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Questions and Answers
Com o objetivo de produzir uma proteína humana de interesse por tecnologia de DNA recombinante, em células procariotas:
Com o objetivo de produzir uma proteína humana de interesse por tecnologia de DNA recombinante, em células procariotas:
A figura ilustra o processo de clonagem de um mamífero. Caso se pretenda gerar um organismo transgénico que expresse a insulina humana nas células da glândula mamária para que possa ser utilizada para terapia enzimática de substituição, o gene da insulina a transfectar deverá ser associado a:
A figura ilustra o processo de clonagem de um mamífero. Caso se pretenda gerar um organismo transgénico que expresse a insulina humana nas células da glândula mamária para que possa ser utilizada para terapia enzimática de substituição, o gene da insulina a transfectar deverá ser associado a:
Com as técnicas hoje disponíveis, é possível sintetizar cromossomas artificiais em laboratório. Se de uma forma bem sucedida forem inseridos numa célula, esta será capaz de replicá-los se contiver:
Com as técnicas hoje disponíveis, é possível sintetizar cromossomas artificiais em laboratório. Se de uma forma bem sucedida forem inseridos numa célula, esta será capaz de replicá-los se contiver:
Relativamente à dupla cadeia de DNA, qual das seguintes afirmações é verdadeira?
Relativamente à dupla cadeia de DNA, qual das seguintes afirmações é verdadeira?
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Eukaryotic mRNA transcript requires processing prior to translation, while prokaryotic mRNA transcripts require no processing prior to translation.
Eukaryotic mRNA transcript requires processing prior to translation, while prokaryotic mRNA transcripts require no processing prior to translation.
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Na transcrição, a cadeia de RNA crescente permanece ligada ao DNA molde, por ligações por pontes de hidrogénio, até que uma enzima venha separá-las.
Na transcrição, a cadeia de RNA crescente permanece ligada ao DNA molde, por ligações por pontes de hidrogénio, até que uma enzima venha separá-las.
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A cadeia codificante é sempre a cadeia 5'-3'.
A cadeia codificante é sempre a cadeia 5'-3'.
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Em procariotas, a transcrição necessita de fatores de transcrição.
Em procariotas, a transcrição necessita de fatores de transcrição.
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As regiões da molécula de pré-mRNA dos eucariotas, codificadoras de proteínas, que se ligam para originar mRNA chamam-se exões.
As regiões da molécula de pré-mRNA dos eucariotas, codificadoras de proteínas, que se ligam para originar mRNA chamam-se exões.
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Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: é feito por enzimas endonucleases.
Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: é feito por enzimas endonucleases.
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Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: é a ultima etapa do processamento do mRNA e tem lugar no citoplasma.
Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: é a ultima etapa do processamento do mRNA e tem lugar no citoplasma.
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Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: é feito por RNAs com actividade catalítica snRNAs.
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Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: com este processo, diferentes mRNA pode gerar a mesma proteína.
Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: com este processo, diferentes mRNA pode gerar a mesma proteína.
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Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: o seu objectivo é aumentar a diversidade de proteínas sem ser necessário um maior número de genes.
Relativamente ao processo de splicing, assinale as afirmações verdadeiras: o seu objectivo é aumentar a diversidade de proteínas sem ser necessário um maior número de genes.
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Em eucariotas, a transcrição é feita apenas pela RNA polimerase II.
Em eucariotas, a transcrição é feita apenas pela RNA polimerase II.
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RNA polimerase cataliza ligações fosfo-diéster.
RNA polimerase cataliza ligações fosfo-diéster.
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RNA polimerase necessita de um primer para iniciar a transcrição.
RNA polimerase necessita de um primer para iniciar a transcrição.
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Na síntese proteica, o mRNA é traduzido no sentido _____ e a proteína sintetizada da extremidade _____ :
Na síntese proteica, o mRNA é traduzido no sentido _____ e a proteína sintetizada da extremidade _____ :
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Qual das seguintes afirmações é verdadeira?
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Qual das seguintes técnicas pode ser usada para a deteção de anomalias cromossómicas:
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Indique qual das seguintes afirmações NÃO se aplica ao conceito de imprinting.
Indique qual das seguintes afirmações NÃO se aplica ao conceito de imprinting.
