Cytométrie en flux en hématologie

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Questions and Answers

Quel est le marqueur typique des plasmocytes ?

  • CD19
  • CD138 (correct)
  • CD34
  • CD20

La présence de plus de 5 % de blastes en périphérie indique une leucémie aiguë.

True (A)

Qu'est-ce que la FNS et à quoi sert-elle ?

La FNS, ou Formule Numération Sanguine, est un test de laboratoire qui permet d'évaluer les différents types de cellules sanguines, comme les globules blancs, les globules rouges et les plaquettes.

La présence de ______ dans la moelle osseuse peut indiquer une infiltration par des cellules malignes.

<p>lymphoblastes ou myéloblastes</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs aux cellules correspondantes :

<p>CD34 = Cellules souches CD138 = Plasmocytes CD19 et CD20 = Lymphocytes B matures CD38 (avec CD138) = Plasmocytes</p> Signup and view all the answers

Quels marqueurs sont toujours constants dans les lymphocytes T ?

<p>Toutes les réponses ci-dessus (B)</p> Signup and view all the answers

La classification FAB (French-American-British) de la leucémie aiguë myéloïde (LAM) se base principalement sur l'analyse moléculaire.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la principale différence entre la LAM1 et la LAM2 ?

<p>Le pourcentage de cellules et certains antigènes en cytométrie.</p> Signup and view all the answers

La LAM0 est caractérisée par la présence de marqueurs ______, ce qui la distingue des LAL.

<p>myéloïdes</p> Signup and view all the answers

Faites correspondre les types de leucémie avec leurs caractéristiques principales :

<p>LAM0 = Différenciation minimale, marqueurs myéloïdes LAL2 = Leucémie aiguë lymphoblastique commune, marqueurs CD19+, CD20+ LAM1 et LAM2 = Différence basée sur le pourcentage de cellules et les antigènes en cytométrie</p> Signup and view all the answers

Quel type d'information sur les cellules est fournie par le "forward scatter" ?

<p>Le nombre et la taille des cellules (D)</p> Signup and view all the answers

Le side scatter est utilisé pour déterminer la taille des cellules.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Quel type de cellules est décrit comme ressemblant à un "sac à billes" à cause de ses grosses granulations orangées ?

<p>Éosinophiles</p> Signup and view all the answers

La cytométrie en flux à 8 couleurs permet de détecter simultanément ______ antigènes à la surface des cellules.

<p>8</p> Signup and view all the answers

Associez les détecteurs de la cytométrie en flux avec les informations cellulaires qu'ils mesurent :

<p>Détecteur 1 = Forward scatter Détecteur 2 = Side scatter Détecteur 3 = Intensité de la fluorescence émise</p> Signup and view all the answers

Quelle(s) information(s) sur les cellules est(sont) obtenue(s) grâce à la cytométrie en flux ?

<p>Toutes les options ci-dessus (B)</p> Signup and view all the answers

La cytométrie en flux peut être utilisée pour analyser la composition de la formule sanguine.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Nommez deux types d'appareils utilisant le FSC et le SSC dans leur fonctionnement.

<p>Cytomètre en flux et compteur cellulaire</p> Signup and view all the answers

Quelle est la caractéristique de la LAM 3 en termes d'expression du CD34 ?

<p>Le CD34 n'est pas exprimé. (C)</p> Signup and view all the answers

Le CD 11c est exprimé dans toutes les LAM.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Quels sont les deux types de LAM qui n'expriment pas la MPO ?

<p>LAM 0 et LAM 7</p> Signup and view all the answers

Les cellules LAM 3 ressemblent fortement aux ______.

<p>promyélocytes</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs d'immunophénotypage aux LAM correspondantes :

<p>CD 11c = LAM 4 CD 34 = LAM 2 CD 61 = LAM 7 HLA DR = LAM 3 CD 65 = LAM 1</p> Signup and view all the answers

Quel marqueur est exprimé de manière significative dans les LAM 6 et 7 ?

<p>CD 36 (B)</p> Signup and view all the answers

L'expression du CD 33 est constante dans tous les types de LAM.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Pourquoi l'analyse d'immunophénotypage est-elle utile dans le diagnostic des LAM ?

<p>L'immunophénotypage permet de différencier les différents types de LAM en fonction de l'expression des marqueurs spécifiques sur les cellules, ce qui aide à déterminer le type de LAM et le type de traitement adapté.</p> Signup and view all the answers

Quels sont les marqueurs utilisés pour différencier les lymphocytes normaux des lymphocytes anormaux dans le sang périphérique et les ganglions lymphatiques ?

<p>Toutes les réponses ci-dessus (D)</p> Signup and view all the answers

La présence de lymphocytes B monoclonaux suggère un lymphome.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle des marqueurs CD3c, CD7, TDT, CD2, CD5 et CD1a dans l'identification des lymphocytes T ?

