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Questions and Answers
¿Cuál de los siguientes tipos de contaminación no provoca variación del pH del medio de cultivo?
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¿Qué tipo de microorganismo es difícil de detectar a través del microscopio óptico pero se puede identificar por sus efectos en las células?
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¿Cuál de los siguientes métodos se utiliza para detectar micoplasmas en cultivos celulares?
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¿Qué tipo de contaminación se refiere a la presencia de microorganismos eucariotas no deseados en cultivos celulares?
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¿Cuál de las siguientes afirmaciones sobre los bacterias es correcta?
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¿Cuál es la fase del crecimiento celular en la que las células no presentan crecimiento y la cantidad de células es constante o disminuye ligeramente?
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¿Qué caracterización es correcta sobre los cultivos en monocapa?
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En qué fase del crecimiento celular ocurre un aumento exponencial del número de células?
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¿Cuál es la función principal de un medio de cultivo en un cultivo celular?
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La inhibición por densidad ocurre cuando:
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Los cultivos tridimensionales permiten que las células:
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¿Cuál de los siguientes no es un tipo de cultivo celular?
¿Cuál de los siguientes no es un tipo de cultivo celular?
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¿Qué ocurre durante el periodo de adaptación al medio de cultivo?
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Quina és la proporció habitual de passa d'un cultiu en monocapa a plaques?
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Quina condició és important per al cultiu de cèl·lules en monocapa?
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Quin material s'utilitza per eliminar ions Ca2+ que estabilitzen les interaccions substrat-cèl·lula?
Quin material s'utilitza per eliminar ions Ca2+ que estabilitzen les interaccions substrat-cèl·lula?
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Quina és la temperatura adequada d'incubació per a la majoria dels cultius cel·lulars?
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Quin pas es realitza després de centrifugar les cèl·lules en monocapa?
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En els cultius en suspensió, com es determina la densitat cel·lular adequada?
En els cultius en suspensió, com es determina la densitat cel·lular adequada?
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Quin tipus de recipients es poden utilitzar per al cultiu cel·lular?
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Quina és la funció de la tripsina durant el subcultiu?
Quina és la funció de la tripsina durant el subcultiu?
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Study Notes
Cultivos Celulares
- Un cultivo celular es un proceso que permite mantener células de un organismo pluricelular in vitro.
- Se usa un medio de cultivo artificial y se mantienen las condiciones controladas.
- Los cultivos celulares se comenzaron a realizar rutinariamente en los años 50, principalmente para estudiar virus.
Curva de Crecimiento Celular
- Se refiere a la concentración de células por día en el cultivo.
- Existen tres fases:
- Fase de latencia (primeras 24 horas): tramo recto con ligera concavidad; no hay crecimiento, y el número de células es constante o decrece ligeramente.
- Fase exponencial (7-8 días): tramo recto con pendiente elevada; aumento exponencial del número de células.
- Fase estacionaria (>7-8 días): tramo recto sin pendiente; número de células constante.
Tipos de Cultivos Celulares
-
Según el nivel de organización celular, existen:
- Cultivos de órganos: se mantiene un órgano o parte de él en un medio artificial con atmósfera controlada. El cultivo no se puede propagar y no desarrolla un órgano completo, pero mantiene las relaciones entre los tejidos.
- Cultivos de explantes: se mantiene un fragmento de tejido en un cultivo monocapa nutrido con un medio artificial. Las células periféricas del cultivo pueden multiplicarse y propagarse, pero el órgano completo no.
- Cultivos de células: se realiza a partir de una suspensión de células incubadas en un medio de cultivo.
-
Otros tipos de clasificación de cultivos celulares incluyen:
- Cultivo en suspensión: las células no se adhieren a ninguna superficie y crecen dispersas en el medio de cultivo.
- Cultivo en monocapa: las células crecen sobre una superficie, generalmente en el fondo de una placa de Petri.
- Cultivo tridimensional: las células interactúan en las tres dimensiones del espacio, similar a un órgano vivo.
Cultivo en Suspensión
- Se caracteriza por células dispersas en el medio de cultivo, proliferando.
- Típico de células sanguíneas, células hematopoyéticas, células madre y algunas líneas tumorales.
- Tres etapas:
- Adaptación al medio de cultivo
- Proliferación en suspensión
- Inhibición por densidad
Cultivo en Monocapa
- Las células crecen adheridas a una superficie sólida (plástico o vidrio).
- Dependientes del anclaje.
- Tres etapas:
- Adhesión a la superficie
- Proliferación y formación de colonias
- Inhibición por contacto
Tipos de Líneas Celulares
- Línea celular primaria: se extrae de un animal o órgano; proliferan hasta un número determinado de pasos y alcanzan la senescencia (dejan de proliferar). Se pueden congelar para conservación.
- Línea celular continua: células inmortales que pueden proliferar indefinidamente. Se obtienen a partir de tumores o se inmortalizan de forma espontánea o inducida en líneas celulares primarias.
Cultivo Celular y Diagnóstico
- Usado para buscar anomalías genéticas en el feto, extraída una muestra de líquido amniótico.
- Cultivo celular del líquido amniótico: permite estudiar las células del feto sin una biopsia.
- Vellosidades coriónicas: muestra de la placenta que permite diagnosticar enfermedades genéticas fetales.
- Cariotipos: cultivos celulares para estudiar los cromosomas de sangre .
Factores que Intervienen en un Cultivo
- Extraer las células del tejido.
- Colocar las células en un recipiente adecuado.
- Colocar el recipiente en un incubador que proporciona las condiciones ambientales adecuadas.
- Factores a controlar:
- El soporte físico para el crecimiento celular.
- La composición química y propiedades fisioquímicas del medio de cultivo.
- La composición atmosférica.
- Las condiciones de incubación.
- Tipos de recipientes:
- Placas multipocillo
- Placas de Petri
- Frascos o ampollas Roux
Medios de Cultivo
- Soluciones nutritivas que reemplazan el medio natural de las células.
- Composición:
- Sales minerales (NaCl, KCl, CaCl, MgCl, fosfatos, bicarbonato de sodio)
- Tampón (Ej: bicarbonato, HEPES): para regular el pH.
- Glucosa: Fuente de energía.
- Aminoácidos: Necesarios para la síntesis proteica.
- Vitaminas: para el crecimiento y metabolismo.
Condicione de Incubación
- Temperatura: óptima para el crecimiento celular (ej. 37°C para células de mamíferos).
- Humedad: para evitar cambios en el medio de cultivo.
- Gases: atmósfera apropiada (ej. 5% CO2).
Contaminación de Cultivos
- Bacterias, hongos.
- Micoplasmas (pequeños organismos sin pared celular) y otros agentes.
Viabilidad Celular
- Determinación del porcentaje de células vivas en un cultivo.
- Usando el colorante azul de tripán: atraviesa membranas de células muertas pero no de células vivas. Las células vivas se observan incoloras y las muertas, azules.
Congelación de Cultivos
- Se utilizan crioprotectores (DMSO o glicerol) para prevenir daños en las células durante la congelación.
- Se almacenan a -20 °C por 24 horas, después a -80°C por mínimo 24 horas, y luego en nitrógeno líquido a largo plazo.
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Description
Este cuestionario explora el proceso de cultivos celulares, sus fases de crecimiento y los tipos de cultivos. Aprende sobre la importancia de estas técnicas en la investigación biológica y su evolución desde los años 50. ¡Pon a prueba tus conocimientos sobre este tema fascinante!