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Qual das seguintes opções melhor explica o imprinting genómico?
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As doenças resultantes de variantes genéticas patogénicas em locus sujeitos a imprinting podem ter por base vários mecanismos. Qual destes NÃO é um mecanismo associado à expressão da doença?
As doenças resultantes de variantes genéticas patogénicas em locus sujeitos a imprinting podem ter por base vários mecanismos. Qual destes NÃO é um mecanismo associado à expressão da doença?
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Dois dos mecanismos que as células eucariotas utilizam para regular a transcrição são do DNA e das histonas.
Dois dos mecanismos que as células eucariotas utilizam para regular a transcrição são do DNA e das histonas.
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Nas mulheres, a lionização tem como resultado:
Nas mulheres, a lionização tem como resultado:
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A inativação do cromossoma X em mamíferos inicia-se no zigoto.
A inativação do cromossoma X em mamíferos inicia-se no zigoto.
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Em todas as células diploides com 2 cromossomas X normais há inativação de um destes.
Em todas as células diploides com 2 cromossomas X normais há inativação de um destes.
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Uma vez inativado o cromossoma X paterno ou materno, as células filhas mantém o padrão de inativação.
Uma vez inativado o cromossoma X paterno ou materno, as células filhas mantém o padrão de inativação.
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A inativação do cromossoma X ocorre por silenciamento epigenético, por ação do RNA XIST.
A inativação do cromossoma X ocorre por silenciamento epigenético, por ação do RNA XIST.
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No cromossoma X inativo são encontradas modificações de histonas típicas de heterocromatina.
No cromossoma X inativo são encontradas modificações de histonas típicas de heterocromatina.
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O padrão de inativação é aleatório mas, uma vez definido, é fixo nas células-filhas.
O padrão de inativação é aleatório mas, uma vez definido, é fixo nas células-filhas.
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Considere a seguinte representação de um gene e vários mRNAs. Qual a afirmação verdadeira?
Considere a seguinte representação de um gene e vários mRNAs. Qual a afirmação verdadeira?
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A figura representa os vários níveis de controlo da expressão génica numa célula eucariota. O mecanismo assinalado com “X” diz respeito ao controlo de(a):
A figura representa os vários níveis de controlo da expressão génica numa célula eucariota. O mecanismo assinalado com “X” diz respeito ao controlo de(a):
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Na regulação da expressão do operão da biossíntese do triptofano, em procariotas:
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Qual dos seguintes exemplos ilustra o processo de transdiferenciação ou reprogramação direta?
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Study Notes
DNA Recombinante em Células Procariotas
- Para produzir uma proteína humana, utiliza-se enzimas de restrição para isolar o gene de interesse a partir de células humanas, mantendo o promotor original.
- Isolam-se o mRNA que codifica o gene e retrotranscreve-se o cDNA por RT-PCR
- A proteína de interesse é, então, transfectada em células procariotas para ser replicado.
Clonagem de Mamíferos e Transfecção
- Para um organismo transgénico que expresse insulina humana, o gene da insulina deve ser associado a um promotor de uma proteína do leite bovino.
Cromossomas Artificiais
- Um cromossoma artificial pode ser replicado se contiver: Origem de replicação, Telómeros e Centrómero e Histonas.
- Cromossomas sexuais não são um componente necessário.
Estrutura do DNA
- As fitas duplas de DNA têm orientação antiparalela.
- As bases azotadas estão orientadas para o interior do DNA.
- As ligações entre duas cadeias de DNA são por pontes de hidrogénio, não covalentes.
- A complementaridade das cadeias é estabelecida pelos pares de bases.
Transcrição
- O mRNA eucariótico precisa de processamento antes da tradução, enquanto o procariótico não.
- A cadeia de RNA cresce ligada ao DNA molde por pontes de hidrogénio, até ser separada por uma enzima.
- A cadeia codificante é a cadeia 5´-3´.
- A transcrição nos procariotas necessita de fatores de transcrição.
- A RNA polimerase catalisa ligações fosfodiéster, mas não necessita de um primer para iniciar a transcrição.
- RNA polimerase em eucariotas é RNA pol II
Tradução de mRNA
- O mRNA é traduzido de 5'-3', com a síntese de proteína ocorrendo da extremidade amino para carboxílica.
