DNA Structure and Function Quiz

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Questions and Answers

Qual è il principale fattore che contribuisce alla stabilità della molecola di DNA?

  • La forza di impilamento delle basi azotate (correct)
  • La conformazione dei solchi
  • I legami a idrogeno tra le basi
  • La presenza di legami fosfodiesterici

Qual è la principale caratteristica della forma B del DNA descritta da Watson e Crick?

  • Orientamento antiparallelo dei filamenti (correct)
  • Basi azotate sfalsate di 45°
  • Filamenti sovrapposti di nucleotidi
  • Basi azotate disposte casualmente

Quanti legami a idrogeno si formano tra le basi A-T?

  • Due (correct)
  • Quattro
  • Tre
  • Uno

Qual è l'angolo di sfalsamento tra le basi azotate nella doppia elica B del DNA?

<p>36° (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è il diametro costante della doppia elica del DNA?

<p>20 Å (C)</p> Signup and view all the answers

Dove si accede all'informazione genetica del DNA?

<p>Attraverso il solco maggiore (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione principale dei legami fosfodiesterici nel DNA?

<p>Collegare i nucleotidi tra loro (A)</p> Signup and view all the answers

Quanti nucleotidi servono per completare un giro della doppia elica B?

<p>10 nucleotidi (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è il principio alla base della migrazione del DNA durante l'elettroforesi?

<p>Il DNA si muove verso il polo positivo a causa della sua carica negativa (B)</p> Signup and view all the answers

Come viene reso visibile il DNA durante l'elettroforesi?

<p>Con il bromuro di etidio che emette luce visibile sotto UV (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione del bromuro di etidio nell'elettroforesi?

<p>Facilita l'assorbimento di luce visibile nel gel (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il ruolo della soluzione di NaOH durante il processo di denaturazione del DNA?

<p>Denatura il DNA rompendone i legami idrogeno (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa avviene durante la fase di southern blotting?

<p>I frammenti di DNA vengono trasferiti dal gel a un filtro di nitrocellulosa (C)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione è vera riguardo ai frammenti di DNA durante l'elettroforesi?

<p>La velocità di migrazione dipende dalla lunghezza del frammento. (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione principale della DNA polimerasi durante la replicazione del DNA?

<p>Sintetizzare un filamento di DNA utilizzando uno stampo (D)</p> Signup and view all the answers

Che cosa rappresenta il termine 'imprinting' in relazione alle code istoniche?

<p>La registrazione delle modifiche covalenti delle code istoniche prima della duplicazione (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è un componente essenziale del sistema di elettroforesi?

<p>Un pozzetto per l'inserimento dei fragmenti di DNA (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è l'elemento necessario affinché la DNA polimerasi inizi la sintesi del nuovo filamento?

<p>Un primer che termina con un gruppo 3'-OH (A)</p> Signup and view all the answers

Per quale motivo il gel di agarosio è utilizzato nell'elettroforesi?

<p>Agisce come matrice per facilitare la separazione delle molecole (C)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni descrive meglio la direzione di attività della DNA polimerasi?

<p>Avanza in direzione 5'-3' (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa accade se gli ultimi nucleotidi sul 3' dell'innesco non sono correttamente appaiati?

<p>La sintesi del filamento si blocca (B)</p> Signup and view all the answers

Durante la sintesi del DNA, cosa rappresenta il gruppo fosfato-α?

<p>Il fosfato più vicino allo zucchero (C)</p> Signup and view all the answers

Quale è il ruolo del pirofosfato durante la sintesi del DNA?

<p>Fornire energia per il legame dei nucleotidi (A)</p> Signup and view all the answers

In che modo la DNA polimerasi utilizza lo stampo durante la replicazione?

<p>Aggiunge nucleotidi secondo le regole di appaiamento (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il ruolo dei cationi bivalenti nel meccanismo di azione dell'endonucleasi?

<p>Attivano la molecola d'acqua per l'attacco nucleofilo (B)</p> Signup and view all the answers

Che tipo di taglio effettuano le endonucleasi di tipo I e III rispetto alla sequenza riconosciuta?

<p>Tagliano sia in prossimità sia a distanza dalla sequenza riconosciuta (A)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione spiega la capacità dell'enzima EcoRV di distinguere le sequenze corrette da quelle sbagliate?