<p>Ces marqueurs indiquent la présence de lymphocytes T immatures, car ils sont généralement exprimés dans le thymus et la moelle osseuse.</p> Signup and view all the answers

La présence de lymphocytes T matures, c'est-à-dire ceux qui expriment les marqueurs CD4+ et CD8+, suggère plutôt un ______ suite à une infection.

<p>état réactionnel</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs aux types de lymphocytes :

<p>CD45RA = Lymphocytes T naïfs CD45RO = Lymphocytes T mémoires CD25 = Lymphocytes T activés</p> Signup and view all the answers

Le score de Matutes ou de Moreau est utilisé pour diagnostiquer la ______.

<p>leucémie lymphoïde chronique (LLC)</p> Signup and view all the answers

Quel est le principal avantage de la cytométrie en flux dans l'analyse des cellules lymphoïdes ?

<p>Elle permet d'analyser simultanément plusieurs marqueurs cellulaires. (D)</p> Signup and view all the answers

La morphologie cellulaire seule est suffisante pour diagnostiquer la LLC.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

La cytométrie en flux est une technique qui permet d'analyser les cellules en utilisant des anticorps monoclonaux couplés à des fluorochromes. Ces anticorps sont utilisés pour identifier :

<p>Les antigènes présents à la surface ou dans le cytoplasme des cellules. (D)</p> Signup and view all the answers

La cytométrie en flux permet de distinguer les cellules immatures des cellules matures en fonction des marqueurs présents à leur surface.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce que le FSC (Forward Scatter) en cytométrie en flux ?

<p>Le FSC est une mesure de la taille des cellules. Il est mesuré en fonction de la lumière diffusée en avant lorsque le faisceau laser traverse la cellule.</p> Signup and view all the answers

Le __________ est une mesure de la complexité interne des cellules.

<p>SSC (Side Scatter)</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs cellulaires aux groupes de cellules qu'ils identifient :

<p>CD4 = Lymphocytes T auxiliaires CD8 = Lymphocytes T cytotoxiques CD20 = Lymphocytes B CD34 = Cellules souches hématopoïétiques</p> Signup and view all the answers

Dans quel cas la cytométrie en flux est-elle particulièrement utile ?

<p>Pour identifier les cellules morphologiquement semblables. (C)</p> Signup and view all the answers

Un cytomètre en flux peut analyser jusqu'à 100 000 cellules en deux minutes.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Expliquez brièvement le principe du centrage hydrodynamique en cytométrie en flux.

<p>Le centrage hydrodynamique est un processus qui permet d'aligner les cellules en un flux liquide en les forçant à traverser un orifice étroit. Cela permet d'assurer que les cellules passent une à une devant le faisceau laser pour une analyse précise.</p> Signup and view all the answers

Quel type de cellules est caractérisé par une apparence de "poils" sur son cytoplasme ?

<p>Tricholeucocyte (B)</p> Signup and view all the answers

La cytométrie en flux permet de classer les cellules en fonction de leur taille et de leur complexité interne.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Quelle mutation génétique a été identifiée dans le cas de la leucémie aiguë myéloïde mentionnée dans le texte ?

<p>Mutation de la nucléophosmine NPM1</p> Signup and view all the answers

Le diagnostique de la leucémie lymphoïde chronique (LLC) se fait en couplant l'analyse microscopique à la ______ en flux.

<p>cytométrie</p> Signup and view all the answers

Quel est le marqueur utilisé pour identifier les plasmocytes ?

<p>CD138 (A)</p> Signup and view all the answers

La formule numération sanguine (FNS) est un outil qui permet de déterminer le pourcentage de chaque type de cellule sanguine.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Si un patient a 10 000 globules blancs et que 15% de ces globules blancs sont des neutrophiles, combien de neutrophiles possède-t-il ?

<p>1 500</p> Signup and view all the answers

La présence de plus de ______ % de blastes dans la moelle osseuse est un signe de leucémie aiguë.

<p>20</p> Signup and view all the answers

Faites correspondre les marqueurs cellulaires avec leurs caractéristiques :

<p>CD34 = Marqueur de cellules souches CD138 = Marqueur de plasmocytes CD19 et CD20 = Marqueurs de lymphocytes B CD3c, CD7, TDT, CD2, CD5 et CD1a = Marqueurs de lymphocytes T</p> Signup and view all the answers

Quelle(s) cellule(s) est/sont présente(s) dans la lignée lymphoïde B ?

<p>Hématogones (B)</p> Signup and view all the answers

La classification moléculaire des leucémies est en train de remplacer la classification FAB traditionnelle.

