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Questions and Answers
¿Cuál es el límite de detección de la espectrometría?
¿Cuál es el límite de detección de la espectrometría?
- 1-1000 (correct)
- 10
- 1-0.01
- 1000
¿Qué tipo de moléculas migran hacia el polo positivo en electroforesis?
¿Qué tipo de moléculas migran hacia el polo positivo en electroforesis?
- Proteínas con carga positiva (correct)
- Ácidos nucleicos
- Proteínas con carga negativa
- Moléculas neutras
¿Qué sustancia se usa para dar carga negativa a las proteínas en electroforesis?
¿Qué sustancia se usa para dar carga negativa a las proteínas en electroforesis?
- Etanol
- Detergente
- Dodecilsulfato de sodio (SDS) (correct)
- Ácido clorhídrico
¿Cuál es el principio fundamental de la electroforesis?
¿Cuál es el principio fundamental de la electroforesis?
¿Qué grupo es responsable de que los ácidos nucleicos porten carga negativa?
¿Qué grupo es responsable de que los ácidos nucleicos porten carga negativa?
¿Qué dispositivo se utiliza para generar un campo eléctrico en electroforesis?
¿Qué dispositivo se utiliza para generar un campo eléctrico en electroforesis?
¿Cuál es el límite de detección de la conductividad?
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¿Qué ocurre con las macromoléculas cargadas en un campo eléctrico?
¿Qué ocurre con las macromoléculas cargadas en un campo eléctrico?
¿Cuál es el principio básico en el que se basa la electroforesis?
¿Cuál es el principio básico en el que se basa la electroforesis?
¿En qué año se desarrolló la técnica de electroforesis para muestras macroscópicas?
¿En qué año se desarrolló la técnica de electroforesis para muestras macroscópicas?
¿Cuál de las siguientes sustancias no es un ejemplo de un analito que puede ser separado por electroforesis?
¿Cuál de las siguientes sustancias no es un ejemplo de un analito que puede ser separado por electroforesis?
En la electroforesis capilar, ¿cuál es el rango de voltaje que se aplica?
En la electroforesis capilar, ¿cuál es el rango de voltaje que se aplica?
¿Qué tipo de inyección se utiliza para introducir la muestra en el capilar durante la electroforesis?
¿Qué tipo de inyección se utiliza para introducir la muestra en el capilar durante la electroforesis?
¿Qué tipo de moléculas se separa eficazmente con la electroforesis?
¿Qué tipo de moléculas se separa eficazmente con la electroforesis?
¿Cuál es la función de la solución amortiguadora en la electroforesis capilar?
¿Cuál es la función de la solución amortiguadora en la electroforesis capilar?
¿Qué tipo de moléculas pueden ser detectadas al final del proceso de electroforesis?
¿Qué tipo de moléculas pueden ser detectadas al final del proceso de electroforesis?
¿Cuál es la función principal de la solución amortiguadora en la electroforesis?
¿Cuál es la función principal de la solución amortiguadora en la electroforesis?
En una cámara de electroforesis vertical, ¿dónde se coloca el polo positivo?
En una cámara de electroforesis vertical, ¿dónde se coloca el polo positivo?
¿Cuál de las siguientes características hace que el gel de agarosa sea adecuado para separar ADN?
¿Cuál de las siguientes características hace que el gel de agarosa sea adecuado para separar ADN?
¿Qué ocurre con el gel de agarosa al enfriarse después de ser disuelto?
¿Qué ocurre con el gel de agarosa al enfriarse después de ser disuelto?
¿Cuál es una ventaja del gel de agarosa sobre el gel de acrilamida?
¿Cuál es una ventaja del gel de agarosa sobre el gel de acrilamida?
¿Cuál es la concentración de agarosa más utilizada para la electroforesis de ácidos nucleicos?
¿Cuál es la concentración de agarosa más utilizada para la electroforesis de ácidos nucleicos?
¿Qué propiedad determina el tamaño de poro en los geles de acrilamida?
¿Qué propiedad determina el tamaño de poro en los geles de acrilamida?