<p>EcoRV induce cambiamenti conformazionali nel DNA solo con sequenze corrette (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa provoca l'attacco nucleofilo nel meccanismo di taglio dell'enzima?

<p>L'ossigeno dell'acqua attacca il fosforo parzialmente positivo nel legame fosfodiesterico (D)</p> Signup and view all the answers

Perché le sequenze tagliate dalle endonucleasi non sono compatibili per le tecniche del DNA ricombinante?

<p>Perché il taglio avviene in prossimità di diverse basi non correlate (B)</p> Signup and view all the answers

Quale tipo di legame viene spezzato dall'attività dell'enzima durante il taglio del DNA?

<p>Legame fosfodiesterico tra nucleotidi (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è la forma in cui la maggior parte delle endonucleasi agisce?

<p>Come dimero (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa suggerisce la simmetria rotazionale binaria nella sequenza riconosciuta da EcoRV?

<p>Che la sequenza è riconoscibile da entrambe le direzioni (A)</p> Signup and view all the answers

Qual è il ruolo del palmo della DNA polimerasi nel processo di polimerizzazione?

<p>Stabilizza il complesso giunzione innesco-stampo e controlla l’appaiamento delle basi (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa avviene al pirofosfato prodotto durante la reazione di polimerizzazione?

<p>Viene idrolizzato in due molecole di fosfato (B)</p> Signup and view all the answers

Qual è il ruolo dei cationi di magnesio nel sito attivo della DNA polimerasi?

<p>Stabilizzano i nucleotidi e facilitano l'attacco nucleofilo (C)</p> Signup and view all the answers

Cosa accade se l’appaiamento delle basi è errato nella DNA polimerasi?

<p>Ostacola i contatti nel solco minore e riduce la velocità di polimerizzazione (D)</p> Signup and view all the answers

Quale delle seguenti affermazioni riguardo il palmo della DNA polimerasi è vera?

<p>È composto da un foglietto beta e ospita il sito attivo dell'enzima (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la conseguenza dell'idrolisi del pirofosfato nella reazione di polimerizzazione?

<p>La reazione è favorita termodinamicamente (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa determina la stabilità del nucleotide entrante durante la polimerizzazione?

<p>La coordinazione degli aspartici nel sito attivo (D)</p> Signup and view all the answers

Come può la DNA polimerasi mantenere l'efficienza dell'incorporazione dei nucleotidi?

<p>Controllando l'appaiamento corretto delle basi (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il ruolo principale del caricatore della sliding clamp nel complesso multiproteico?

<p>Assemblare la sliding clamp in corrispondenza della giunzione primer-stampo (B)</p> Signup and view all the answers

Cosa caratterizza il modello a trombone nella replicazione del DNA?

<p>Si genera un'ansa di ssDNA che cambia forma (C)</p> Signup and view all the answers

Qual è la funzione dei bracci flessibili della proteina 𝜏 nel complesso multiproteico?

<p>Mantenere le polimerasi associate alla forcella replicativa (A)</p> Signup and view all the answers

Come avviene la sintesi dei nuovi frammenti di Okazaki sul filamento discontinuo?

<p>Le DNA polimerasi si alternano grazie alla sliding clamp (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è il risultato della sintesi del primer a RNA sul filamento in ritardo?

<p>Formazione di un nuovo punto di inizio per la sintesi (C)</p> Signup and view all the answers

Quale affermazione descrive meglio la funzione della DNA primasi?

<p>Synthesizes a new RNA primer on the lagging strand (A)</p> Signup and view all the answers

Cosa accade quando la DNA Pol III del filamento discontinuo raggiunge l'estremità dello stampo?

<p>Viene rilasciata dalla sliding clamp (D)</p> Signup and view all the answers

Qual è la conseguenza più significativa della presenza di più DNA polimerasi nel complesso multiproteico?

<p>Sintesi simultanea e più veloce di entrambi i filamenti (C)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Forma B del DNA

La forma del DNA descritta da Watson e Crick, caratterizzata da una doppia catena polinucleotidica, antiparallela e complementare, con un diametro costante di 20 A.