<p>True (A)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle du CD38 dans l'identification des plasmocytes ?

<p>Le CD38 seul n'est pas très utile pour identifier les plasmocytes, mais en combinaison avec le CD138, il devient un marqueur très spécifique.</p> Signup and view all the answers

Les marqueurs CD10, CD38 et kappa/lambda aident à classer les cellules dans le sang périphérique et les ganglions, permettant de distinguer une prolifération de lymphocytes ______ des lymphocytes normaux.

<p>anormaux</p> Signup and view all the answers

La présence de lymphocytes B monoclonaux est toujours un signe d'une leucémie aiguë.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs aux cellules lymphoïdes correspondantes:

<p>CD3c = Lymphocytes T immatures dans le thymus et la moelle CD4+ = Lymphocytes T matures CD8+ = Lymphocytes T matures CD25+ = Lymphocytes T activés</p> Signup and view all the answers

Quel(s) marqueur(s) est(sont) utilisé(s) pour identifier les lymphocytes T matures en périphérie ?

<p>CD3s (D)</p> Signup and view all the answers

Pourquoi le score de Matutes est-il utilisé pour diagnostiquer la LLC ?

<p>Le score de Matutes permet de différencier la LLC des lymphomes, car certains lymphomes présentent des caractéristiques morphologiques similaires à la LLC.</p> Signup and view all the answers

La morphologie des cellules lymphoïdes seule est suffisante pour diagnostiquer la LLC.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Les lymphocytes T naïfs et les lymphocytes T mémoires sont différenciés par l'utilisation des marqueurs ______ et ______.

<p>CD45RA, CD45RO</p> Signup and view all the answers

La présence de lymphocytes T matures (CD4+ et CD8+) suggère plutôt :

<p>Un état réactionnel suite à une infection (C)</p> Signup and view all the answers

Quels sont les marqueurs qui caractérisent les lymphocytes T ?

<p>CD3+ et CD4+ (C)</p> Signup and view all the answers

La classification FAB de la leucémie aiguë myéloïde (LAM) se base sur l'analyse moléculaire.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Quels marqueurs indiquent l'immaturité des cellules leucémiques ?

<p>CD34+, TDT+</p> Signup and view all the answers

Le marqueur CD34 est absent dans toutes les LAM.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs d'immunophénotypage aux cellules correspondantes :

<p>CD19+ et CD20+ = Lymphocytes B CD3+ et CD4+ = Lymphocytes T auxiliaires CD3+ et CD8+ = Lymphocytes T cytotoxiques CD34+ = Cellules immatures</p> Signup and view all the answers

Associez les marqueurs d'immunophénotypage aux LAM qui les expriment :

<p>MPO = LAM0, LAM1, LAM2, LAM3, LAM4, LAM5 CD13 = LAM0, LAM1, LAM2, LAM3, LAM4 CD14 = LAM5, LAM6 CD34 = LAM0, LAM1, LAM2, LAM4, LAM5, LAM6, LAM7 CD61 = LAM7 CD65 = LAM1, LAM2, LAM3, LAM4, LAM5, LAM6, LAM7 CD71 = LAM6, LAM7</p> Signup and view all the answers

Le marqueur CD79b est retrouvé uniquement dans les cellules normales.

<p>False (B)</p> Signup and view all the answers

La présence de marqueurs CD38+ et CD138+, associés à une clonalité, suggère un ______.

<p>myélome</p> Signup and view all the answers

Pourquoi est-ce que le marqueur CD33 est exprimé sur un grand nombre de sous-types de LAM ?

<p>Le CD33 est un marqueur des cellules myéloïdes qui sont les précurseurs de plusieurs types de cellules sanguines. Il est donc exprimé sur un large éventail de sous-types de LAM qui dérivent de ces précurseurs.</p> Signup and view all the answers

Associez les fluorochromes aux marqueurs correspondants pour l'analyse de la LAM :

<p>FITC = CD33 PE = CD117</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Cytométrie en flux

Technique d'analyse cellulaire à haut débit utilisant un flux liquide.

FSC

Forward Scatter, mesure de la taille des cellules en cytométrie.

SSC

Side Scatter, mesure de la granularité et de la complexité des cellules.

Anticorps monoclonaux

Anticorps spécifiques utilisés pour cibler des antigènes cellulaires.

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Analyse des cellules immatures

Utilise des marqueurs pour identifier la maturité des cellules.

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Marqueurs CD

Protéines de surface utilisées pour identifier les types de cellules.

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Centrage hydrodynamique

Alignement des cellules dans un flux avant analyse.

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Vitesse d'analyse

La cytométrie en flux peut analyser jusqu'à 100 000 cellules en 2 minutes.

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Forward Scatter (FSC)

Mesure la taille et le nombre des cellules via la réflexion de la lumière.

