Biología Molecular: Separación de hebras de DNA
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Questions and Answers

¿Cuál es el proceso que ocurre cuando se separan las hebras de una doble hélice de DNA?

Desnaturalización del DNA

¿Por qué se puede inducir la separación de las hebras de DNA de manera experimental?

Debido a que las hebras se mantienen unidas por enlaces no covalentes relativamente débiles

¿Cuál es el proceso inverso de la desnaturalización del DNA?

Renaturalización del DNA

¿Cómo se puede desnaturalizar DNA en el laboratorio?

<p>Aumentando la temperatura</p> Signup and view all the answers

¿Por qué el proceso de fusión del DNA es fácil de monitorizar?

<p>Porque el DNA de doble cadena y el DNA de cadena sencilla difieren en sus propiedades de absorción de luz</p> Signup and view all the answers

¿Qué sucede con la absorbancia a 260 nm cuando se aumenta la temperatura de una solución de DNA?

<p>Se mantiene constante hasta que la doble hélice comienza a fundirse en sus hebras componentes</p> Signup and view all the answers

¿Qué se denomina temperatura de fusión del DNA (Tm)?

<p>La temperatura a la cual se alcanza la mitad del cambio de absorbancia</p> Signup and view all the answers

¿Qué refleja el valor de la temperatura de fusión del DNA?

<p>La fuerza con la que se mantiene unida la doble hélice de DNA</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la diferencia en el número de puentes de hidrógeno que mantienen unidas a las parejas de bases GC y AT?

<p>La pareja de bases GC tiene tres puentes de hidrógeno, mientras que la pareja de bases AT tiene solo dos.</p> Signup and view all the answers

¿Cómo se relaciona la temperatura de fusión del DNA con el número relativo de pares de bases GC?

<p>La temperatura de fusión aumenta en proporción directa al número relativo de pares de bases GC.</p> Signup and view all the answers

¿Por qué la renaturalización del DNA desnaturalizado es posible?

<p>La renaturalización es posible porque se puede restablecer los puentes de hidrógeno entre las dos hebras del DNA disminuyendo la temperatura.</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la base de la hibridación de los ácidos nucleicos?

<p>La capacidad de las cadenas sencillas de unirse o hibridar con secuencias de bases complementarias.</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de interacciones se pueden estudiar mediante la hibridación de ácidos nucleicos?

<p>Interacciones entre DNA-DNA, DNA-RNA e incluso RNA-RNA.</p> Signup and view all the answers

¿Qué se utiliza como sonda en la hibridación DNA-DNA?

<p>Un fragmento radiactivo de DNA de cadena sencilla.</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el beneficio de cambiar la temperatura, la concentración de sales y el pH durante la hibridación?

<p>Permite el emparejamiento entre secuencias que presentan numerosas bases mal emparejadas.</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de información se puede obtener mediante la hibridación de ácidos nucleicos?

<p>Es posible identificar familias de genes relacionados en un tipo de organismo dado y entre diferentes tipos de organismos.</p> Signup and view all the answers

Study Notes

La doble hélice de DNA

  • Las dos hebras de la doble hélice de DNA se mantienen unidas por enlaces no covalentes débiles, lo que permite que se separen con facilidad bajo condiciones adecuadas.
  • La separación de las hebras se puede inducir experimentalmente, lo que se llama desnaturalización del DNA, y el proceso inverso se llama renaturalización del DNA.

Desnaturalización del DNA

  • Una forma de desnaturalizar DNA en el laboratorio es aumentando la temperatura.
  • Cuando la temperatura se aumenta lentamente, el DNA retiene su estado de doble hebra hasta que se alcanza una temperatura crítica, en ese punto la doble hebra se desnaturaliza rápidamente o se "funde" en sus hebras componentes.

Propiedades de absorción de luz

  • El DNA absorbe la luz ultravioleta, con un máximo de absorción de alrededor de 260 nm.
  • Cuando la temperatura de una solución de DNA se aumenta lentamente, la absorbancia a 260 nm se mantiene constante hasta que la doble hélice comienza a fundirse en sus hebras componentes.
  • A medida que las hebras se separan, la absorbancia de la solución aumenta rápidamente debido a la elevada absorción intrínseca del DNA de cadena sencilla.

Temperatura de fusión del DNA (Tm)

  • La temperatura de fusión del DNA es la temperatura a la cual se alcanza la mitad del cambio de absorbancia.
  • El valor de la temperatura de fusión refleja la fuerza con la que se mantiene unida la doble hélice de DNA.

Influencia de las pares de bases en la temperatura de fusión

  • La pareja de bases GC, que se mantienen unidas por tres puentes de hidrógeno, son más resistentes a la separación que la pareja de bases AT, que solo tienen dos puentes de hidrógeno.
  • La temperatura de fusión aumenta en proporción directa al número relativo de pares de bases GC en el DNA.

Renaturalización del DNA

  • El DNA desnaturalizado se puede renaturalizar disminuyendo la temperatura para permitir el restablecimiento de los puentes de hidrógeno entre las dos hebras.

Aplicaciones de la renaturalización del DNA

  • La capacidad de renaturalizar los ácidos nucleicos tiene una gran variedad de aplicaciones científicas, como la hibridación de los ácidos nucleicos, que se puede aplicar a interacciones entre DNA-DNA, DNA-RNA e incluso RNA-RNA.

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Description

Aprende cómo las dos hebras de la doble hélice de DNA se separan y vuelven a unirse por desnaturalización y renaturalización, respectivamente. Conoce el papel de la separación de hebras en la replicación del DNA y la síntesis de RNA.

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