Forza di impilamento (interazioni fra le basi)

Le basi azotate sono impilate una sull'altra, creando una forza di attrazione che stabilizza la molecola di DNA. Queste interazioni sono fondamentali per la stabilità complessiva del DNA.

Antiparallelo

L'orientamento dei due filamenti di DNA, in cui un filamento corre in direzione 5'-3' e l'altro in direzione 3'-5'.

Complementare

La capacità dei due filamenti di DNA di formare coppie di basi specifiche (A-T e C-G) attraverso legami a idrogeno.

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Appaiamenti canonici di Watson e Crick

I legami che si formano tra le basi azotate (A-T e C-G), in cui un'adenina (A) si lega a una timina (T) con due legami a idrogeno e una citosina (C) si lega a una guanina (G) con tre legami a idrogeno.

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Destrorso

L'avvolgimento della doppia elica del DNA in senso orario, come una scala a chiocciola che gira verso destra.

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Solco maggiore e solco minore

Le due fessure che si formano tra i due filamenti di DNA, quando si avvolgono tra loro, esponendo le basi azotate all'ambiente acquoso.

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Solco maggiore

Il solco maggiore è più ampio e informativo del solco minore, perché contiene una maggiore varietà di gruppi funzionali e permette alle proteine di riconoscere in modo più preciso l'appaiamento corretto delle basi.

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Elettroforesi del DNA

Tecnica di laboratorio che separa molecole di DNA in base alla loro dimensione, utilizzando un campo elettrico e un gel poroso.

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Gel di Agarosio

Il materiale poroso utilizzato nell'elettroforesi del DNA, contenente una soluzione salina, attraverso cui passano le molecole di DNA.

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Enzimi di restrizione

Enzimi che tagliano il DNA in punti specifici, creando frammenti di diverse dimensioni.

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Bromuro di Etidio

Una molecola che si intercala nella doppia elica del DNA, rendendolo visibile alla luce UV.

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Denaturazione del DNA

Il processo di separazione delle due catene di DNA, rendendolo più accessibile per l'ibridazione.

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Southern Blotting

Una tecnica che trasferisce le molecole di DNA da un gel di agarosio a un filtro di nitrocellulosa.

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Filtro di Nitrocellulosa

Un filtro che lega gli acidi nucleici, utilizzato nel Southern Blotting.

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Acidi Nucleici

Un tipo di molecola biologica che contiene informazioni genetiche.

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Endonucleasi di tipo I e III

Gli enzimi di restrizione di tipo I e III riconoscono sequenze specifiche di DNA, ma tagliano fuori da queste sequenze. Alcuni tagliano vicino, altri a grande distanza.

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Meccanismo di azione delle endonucleasi

La reazione principale coinvolge un attacco nucleofilo da parte di una molecola d'acqua su un legame fosfodiesterico.

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Ruolo degli ioni bivalenti nelle endonucleasi

Gli ioni bivalenti come il magnesio (Mg) sono fondamentali per l'attività catalitica delle endonucleasi di restrizione.

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Sequenza riconosciuta da EcoRV

La sequenza riconosciuta dall'enzima EcoRV presenta una simmetria rotazionale binaria.

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Affinità di EcoRV

EcoRV lega con uguale affinità la sequenza corretta e quelle sbagliate.

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Riconoscimento specifico di EcoRV

EcoRV cambia configurazione solo quando riconosce la sequenza corretta.

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Dimeri nelle endonucleasi

I dimeri sono comuni tra le endonucleasi di restrizione.

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Importanza delle endonucleasi

Gli enzimi di restrizione riconoscono e tagliano il DNA in modo specifico, influenzando la struttura e la funzione del DNA.

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Imprinting

Dopo la replicazione del DNA, le nuove molecole di DNA ereditano il "pattern" di modifiche e condensazione della cromatina dalla molecola di DNA "madre". Le modifiche alle code istoniche influenzano il grado di condensazione della cromatina e questo processo (imprinting) assicura che il DNA "figlio" abbia la stessa struttura generale della cromatina del DNA "madre".

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Replicazione del DNA

Il processo che permette la replicazione del DNA, utilizzando un filamento di DNA come stampo per sintetizzare un nuovo filamento complementare.