¿Cómo se elabora un gel de agarosa?
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¿Qué tipo de muestras se utilizan en la digestión ácida?
¿Qué tipo de muestras se utilizan en la digestión ácida?
¿Qué identifica el color rojo en una cámara de electroforesis?
¿Qué identifica el color rojo en una cámara de electroforesis?
¿Qué temperatura mínima se requiere en calcinación para descomponer la parte orgánica?
¿Qué temperatura mínima se requiere en calcinación para descomponer la parte orgánica?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el gel de acrilamida es correcta?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el gel de acrilamida es correcta?
En la electroforesis, ¿qué papel juegan las moléculas cargadas?
En la electroforesis, ¿qué papel juegan las moléculas cargadas?
¿Cuál es la relación de proporción de acrilamida y bisacrilamida en los geles?
¿Cuál es la relación de proporción de acrilamida y bisacrilamida en los geles?
¿Cuál de los siguientes ácidos no se menciona para la digestión ácida en el contenido?
¿Cuál de los siguientes ácidos no se menciona para la digestión ácida en el contenido?
¿Qué tipo de gel se usa principalmente para la separación de proteínas?
¿Qué tipo de gel se usa principalmente para la separación de proteínas?
¿Cuál es la principal aplicación de la electroforesis?
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¿Qué proceso es opuesto a la descomposición química?
¿Qué proceso es opuesto a la descomposición química?
¿Cuál es la diferencia principal entre calcinación y combustión?
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¿Cómo se lleva a cabo la descomposición por horno de microondas?
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¿Cuál es la técnica que permite una digestión rápida mediante energía electromagnética?
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¿Cuál de las siguientes moléculas no se usa en la electroforesis?
¿Cuál de las siguientes moléculas no se usa en la electroforesis?
¿Cuál de estas afirmaciones sobre la electroforesis es incorrecta?
¿Cuál de estas afirmaciones sobre la electroforesis es incorrecta?
¿Qué se obtiene principalmente de la combustión durante un proceso de descomposición?
¿Qué se obtiene principalmente de la combustión durante un proceso de descomposición?
¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la concentración de agarosa es correcta?
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¿Qué ocurre con los ácidos nucleicos lineales de alto peso molecular durante la electroforesis?
¿Qué ocurre con los ácidos nucleicos lineales de alto peso molecular durante la electroforesis?
¿Qué conformaciones de un plásmido se pueden visualizar durante la electroforesis?
¿Qué conformaciones de un plásmido se pueden visualizar durante la electroforesis?
¿Qué función tienen los marcadores de peso molecular en la electroforesis de agarosa?
¿Qué función tienen los marcadores de peso molecular en la electroforesis de agarosa?
¿Qué rango de tamaños de banda se puede observar al utilizar una concentración de 1% de agarosa?
¿Qué rango de tamaños de banda se puede observar al utilizar una concentración de 1% de agarosa?
¿Qué efecto tiene el pH sobre la formación del gel de agarosa?
¿Qué efecto tiene el pH sobre la formación del gel de agarosa?
¿Cuál es la relación entre el tamaño de los poros de la matriz de agarosa y la concentración de agarosa utilizada?
¿Cuál es la relación entre el tamaño de los poros de la matriz de agarosa y la concentración de agarosa utilizada?
¿Qué se requiere para un perfil electroquímico de ácidos nucleicos durante la electroforesis?
¿Qué se requiere para un perfil electroquímico de ácidos nucleicos durante la electroforesis?
Flashcards
Electroforesis
Electroforesis
Método de separación de especies cargadas en un campo eléctrico.
Especies cargadas
Especies cargadas
Moléculas que poseen carga eléctrica.
Electroforesis capilar
Electroforesis capilar
Método de electroforesis que utiliza un capilar para separar las moléculas.
