Citometría de Flujo: Preguntas Clave

<p>Yoduro de propidio. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>4n. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>4n. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Reduce a 2n. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Dispersión lateral (SSC). (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La síntesis de ciclina E (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Lo marca para ser degradado (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Complejos Cdk/ciclina (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Complejo de pre-replicación (C)</p> Signup and view all the answers

<p>S, G2 y M (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Mantener elevados los niveles de ciclina (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Mediante la activación de Cdk2/ciclina E (D)</p> Signup and view all the answers

<p>La presencia de miles de orígenes de replicación (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Organizan los cromosomas eucariotas. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Las cromátidas hermanas se separan y van a polos opuestos. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Regula la transición a la fase M. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Cinasas tipo Polo. (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Chk1 y Chk2 (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Creación de dos células hijas. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Estabiliza p53 y aumenta sus niveles (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Se descondensan. (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Cdk2/ciclina E (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Los cinetócoros. (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Retroalimentación positiva. (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Fases G1, S y G2 (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Profase, metafase, anafase, telofase (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Los centrosomas se desplazan a lados opuestos (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Inhibir Cdc25 (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Cdk1 (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Mantener la unión entre cromátidas hermanas (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Son fosforiladas para permitir la condensación de la cromatina (C)</p> Signup and view all the answers

<p>Se fosforila y se disocia en dímeros libres de laminina (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Se fragmenta en pequeñas vesículas (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Fosforila múltiples proteínas de la matriz del aparato de Golgi (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Se duplican y se alargan (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Gamma-tubulina y otras proteínas necesarias (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La lámina nuclear (D)</p> Signup and view all the answers

<p>Cinasas Aurora A y tipo Polo (B)</p> Signup and view all the answers

<p>Activar la separasa (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Se inhibe la APC/C (B)</p> Signup and view all the answers

<p>La inactivación de Cdk1 (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Desencadenar la degradación de cinasas (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Unión de microtúbulos a los cinetócoros (C)</p> Signup and view all the answers

<p>La inactivación de Cdk1 (A)</p> Signup and view all the answers

<p>Inactivación de Cdk1 (A)</p> Signup and view all the answers

Técnica que utiliza un rayo láser para analizar células individuales en suspensión, permitiendo identificar, cuantificar y analizar las células individuales según diferentes características.

Un citómetro de flujo tiene tres componentes principales: un sistema fluídico para el transporte de muestras, un sistema óptico de iluminación con láser y un detector electrónico que convierte la luz en señal digital.

Las células pasan una por una a través de un capilar delgado, donde un rayo láser las ilumina.

La dispersión frontal (FSC) se relaciona con el tamaño de la célula. Cuanto mayor es la FSC, mayor es el tamaño celular.

La dispersión lateral u ortogonal (SSC) indica la complejidad interna de la célula. Células granulares o complejas tendrán un mayor SSC.

Los fluorocromos son sustancias fluorescentes que se usan para marcar las células. Permite identificar y cuantificar poblaciones celulares específicas.

El yoduro de propidio es un fluorocromo que absorbe luz a 540-580 nm y emite luz a 600-660 nm, permitiendo distinguir células en diferentes etapas del ciclo celular.

Las células en G1 son diploides (2n), en la fase S se duplica el ADN (4n) y en G2 y M se mantiene 4n, volviendo a 2n tras la citocinesis.

La entrada a la fase S implica la activación del complejo Cdk2/ciclina E que, a su vez, activa la síntesis de ADN en los orígenes de replicación. Estos orígenes están compuestos por el complejo ORC (complejo de reconocimiento del origen).

Las células de mamíferos utilizan miles de orígenes para replicar su ADN. Cada uno de estos orígenes debe ser cuidadosamente controlado para garantizar que cada segmento del genoma se copie solo una vez durante la fase S.

Las proteínas MCM helicasa son las encargadas de desenrollar la doble hélice de ADN para que la replicación pueda comenzar. Son reguladas por los complejos Cdk/ciclina en diferentes etapas del ciclo celular.

El complejo de pre-replicación se forma cuando las proteínas MCM helicasa se unen al complejo ORC. Este complejo está presente en la fase G1, pero solo comienza la replicación en la fase S.

Las Cdk2/ciclina E, junto con la proteína quinasa DDK, activan las proteínas MCM helicasa en la fase S. Esto inicia la replicación del ADN.

Después de la activación, las proteínas MCM se alejan del origen de replicación con la horquilla de replicación, lo que significa que el proceso de replicación ha comenzado.

La alta actividad de las Cdks durante las fases S, G2 y M impide que las proteínas MCM vuelvan a asociarse a los ORC. Esto garantiza que la replicación del ADN solo ocurra una vez por ciclo celular.

Los complejos de pre-replicación solo pueden volver a formarse durante la fase G1, lo que permite que la replicación se prepare para el próximo ciclo celular.

Las proteínas quinasas ATR y ATM se activan al detectar daño en el ADN, lo que desencadena una cascada de eventos que lleva a la detención del ciclo celular.

Las proteínas quinasas ATR y ATM fosforilan y activan a Chk1 y Chk2, respectivamente.

