Divisão e Ciclo Celulares - 1º Semestre 2024/2025

Introdução à Biologia Celular

• O tema é Divisão e Ciclo Celulares, no 1º semestre do ano letivo 2024/2025.
• O departamento de biologia da universidade de Aveiro é responsável pela matéria.

Estudo da Mitose e Meiose

• O estudo inclui as fases da mitose e meiose, com imagens microscópicas.
• A apresentação tem imagens de células em diferentes etapas da mitose e meiose.

Procedimento

• Os alunos devem trabalhar em grupos de 3 elementos.
• Cada grupo deve explorar as preparações definitivas de mitose e meiose, fornecidas pelo docente.
• Cada figura deve ser documentada com um esquema ou fotografia, e devidamente identificada.

Exemplo de Procedimento para Observação de Mitose

• A figura 1 mostra uma observação ao microscópio óptico de uma fase da mitose (anafase) em células de vértices vegetativos da raiz da cebola (Allium cepa L).
• A imagem foi corada pela técnica do squash em orceína acética.
• A imagem mostra 1-migração dos cromatídios-irmãos para os polos e 2- formação da parede celular (sem visualização das fibras do fuso).

Mitose

• A apresentação mostra imagens da célula em diferentes etapas da mitose.
• Mitoses observadas utilizando microscopia óptica com contraste de fase interferencial.

Elaboração de Preparações Extemporâneas: Colheita, Fixação e Conservação

• Material Biológico:
  • Bolbos de Allium cepa: Colocar os bolbos para germinar e cortar os ápices radiculares (1,5 a 2 cm).
• Fixação e Conservação:
  • Soluçao Carnoy (álcool absoluto + ácido acético na proporção 3:1): Fixar as raízes por pelo menos 15 minutos, no dia da utilização.
  • Conservação: Manter as raízes em álcool a 70%.
• Importante selecionar material biológico com reduzido número de cromossomas e tamanho adequado para observação ao microscópio óptico (MO).
• Allium cepa 2n=16.
• Equipamentos necessários:
• v.v. Allium cepa, orceína acética, HCI 1N, Luvas, Lamparina, vidro-de-relógio, papel de filtro, pinça, mola de madeira, agulha espatulada, lâminas e lamelas.

Procedimentos Experimentais para Preparação Extemporânea

• 9 gotas de orceína acética e 1 gota de ácido clorídrico (HCl 1N) em vidro-de-relógio.
• Colocar os vértices das raízes, aquecer lentamente até ebulição para hidrólise das células em meio ácido.
• Transferir os vértices para uma lâmina, adicionar orceína acética e esmagar levemente - método "squash"
• Remover o excesso de corante com papel de filtro.
• Observar ao microscópio óptico.

Interfase

• A interfase não faz parte da mitose.
• Os cromossomas não são distintos e os nucléolos são visíveis.

Profase

• aumento do volume nuclear e condensação da cromatina.
• Os cromossomas se tornam visíveis ao microscópio óptico.
• O nucléolo desaparece.
• Inicio da formação do fuso mitótico.

Prometafase

• Inicio da desorganização do envoltório nuclear.
• Os cromossomas continuam seu encurtamento e espessamento.
• Emergência dos microtúbulos cinetocorícos, com orientação e deslocamento dos cromossomas para o plano equatorial.

Metafase

• Os cromossomas, localizados no plano equatorial.
• Ligados ao fuso pelo centrômero, fase estática.

Anafase

• Ascensão polar dos cromossomas monocromatídios.
• Separação dos cromossomas para polos opostos ( Anafase A).
• Alongamento celular e afastamento dos polos (Anafase B).

Telofase

• Reorganização do envoltório nuclear.
• Despiralização gradual dos cromossomas para menor visibilidade.
• Desintegração do fuso.
• Inicio da citocinese.

Meiose (Lilium sp.)

• Número reduzido de cromossomas: 2n = 24.
• A apresentação mostra imagens da meiose em Lilium sp.

Elaboração de Preparações Extemporâneas: Colheita, Fixação e Conservação (meiose)

• Colheita: Coletar botões de Lilium sp. (1,5 a 2cm). Descascar e fixar as anteras.
• Fixação e Conservação: Usar a solução de Carnoy (álcool absoluto + ácido acético na proporção 3:1) por 15 minutos.
• Conservação: Guardar as anteras em álcool a 70%.

Etapas da Profase I

• Leptóteno: Estado de condensação.
• Zigóteno: Estado de emparelhamento.
• Paquíteno: Estado de recombinação, com crossing-over.
• Diplóteno: Estado de síntese, formação de quiasmas.
• Diacinese: Estado de recondensação, processo de continuação da condensação.
• Importante: Reconhecer cada fase da meiose com base nas suas características microscópicas

Metafase I

• Os cromossomas, localizados no plano equatorial ligados aos microtúbulos do fuso.
• tétradas cromáticas alinhadas.

Anafase I

• Separação dos homólogos, com movimento em direção a polos opostos.
• Ruptura dos quiasmas restantes.

Telofase I

• Cromossomas atingem os pólos.
• Despolimerização dos microtúbulos cinetocorianos.
• Formação de placa celular.
• Descondensação dos cromossomas.
• Citocinese, finalização da divisão.

Intercinese

• Fase de interrupção entre as duas divisões meióticas.
• Recuperação das células após a telofase I.

Profase II

• Reaparecimento dos cromossomas e desaparecimento do envoltório nuclear e nucléolos.
• Formação dos fusos acromáticos.

Metafase II

• Cromossomas com 2 cromátides.
• Alinhamento no plano equatorial.
• Cromossomas mais finos e longos quando comparados aos da metafase I

Anafase II

• Divisão dos centrómeros.
• Separação das cromátides irmãs.
• Ascenção polar das cromátides.

Telofase II

• Cromátides atingem os pólos.
• Formação da placa celular precoce.
• Descondensação dos cromossomas.
• Reconstituição nuclear e citocinese.