Capilar (electroforesis)
Capilar (electroforesis)
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Solución amortiguadora
Solución amortiguadora
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Inyección electrocinética
Inyección electrocinética
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Potencial de energía (Electroforesis Capilar)
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Muestra (electroforesis)
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Cámara de electroforesis
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Gel de agarosa
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Gel de acrilamida
Gel de acrilamida
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Peso molecular
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Soporte de gel
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Polos positivo y negativo
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Electroforesis de ácidos nucleicos
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Desnaturalización de la muestra
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Descomposición de la muestra
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Digestión ácida
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Calcinación
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Electroforesis: ¿Para qué sirve?
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Descomposición química: proceso opuesto
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Calcinación vs. Combustión (descomposición)
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Descomposición por microondas: ¿Cómo funciona?
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Digestión rápida de muestras: técnica clave
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Electroforesis: moléculas NO usadas
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Electroforesis y tamaño de macromoléculas
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Electroforesis: función principal
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Límite de detección de la espectrometría
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Límite de detección de la absorción
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Carga de las proteínas
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Carga de los ácidos nucleicos
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Importancia de la electroforesis en biología molecular
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Factores que influyen en la migración en electroforesis
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Concentración de Agarosa y Tamaño de Banda
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Electroforesis de ADN
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Plásmido y Conformaciones
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Agarosa
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Tamaño del poro en gel de agarosa
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Peso Molecular (PM) en ADN
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Marcadores de Peso Molecular (PM)
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Conformación de plásmido
Conformación de plásmido
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Study Notes
Electroforesis
- Método de separación basado en velocidades de migración diferencial de especies cargadas en un campo eléctrico.
- Desarrollado en 1930 para estudiar proteínas séricas.
- Aplicable a una amplia variedad de muestras para separación.
- Incluye separación de aniones y cationes, inorgánicos, aminoácidos, catecolaminas, fármacos, eritropoyetinas, insulina, vitaminas, carbohidratos, proteínas, péptidos, ácidos nucleicos, polinucleótidos, y otras moléculas con carga.
- Permite separar macromoléculas de interés bioquímicos, biológicos, inmunológicos, químicos y médicos.
- Ofrece análisis de enzimas, hormonas, anticuerpos (ELISA).
Electroforesis Capilar
- Instrumentación incluye un capilar (10-100 µm de diámetro interno y 40-100 cm de longitud) lleno de solución amortiguadora.
- Electrodos (platinos) en ambos extremos del capilar.
- Introducción de muestra (inyección electrocinética o de presión).
- Detección en el extremo opuesto del capilar.
- Campo eléctrico aplicado (5-30 kV).
- Migración de moléculas basada en carga y tamaño.
Tipos de detectores
- Espectrometría (UV-Vis, fluorescencia, etc.)
- Absorción, fluorescencia
- Lente térmico, Raman
- Quimioluminiscencia
- Espectrometría de masa
- Electroquímica (conductividad, potenciometría, amperometría)
- Límites de detección varían según el tipo de detector
Electroforesis Gel (Parte 2)
- Moléculas cargadas eléctricamente migran hacia polos opuestos según su carga.
- La carga depende del pH del medio
- Las proteínas pueden tener cargas positivas o negativas, dependiendo de los aminoácidos que las componen.
- Los geles pueden ser de agarosa (ideal para ácidos nucleicos) o acrilamida (ideal para proteínas).
- Agarosa sólida, que forma una matriz porosa para separar ácidos nucleicos según su tamaño.
- Concentración de agarosa tiene relación inversa con el tamaño de los poros del gel.
Descomposición de la Muestra
- Procedimientos para separar una muestra en compuestos químicos o físicos.
- Métodos como tamaño de partícula, preparación de muestra, propiedades elementales.
- Técnicas como digestiones ácidas (utilizando altas temperaturas y presiones para compuestos orgánicos, minerales y suelos) y calcinación (usando temperaturas extremadamente altas para descomponer material orgánico y dejar solo contenido mineral).
- También horne de microondas es usado para acelerar el proceso.
Preguntas de Examen
- Preguntas sobre tipos de geles, funciones de la electroforesis, la descomposición de muestras, aplicaciones de la electroforesis en diversos tipos de muestras (proteínas, ácidos nucleicos, etc), y conceptos relacionados.
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