protéines dans l'immunoblot ?
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Quel est l'usage des isotopes radioactifs dans la recherche biologique ?
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Quel est le principe de la technique de Radio Allergo-sorbent assay (RAST) ?
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Quelle est la technique qui permet d'identifier des microorganismes dans les prélèvements sans isolement?
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Quel est le rôle des anticorps primaires dans l'immunoblot ?
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Quel est le résultat attendu de la cytométrie de flux?
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Quel est le but de la conjugaison de l'Ac, de l'Ag ou de l'Ig au fluorochrome?
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Quel est l'inconvénient de la cytométrie de flux?
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Quel est le résultat attendu de l'ELISA?
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Quel est le principe de la cytométrie de flux?
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Study Notes
ELISA et Immunofluorescence
- ELISA : méthode d'intégration d'enzymes dans des tests immunologiques pour détecter la présence d'anticorps ou d'antigènes.
- Immunofluorescence : utilisation de fluorochromes (ex : fluorescéine, FITC) pour marquer des anticorps, permettant la visualisation par fluorescence.
- Identification des microorganismes dans les prélèvements, avec des exemples tels que Legionella pneumophila et Bordetella pertussis.
Cytométrie de Flux (FACS)
- Utilisation de différents fluorochromes pour analyser un échantillon hétérogène.
- Les cellules marquées passent devant un laser, activant leur fluorescence.
- Mesure de l'intensité de fluorescence, déterminant la taille, la granulosité et la concentration cellulaire.
- Inconvénients : réactions croisées possibles entre antigènes proches.
Techniques de Radio-immunologie
- Techniques hautement sensibles, avec une capacité de détection pouvant atteindre ng/l.
- L’utilisation d’isotopes radioactifs, comme C14, H3, et I125, permet une détection précise mais pose des risques de radiations.
- Utilisé pour des dosages hormonaux, de drogues ou de marqueurs tumoraux.
Types de Marquage
- Marquage par enzyme (EIA) : produit coloré dosé par photométrie.
- Marquage par fluorochrome (IFA) : lecture via microscopie ou fluorimétrie.
- Marquage par isotope radioactif (RIA) : dosage par autoradiographie.
Méthodes de Détection
- Réaction Ag-Ac visible grâce à un traceur de marquage sur l'antigène, l'anticorps ou une immunoglobuline.
- Techniques homogènes : le marqueur modifié par Ag-Ac, pas de séparation nécessaire.
- Techniques hétérogènes : lavage nécessaire car le comportement du marqueur ne change pas.
Immunoblot
- Permet la séparation de protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide.
- Transfert des protéines sur une membrane de nitrocellulose, incubation avec des anticorps spécifiques.
- Révélation des protéines avec des anticorps secondaires marqués par radioisotope ou enzyme.
- Utilisation de la peroxydase avec un agent luminescent, la détection se fait par une caméra CCD.
Applications de l'Immunoblot
- Utilisé pour la détection de protéines d'agents infectieux.
- Technique permettant d'obtenir une luminescence proportionnelle à la concentration en protéines.
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Description
Test your knowledge on Enzyme Linked Immuno-Sorbent assay and Immunofluorescence techniques, including conjugation and excitation. Learn about direct tissue marking, microorganism identification, and ecology studies.
