Electroforesis y Electroforesis Capilar
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Questions and Answers

¿Cuál es el límite de detección de la espectrometría?

  • 1-1000 (correct)
  • 10
  • 1-0.01
  • 1000

    • ¿Qué tipo de moléculas migran hacia el polo positivo en electroforesis?

  • Proteínas con carga positiva (correct)
  • Ácidos nucleicos
  • Proteínas con carga negativa
  • Moléculas neutras

    • ¿Qué sustancia se usa para dar carga negativa a las proteínas en electroforesis?

  • Etanol
  • Detergente
  • Dodecilsulfato de sodio (SDS) (correct)
  • Ácido clorhídrico

    • ¿Cuál es el principio fundamental de la electroforesis?

    <p>Las moléculas migran por un gel basado en su carga y tamaño.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué grupo es responsable de que los ácidos nucleicos porten carga negativa?

    <p>Grupo fosfato (PO4)</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué dispositivo se utiliza para generar un campo eléctrico en electroforesis?

    <p>Cámara de electroforesis</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el límite de detección de la conductividad?

    <p>100</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué ocurre con las macromoléculas cargadas en un campo eléctrico?

    <p>Migran hacia el polo opuesto a su carga.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el principio básico en el que se basa la electroforesis?

    <p>Separación mediante velocidades de migración de especies cargadas.</p> Signup and view all the answers

    ¿En qué año se desarrolló la técnica de electroforesis para muestras macroscópicas?

    <p>1930</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes sustancias no es un ejemplo de un analito que puede ser separado por electroforesis?

    <p>Gases</p> Signup and view all the answers

    En la electroforesis capilar, ¿cuál es el rango de voltaje que se aplica?

    <p>5-30 KV</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de inyección se utiliza para introducir la muestra en el capilar durante la electroforesis?

    <p>Inyección electrocinética o de presión.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de moléculas se separa eficazmente con la electroforesis?

    <p>Macromoléculas con carga.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función de la solución amortiguadora en la electroforesis capilar?

    <p>Mantener el pH y la conductividad.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de moléculas pueden ser detectadas al final del proceso de electroforesis?

    <p>Macromoléculas con carga.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función principal de la solución amortiguadora en la electroforesis?

    <p>Alterar el pH sin cambios bruscos</p> Signup and view all the answers

    En una cámara de electroforesis vertical, ¿dónde se coloca el polo positivo?

    <p>En la parte inferior de la cámara</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes características hace que el gel de agarosa sea adecuado para separar ADN?

    <p>Forma una malla tridimensional que separa moléculas por peso</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué ocurre con el gel de agarosa al enfriarse después de ser disuelto?

    <p>Forma un gel poroso</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es una ventaja del gel de agarosa sobre el gel de acrilamida?

    <p>No es tóxico</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la concentración de agarosa más utilizada para la electroforesis de ácidos nucleicos?

    <p>1.5 a 2 %</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué propiedad determina el tamaño de poro en los geles de acrilamida?

    <p>La concentración total de acrilamida</p> Signup and view all the answers

    ¿Cómo se elabora un gel de agarosa?

    <p>Se disuelve en una solución amortiguadora y se calienta</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de muestras se utilizan en la digestión ácida?

    <p>Muestras sólidas y minerales</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué identifica el color rojo en una cámara de electroforesis?

    <p>Polo positivo</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué temperatura mínima se requiere en calcinación para descomponer la parte orgánica?

    <p>900°C</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre el gel de acrilamida es correcta?

    <p>Ofrece un mayor poder de resolución</p> Signup and view all the answers

    En la electroforesis, ¿qué papel juegan las moléculas cargadas?

    <p>Se mueven hacia el electrodo opuesto</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la relación de proporción de acrilamida y bisacrilamida en los geles?

    <p>19:1</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de los siguientes ácidos no se menciona para la digestión ácida en el contenido?

    <p>H3PO4</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué tipo de gel se usa principalmente para la separación de proteínas?

    <p>Gel de poliacrilamida</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la principal aplicación de la electroforesis?

    <p>Separar moléculas según su carga eléctrica y tamaño.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué proceso es opuesto a la descomposición química?

    <p>Síntesis química</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la diferencia principal entre calcinación y combustión?

    <p>La calcinación no utiliza oxígeno, mientras que la combustión sí.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cómo se lleva a cabo la descomposición por horno de microondas?

    <p>Utiliza un horno especializado con energía de microondas y reactivos químicos.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la técnica que permite una digestión rápida mediante energía electromagnética?