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Side Scatter (SSC)

Indique la complexité et la granularité des cellules à travers la diffusion de lumière.

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Fluorescence Intensity (FI)

Mesure l’intensité de la lumière émise par les fluorochromes liés aux cellules.

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8 couleurs

Permet de détecter simultanément 8 antigènes sur les cellules.

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Antigènes

Substances pouvant déclencher une réponse immunitaire.

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Compteurs cellulaires

Appareils mesurant le nombre de cellules en utilisant FSC et SSC.

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Cellules atypiques

Cellules dont les caractéristiques ne sont pas normales, souvent étudiées pour diagnostiquer des maladies.

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Marqueurs lymphocytaires

CD10, CD38 et autres indiquent la nature des lymphocytes.

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Lymphocytes B monoclonaux

Indiquent une possible présence de lymphome.

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Lignée lymphoïde T

Lymphocytes T avec marqueurs CD3c+, CD7+, TDT+, etc.

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Lymphocytes T matures

CD4+ et CD8+, impliqués dans les réponses immunitaires.

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Score de Matutes

Permet de différencier LLC et lymphomes selon un score.

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LLC (Leucémie Lymphoïde Chronique)

Diagnostic probable avec >4000 lymphocytes/mm3.

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CD45RA vs CD45RO

Distingue lymphocytes T naïfs des T mémoires/activés.

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Morphologie des lymphomes

L'aspect des cellules peut être trompeur pour le diagnostic.

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Tri cellulaire

Technique pour séparer des cellules spécifiques via anticorps et billes magnétiques.

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CD138

Marqueur typique des plasmocytes utilisé pour le tri cellulaire.

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Dosage cellulaire

Mesure du nombre de cellules dans un échantillon par comptage.

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Neutropénie

Condition où le nombre de neutrophiles est inférieur à la normale.

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LAL

Leucémie aiguë lymphoblastique, classifiée en différents types selon les marqueurs.

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CD34, TDT, CD45

Marqueurs pour identifier les cellules immatures B dans la moelle osseuse.

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Ponc­tion sternale

Procedure pour évaluer la moelle osseuse, vérifiant infusion de blastes.

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Classification FAB

Système de classification des leucémies basé sur l'examen microscopique.

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Classification OMS

Classification plus complexe prenant en compte l'aspect moléculaire des leucémies.

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Différence LAM1 et LAM2

La différence réside dans le pourcentage et les antigènes des cellules.

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Marqueurs myéloïdes

CD34+, CD117+, CD13+, CD33+ définissent les cellules myéloïdes.

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Classification des Ag

Les Ag à la surface sont classés en TI, TII, TIII, TIV et BI, BII, BIII, BIV pour les LAL-B.

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Immunophénotypage des LAM

Analyse des marquages de surface des cellules leucémiques dans les différentes sous-types LAM.

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Marqueur MPO

Indicateur utilisé pour identifier LAM, présent dans LAM1, LAM2, LAM3, et LAM4.

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HLA DR

Antigène exprimé dans plusieurs types LAM, excepté LAM4.

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CD65

Marqueur qui reste fortement exprimé dans plusieurs LAM.

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Panel d'anticorps

Combinaison de marqueurs utilisée pour diagnostiquer des leucémies, comme la LLC.

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Study Notes

Cytométrie en flux et diagnostic en hématologie

  • La cytométrie en flux est une technique d'analyse cellulaire à haut débit qui utilise un faisceau laser pour analyser les cellules.
  • Les cellules sont suspendues dans un liquide et passent à travers un faisceau laser. Les propriétés physiques des cellules, telles que la taille et la granulation, sont détectées.
  • Des anticorps monoclonaux couplés à des fluorochromes sont utilisés pour identifier les antigènes présents à la surface ou dans le cytoplasme des cellules.
  • L'identification des cellules immatures (et matures) est possible grâce aux marqueurs.
  • La discrimination entre les cellules morphologiquement similaires permet de déterminer à quelle lignée appartiennent les cellules.
  • La cytométrie en flux permet des analyses rapides de 100 000 cellules en deux minutes, utilisant des lasers pour mesurer la taille, la complexité et la fluorescence des cellules.
  • La cytométrie en flux permet d'analyser les antigènes présents à la surface ou dans le cytoplasme des cellules.
  • Les marqueurs spécifiques permettent de faire des diagnostics rapides.

### Informations cellulaires obtenues

  • Taille relative (FSC) : Détermine la taille et le nombre des cellules.
  • Granularité relative (SSC) : Donne des informations sur la complexité et la granularité des cellules.
  • Intensité de la fluorescence émise (FI) : Détermine l'intensité de la fluorescence émise par les cellules après l'exposition à un fluorochrome.

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