Reparação por Descasamento
- O sistema de reparação por descasamento diminui a taxa de erros de replicação.
- O sistema de reparação por descasamento diminui a taxa de erro de replicação em 100 vezes.
Mutação
- A desaminação de citosina em TCAT pode levar a mutações.
- Após réplicas sucessivas, a mutação TCAT torna-se TTAT.
Ligação Não Homóloga de Extremidades
- A ligação de extremidades não homóloga une uma extremidade dupla de DNA à extremidade dupla mais próxima, mantendo a integridade do DNA.
Modificações de Histonas
- As modificações químicas de histonas são irreversíveis e ocorrem nos nucleossomas.
- Incluem modificações como acetilação, metilação e sulfurilações
- Alteram a estrutura da cromatina para activar ou desactivar genes.
Eucromatina e Heterocromatina
- A eucromatina é menos condensada que a heterocromatina e geralmente transcrita, enquanto a heterocromatina é mais condensada, geralmente não transcrita (exceções).
- Ambos existem no núcleo.
- A metilação da lisina 9 da histona 3 é a modificação da cromatina que mais frequentemente induz a formação de heterocromatina.
Técnicas para Anomalias Cromossómicas
- PCR
- FISH (Hibridização in situ fluorescente)
- Eletroforese
- Microscopia eletrônica
- Cromatografia
Imprinting Genômico
- Referencia-se ao silenciamento de um alelo (por metilação)
- Resulta na expressão diferencial de um gene baseado no sexo do progenitor.
- Pode levar a doenças ao alterar a expressão génica.
- Pode afetar múltiplos genes numa região cromossómica.
Imprinting Genômico
- É regulado pela metilação de alelos
- Afecta vários genes
- O padrão de metilação/silenciamento é estabelecido durante o desenvolvimento e é mantido através de gerações.
Inativação do Cromossomo X
- Nas mulheres, o mecanismo de inativação de um cromossoma X na maioria dos seus tecidos/órgãos para evitar a expressão excessiva de genes.
Níveis de Regulação de Genes
- Regulação da expressão génica pode ser feita a nível da transcrição, RNA, tradução ou degradação das proteínas.
- Em eucariotas, pode ser através da regulação da cromatina.
- A regulação pode ser feito através das modificações das histonas.
Tipos de RNA
- Os microRNAs, siRNA, snRNA, ncRNA, tRNA, mRNA, rRNA podem induzir o silenciamento de genes.
MicroRNAs
- São sintetizados a partir de um precursor de cadeia dupla no núcleo.
- Regulam a expressão génica associando-se ao mRNA complementar.
- Os microRNAs atuam no processo de degradação dos mRNAs ou inibindo a sua tradução.
Citoesqueleto e Filamentos de Actina,
- Os monómeros de actina têm atividade ATPase.
- A formação de lamelipodia ocorre por polimerização da actina na extremidade positiva.
- Os monómeros de actina livres estão ligados a GTP, que é hidrolisado a GDP após a polimerização.
- Filamentos de actina possuem polaridade.
Apoptose
- A inativação de p53, em resposta a dano de ADN, não desenrola a via intrínseca da apoptose.
- A ativação da via intrínseca da apoptose é determinada pelo equilíbrio das proteínas pro/antiapoptóticas.
- O apoptossomo é constituído por citocromo c, proteínas adaptadoras, e procaspases-9.
Proto-oncogenes e Oncogenes
- Proto-oncogenes são convertidos em oncogenes por translocação, amplificação, mutações ou a inserção de novos promotores.
- Proto-oncogenes não se tornam oncogenes por metilação do promotor.
Terapia Génica e Edição Génica
- O sistema CRISPR-Cas9 é utilizado para edição genética.
Fibrose Cística
- A proteína CFTR recombinante não é usada na terapia, devido à dificuldade de entrega da proteína às células epiteliais.
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Description
Este quiz aborda conceitos essenciais sobre DNA recombinante em células procariotas, clonagem de mamíferos e a estrutura básica do DNA. Explore a importância dos cromossomos artificiais e as técnicas utilizadas na transgenia para a produção de proteínas humanas. Teste seus conhecimentos sobre biotecnologia moderna!