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DNA Polimerasi

L'enzima che sintetizza il nuovo filamento di DNA durante la replicazione, usando un filamento pre-esistente come stampo.

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Giunzione innesco-stampo

Un breve frammento di DNA a doppio filamento necessario per avviare la replicazione del DNA. È composto da uno stampo di DNA a singolo filamento e da un innesco/primer complementare allo stampo.

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Stampo di DNA

Un filamento di DNA a singolo filamento che serve come modello per la sintesi del nuovo filamento di DNA da parte della DNA polimerasi.

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Innesco/Primer

Un breve frammento di DNA complementare allo stampo, necessario per l'avvio della replicazione da parte della DNA polimerasi.

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Nucleotidi trifosfato

I mattoni di base del DNA, costituiti da una base azotata, dal desossiribosio e da 3 fosfati legati al 5'.

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Direzione di estensione della DNA polimerasi

La DNA polimerasi aggiunge i nucleotidi solo all'estremità 3' del filamento di DNA, perché l'estremità 5' è "blindata".

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Cosa fa la DNA polimerasi?

L'enzima DNA polimerasi svolge il compito di replicare il DNA, aggiungendo nucleotidi uno dopo l'altro a un filamento esistente (l'innesco).

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Come è fatta la DNA polimerasi?

La DNA polimerasi assomiglia a una mano destra con il palmo, le dita e il pollice. Ogni parte ha il suo ruolo specifico nella replicazione del DNA.

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Dove si trova il sito attivo della DNA polimerasi?

La regione del palmo della DNA polimerasi contiene il sito attivo, dove si posiziona la giunzione innesco-stampo. Qui viene inserito il nuovo nucleotide.

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Che ruolo ha il palmo della DNA polimerasi?

Il palmo della DNA polimerasi stabilizza la giunzione innesco-stampo, mantenendola ferma durante l'aggiunta dei nucleotidi.

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Cosa c'è di particolare nel palmo della DNA polimerasi?

Il palmo contiene due ioni magnesio che aiutano a rendere il processo di aggiunta di nucleotidi più efficiente.

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Come fa il primo ione magnesio a stabilizzare la catena di DNA?

Il primo ione magnesio scherma le cariche negative del nucleotide in arrivo, permettendogli di inserirsi nella catena di DNA.

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Come fa il secondo ione magnesio a favorire l'aggiunta del nucleotide?

Il secondo ione magnesio si lega all'OH del 3' del ribosio, rendendolo più reattivo per l'aggiunta del nucleotide.

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Cosa controlla il palmo della DNA polimerasi?

Il palmo della DNA polimerasi controlla che le basi siano appaiate correttamente, verificando se la nuova catena di DNA è corretta.

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Modello a trombone

Il filamento in ritardo, durante la replicazione del DNA, forma un'ansa che si allunga e si accorcia, simile allo stantuffo di una tromba. Questa ansa permette alle due DNA polimerasi del filamento discontinuo di alternarsi nella sintesi dei frammenti di Okazaki.

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Ruolo del caricatore della sliding clamp

Il caricatore della sliding clamp assembla una sliding clamp sulla giunzione primer-stampo appena formatasi, permettendo alla DNA polimerasi di iniziare la sintesi di un nuovo frammento di Okazaki.

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DNA polimerasi III

La DNA polimerasi III è formata da tre copie, una delle quali duplica in maniera continua il filamento guida, mentre le altre due si alternano nella replicazione del filamento in ritardo.

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Frammenti di Okazaki

I frammenti di Okazaki sono brevi segmenti di DNA sintetizzati sul filamento in ritardo durante la replicazione.

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Filamento guida

Il filamento guida viene sintetizzato in modo continuo, dalla DNA polimerasi III, nella direzione 5'-3'.

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Filamento in ritardo

Il filamento in ritardo è sintetizzato in modo discontinuo, con la DNA polimerasi III che sintetizza brevi frammenti di Okazaki.

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Ruolo della primasi

La primasi sintetizza un nuovo primer a RNA sul filamento discontinuo, permettendo alla DNA polimerasi III di iniziare la sintesi dei frammenti di Okazaki.

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Elicasi

L'elicasi è un enzima che svolge la doppia elica del DNA, separando i due filamenti stampo.

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