    <p>Horneado de microondas.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes moléculas no se usa en la electroforesis?

    <p>Ácidos grasos.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de estas afirmaciones sobre la electroforesis es incorrecta?

    <p>La electroforesis permite separar moléculas sólo en función de su carga eléctrica.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se obtiene principalmente de la combustión durante un proceso de descomposición?

    <p>Dióxido de carbono y agua.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre la concentración de agarosa es correcta?

    <p>La concentración de agarosa es inversamente proporcional al tamaño de los poros.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué ocurre con los ácidos nucleicos lineales de alto peso molecular durante la electroforesis?

    <p>Migran más lentamente que los de menor peso molecular.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué conformaciones de un plásmido se pueden visualizar durante la electroforesis?

    <p>Super enrollada, semirelajada y relajada.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué función tienen los marcadores de peso molecular en la electroforesis de agarosa?

    <p>Ayudar a determinar el peso molecular de los fragmentos analizados.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué rango de tamaños de banda se puede observar al utilizar una concentración de 1% de agarosa?

    <p>250 pb - 12 Kb.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué efecto tiene el pH sobre la formación del gel de agarosa?

    <p>Afecta múltiples aspectos, incluyendo la temperatura de gelificación.</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la relación entre el tamaño de los poros de la matriz de agarosa y la concentración de agarosa utilizada?

    <p>A menor concentración, mayor tamaño de los poros.</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué se requiere para un perfil electroquímico de ácidos nucleicos durante la electroforesis?

    <p>Detergentes, buffer y marcadores de PM.</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Electroforesis

    • Método de separación basado en velocidades de migración diferencial de especies cargadas en un campo eléctrico.
    • Desarrollado en 1930 para estudiar proteínas séricas.
    • Aplicable a una amplia variedad de muestras para separación.
    • Incluye separación de aniones y cationes, inorgánicos, aminoácidos, catecolaminas, fármacos, eritropoyetinas, insulina, vitaminas, carbohidratos, proteínas, péptidos, ácidos nucleicos, polinucleótidos, y otras moléculas con carga.
    • Permite separar macromoléculas de interés bioquímicos, biológicos, inmunológicos, químicos y médicos.
    • Ofrece análisis de enzimas, hormonas, anticuerpos (ELISA).

    Electroforesis Capilar

    • Instrumentación incluye un capilar (10-100 µm de diámetro interno y 40-100 cm de longitud) lleno de solución amortiguadora.
    • Electrodos (platinos) en ambos extremos del capilar.
    • Introducción de muestra (inyección electrocinética o de presión).
    • Detección en el extremo opuesto del capilar.
    • Campo eléctrico aplicado (5-30 kV).
    • Migración de moléculas basada en carga y tamaño.

    Tipos de detectores

    • Espectrometría (UV-Vis, fluorescencia, etc.)
    • Absorción, fluorescencia
    • Lente térmico, Raman
    • Quimioluminiscencia
    • Espectrometría de masa
    • Electroquímica (conductividad, potenciometría, amperometría)
    • Límites de detección varían según el tipo de detector

    Electroforesis Gel (Parte 2)

    • Moléculas cargadas eléctricamente migran hacia polos opuestos según su carga.
    • La carga depende del pH del medio
    • Las proteínas pueden tener cargas positivas o negativas, dependiendo de los aminoácidos que las componen.
    • Los geles pueden ser de agarosa (ideal para ácidos nucleicos) o acrilamida (ideal para proteínas).
    • Agarosa sólida, que forma una matriz porosa para separar ácidos nucleicos según su tamaño.
    • Concentración de agarosa tiene relación inversa con el tamaño de los poros del gel.

    Descomposición de la Muestra

    • Procedimientos para separar una muestra en compuestos químicos o físicos.
    • Métodos como tamaño de partícula, preparación de muestra, propiedades elementales.
    • Técnicas como digestiones ácidas (utilizando altas temperaturas y presiones para compuestos orgánicos, minerales y suelos) y calcinación (usando temperaturas extremadamente altas para descomponer material orgánico y dejar solo contenido mineral).
    • También horne de microondas es usado para acelerar el proceso.

    Preguntas de Examen

    • Preguntas sobre tipos de geles, funciones de la electroforesis, la descomposición de muestras, aplicaciones de la electroforesis en diversos tipos de muestras (proteínas, ácidos nucleicos, etc), y conceptos relacionados.

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