9 Questions
¿Cuál es el tipo de pulso eléctrico más común en la electroporación?
Desintegración exponencial
¿Qué es lo que ocurre con la membrana celular en la electroporación reversible?
Se crea un nanoporo temporal
¿Cuál es el voltaje máximo que se utiliza en la electroporación irreversible?
3 kV
¿Qué es la eficiencia de transformación?
El número de unidades formadoras de colonias producidas al transformar ADN plasmídico
¿Cuál es el rango de células viables en una preparación para una reacción de transformación?
2x10^8 - 10^11
¿Qué es lo que se utiliza para determinar la eficiencia de la transformación en E. coli?
Plásmidos estándar como pBR322 y pUC
¿Qué es un factor que afecta la eficiencia de transformación?
La cuantificación correcta del ADN
¿Qué es lo que ocurre con las células que han sufrido electroporación irreversible?
Eventualmente conducen a la apoptosis
¿Cuál es el propósito de la electroporación en la transformación de células?
Permite la entrada de ADN plasmídico en la célula
Study Notes
Electroporación
- La desintegración exponencial es el tipo más común de pulso eléctrico en la electroporación, donde se establece un voltaje que disminuye durante unos milisegundos, lo que se conoce como constante de tiempo.
- La electroporación reversible (RE) implica un voltaje de hasta 1 kV, donde las células pueden sobrevivir a los efectos de la permeación de la membrana y recuperarse.
- La electroporación irreversible (IRE) implica hasta 3 kV, creando poros permanentes que eventualmente conducen a la apoptosis.
Eficiencia de Transformación
- La eficiencia de transformación se mide en unidades formadoras de colonias (UFC) producidas al transformar 1 µg de ADN plasmídico en un volumen conocido de células competentes.
- El número de células viables en una preparación para una reacción de transformación puede oscilar entre 2x108 y 1011.
- Los métodos de preparación más comunes de E. coli producen alrededor de 1010 células viables por reacción.
- Los plásmidos estándar utilizados para determinar la eficiencia de la transformación en E. coli son pBR322 y otros vectores de tamaño similar, como la serie de vectores pUC.
Factores que Afectan la Eficiencia de Transformación
- La cuantificación correcta del ADN es fundamental para una transformación eficaz.
Aprende sobre la electroporación reversible y irreversible, sus efectos en la membrana celular y cómo funciona. Descubre los diferentes tipos de electroporación y su importancia
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