ELISA and Immunofluorescence Techniques

Quel est le principe de détection utilisé dans les techniques d'immuno-enzymologie ?

Quelle est la méthode de lecture utilisée dans les techniques d'immunofluorescence ?

Quel est le type de marquage utilisé dans les techniques de radio-immunologie ?

Quel est le résultat de la réaction Ag-Ac dans les techniques en phase homogène ?

Quel est le principe de la méthode de dosage par compétition ?

Quel est le but du marquage dans les techniques immunologiques ?

Quel est le type de signal obtenu avec la technique de Radio Immuno-sorbent assay (RIST) ?

Quel est le but de la séparation des protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide dans l'immunoblot ?

Quel type de marqueur est utilisé dans la révélation des protéines dans l'immunoblot ?

Quel est l'usage des isotopes radioactifs dans la recherche biologique ?

Quel est le principe de la technique de Radio Allergo-sorbent assay (RAST) ?

Quelle est la technique qui permet d'identifier des microorganismes dans les prélèvements sans isolement?

Quel est le rôle des anticorps primaires dans l'immunoblot ?

Quel est le résultat attendu de la cytométrie de flux?

Quel est le but de la conjugaison de l'Ac, de l'Ag ou de l'Ig au fluorochrome?

Quel est l'inconvénient de la cytométrie de flux?

Quel est le résultat attendu de l'ELISA?

Quel est le principe de la cytométrie de flux?

ELISA et Immunofluorescence

ELISA : méthode d'intégration d'enzymes dans des tests immunologiques pour détecter la présence d'anticorps ou d'antigènes.
Immunofluorescence : utilisation de fluorochromes (ex : fluorescéine, FITC) pour marquer des anticorps, permettant la visualisation par fluorescence.
Identification des microorganismes dans les prélèvements, avec des exemples tels que Legionella pneumophila et Bordetella pertussis.

Cytométrie de Flux (FACS)

Utilisation de différents fluorochromes pour analyser un échantillon hétérogène.
Les cellules marquées passent devant un laser, activant leur fluorescence.
Mesure de l'intensité de fluorescence, déterminant la taille, la granulosité et la concentration cellulaire.
Inconvénients : réactions croisées possibles entre antigènes proches.

Techniques de Radio-immunologie

Techniques hautement sensibles, avec une capacité de détection pouvant atteindre ng/l.
L’utilisation d’isotopes radioactifs, comme C14, H3, et I125, permet une détection précise mais pose des risques de radiations.
Utilisé pour des dosages hormonaux, de drogues ou de marqueurs tumoraux.

Types de Marquage

Marquage par enzyme (EIA) : produit coloré dosé par photométrie.
Marquage par fluorochrome (IFA) : lecture via microscopie ou fluorimétrie.
Marquage par isotope radioactif (RIA) : dosage par autoradiographie.

Méthodes de Détection

Réaction Ag-Ac visible grâce à un traceur de marquage sur l'antigène, l'anticorps ou une immunoglobuline.
Techniques homogènes : le marqueur modifié par Ag-Ac, pas de séparation nécessaire.
Techniques hétérogènes : lavage nécessaire car le comportement du marqueur ne change pas.

Immunoblot

Permet la séparation de protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide.
Transfert des protéines sur une membrane de nitrocellulose, incubation avec des anticorps spécifiques.
Révélation des protéines avec des anticorps secondaires marqués par radioisotope ou enzyme.
Utilisation de la peroxydase avec un agent luminescent, la détection se fait par une caméra CCD.

Applications de l'Immunoblot

Utilisé pour la détection de protéines d'agents infectieux.
Technique permettant d'obtenir une luminescence proportionnelle à la concentration en protéines.

Test your knowledge on Enzyme Linked Immuno-Sorbent assay and Immunofluorescence techniques, including conjugation and excitation. Learn about direct tissue marking, microorganism identification, and ecology studies.