Chk1 y Chk2 inhiben la actividad de la proteína fosfatasa Cdc25, que es necesaria para la activación de Cdk1 y Cdk2.

La fosforilación de p53 por parte de ATM y Chk2 aumenta su estabilidad, lo que eleva sus niveles y permite una respuesta más rápida al daño del ADN.

p53 activa la transcripción del inhibidor de Cdk p21, que se une a los complejos de Cdk2/ciclina E o ciclina A, inhibiéndolos y deteniendo el ciclo celular.

La mitosis se divide en cuatro etapas: profase, metafase, anafase y telofase.

La profase se caracteriza por la condensación de los cromosomas, el desplazamiento de los centrosomas y el inicio de la formación del huso mitótico.

El huso mitótico es una estructura de microtúbulos que se forma en la mitosis y la meiosis, y juega un papel clave en la separación de los cromosomas.

La prometafase es la etapa de la mitosis en la que la envuelta nuclear se rompe, permitiendo que los microtúbulos del huso se unan a los cinetocoros de los cromosomas.

Durante la metafase, los cromosomas se alinean en el centro del huso mitótico, entre los dos polos celulares.

En anafase, las cromátidas hermanas se separan y migran hacia los polos opuestos de la célula.

La telofase es la última fase de la mitosis donde las membranas nucleares se reconstituyen y los cromosomas se descondensan, dando lugar a dos células hijas.

El complejo Cdk1/ciclina B es el principal regulador de la entrada a la fase M de la mitosis, activando otras proteínas quinasa y fosforilando proteínas estructurales involucradas en la reorganización celular.

Las cinasas Aurora y las tipo Polo son proteínas quinasas activadas por el complejo Cdk1/ciclina B que juegan un papel crucial en la mitosis.

Las cohesinas mantienen unidas las cromátidas hermanas durante la replicación del ADN, mientras que las condensinas ayudan a compactar los cromosomas durante la mitosis.

Estas proteínas son parte de la familia SMC (structural maintenance of chromosomes) y juegan un papel crucial en la organización de la cromatina eucariota.

Las cinasas Aurora A y tipo Polo, localizadas en los centrosomas, son las responsables de la maduración del centrosoma, la separación y el ensamblaje del huso.

Cuando la envuelta nuclear se rompe, algunos microtúbulos del huso se unen a los cinetócoros de los cromosomas, iniciando el movimiento cromosómico característico de la prometafase.

La cinasa Aurora B es una de las proteínas que se ensamblan en el cinetocoro, una estructura que se encuentra en los cromosomas.

La activación de la APC/C (complejo promotor de la anafase o ciclosoma) es crucial para la progresión hacia la anafase.

La ausencia de unión de los cromosomas al huso activa el complejo del punto de control mitótico (MCC) que, a su vez, inhibe al APC/C.

La degradación de la ciclina B por el APC/C, desencadena la inactivación de Cdk1, una enzima clave en la regulación del ciclo celular.

La separasa, activada por la degradación de la securina, separa las cromátidas hermanas, llevando a la anafase.

La citocinesis, la división del citoplasma, se produce durante la anafase tardía debido a la inactivación de Cdk1 y la contracción de un anillo de actina y miosina.

Las cohesinas son proteínas que se unen al ADN durante la fase S del ciclo celular y mantienen unidos los cromosomas hermanos después de la replicación del ADN. Su rol es esencial para asegurar la correcta segregación de cromosomas durante la mitosis.

Las condensinas son proteínas que se encargan de condensar la cromatina en la mitosis, permitiendo que los cromosomas se compacten y se separen correctamente. En la fase M, las condensinas reemplazan a las cohesinas, excepto en el centrómero.

La fosforilación de las láminas nucleares por la Cdk1/ciclina B hace que los filamentos que forman la lámina nuclear se separen en dímeros libres de laminina. Este proceso es crucial para la degradación de la envoltura nuclear durante la mitosis.

Las proteínas integrales de la membrana nuclear son absorbidas por el retículo endoplásmico, lo que permite que este se mantenga intacto y se distribuya a las células hijas durante la mitosis.

El aparato de Golgi se fragmenta en pequeñas vesículas durante la mitosis, las cuales pueden ser absorbidas por el retículo endoplásmico o distribuirse directamente a las células hijas. La Cdk1 y las cinasas tipo Polo promueven este proceso.

Los centrosomas, duplicados en la fase S, se separan y se desplazan a los polos del núcleo. antes de la separación, los centrosomas se alargan y reclutan proteínas esenciales para la formación del huso mitótico, que controla la separación de los cromosomas durante la división.

La Cdk1/ciclina B, además de fosforilar las láminas nucleares, también fosforila las proteínas de los poros nucleares y de la membrana nuclear interna. Esta fosforilación contribuye a la degradación de la envoltura nuclear durante la mitosis.

Las cinasas tipo Polo juegan un papel importante en la regulación de la mitosis. Trabajan en conjunto con la Cdk1/ciclina B para orquestar la descomposición del aparato de Golgi en vesículas durante la división celular.