Dosage de la Caféine par HPLC

Partie 1 : Dosage de la Caféine dans le Coca-Cola® par HPLC

• La caféine est dosée par chromatographie liquide haute performance (HPLC).
• Les chromatogrammes des étalons sont fournis en annexe.
• Conditions opératoires:
  • Colonne: Wakosil C18 250*4
  • Eluant: Eau/acétonitrile (30/70)
  • Débit: 1 mL/min
  • Pression: 114 bars
  • Température: 25°C
  • Volume d'injection: 20 µL
  • Durée de la chromatographie: 4 min
  • Longueur d'onde de détection: 254 nm
  • Etalon interne: Benzoïne à une concentration finale précisée.

Relation fondamentale en analyse chromatographique quantitative

• La relation fondamentale relie la masse injectée à l'aire du pic.

Différences entre étalonnage externe et étalonnage interne

• Explication requise.

Choix d'un étalon interne (à partir du document 1)

• Critères de choix d'un étalon interne explicites.

Justification de la longueur d'onde de détection

• Justification de la longueur d'onde de détection (254 nm) à partir du document 1.

Détermination de la concentration de l'échantillon 43 en caféine

• Exploitation des chromatogrammes (documents 2 et 2bis) est requise.

Partie 2 : Dosage de la caféine dans le Coca-Cola® par la méthode des ajouts dosés

• Principe de la méthode des ajouts dosés:
  • Ajouter des quantités connues de composé à doser à des solutions de référence.
  • Déterminer la concentration du composé dans la solution initiale.
• Préparation de la gamme étalon (à l'aide des documents):
  • Cinq solutions diluées de caféine sont préparées (différentes concentrations)
  • Les solutions sont injectées dans une boucle de 20,0 µL.
  • Les aires des pics de caféine correspondantes sont données dans le tableau.
• Relation entre l'aire du pic et la concentration (à l'aide des documents):
  • Une courbe d'étalonnage est tracée avec les données (aire du pic vs concentration).
  • La droite obtenue possède une équation y = 0.2151x + 0.5076 et un coefficient de corrélation R² = 0.9999, permettant de déterminer la concentration de caféine dans la solution mère.

Documents

• Les documents 1, 2, 2bis fournissent des données supplémentaires (formules chimiques, chromatogrammes.)
• Les documents sont critiques pour ce TD.

Ce quiz explore les techniques de dosage de la caféine dans le Coca-Cola® en utilisant la chromatographie liquide haute performance (HPLC). Les étudiants devront comprendre les conditions opératoires, les méthodes d'étalonnage et les critères de choix d'un étalon interne. Des connaissances sur la relation fondamentale en analyse chromatographique sont également requises.