Biochimica Clinica - Lezione 1
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Questions and Answers

Quali sono le azioni principali svolte dal laboratorio di biochimica clinica?

  • Scelta e monitoraggio della terapia (correct)
  • Esame fisico del paziente
  • Controllo della pressione sanguigna
  • Scoperta della malattia (correct)

    • Qual è lo scopo del laboratorio di biochimica clinica?

    Assistere il medico nella diagnosi e monitoraggio delle patologie.

    Il ciclo analitico include le fasi pre-analitica, analitica e ______.

    post-analitica

    Il laboratorio generale è più piccolo del laboratorio di reparto.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Cos'è il TAT nel contesto di laboratorio?

    <p>Il tempo che intercorre tra l'accettazione e il referto.</p> Signup and view all the answers

    I campioni più comuni utilizzati sono: sangue, urine, ____, e biopsie di tessuto.

    <p>feci</p> Signup and view all the answers

    Qual è la fase pre-analitica che include la preparazione del paziente?

    <p>Accertamento dell'identità e preparazione adeguata.</p> Signup and view all the answers

    Quale tra i seguenti è un obiettivo delle analisi richieste dal medico?

    <p>Controllare valori attuali</p> Signup and view all the answers

    La sensibilità di un test è la sua capacità di identificare i soggetti malati.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    Cosa si intende per 'gold standard'?

    <p>Il test diagnostico più affidabile per un parametro specifico.</p> Signup and view all the answers

    Abbina i seguenti termini alle loro definizioni:

    <p>Anamnesi = Raccolta delle informazioni sul paziente Diagnosi = Individuazione di una patologia Prognosi = Previsione sul decorso di una patologia Follow-up = Controllo continuo dopo la diagnosi</p> Signup and view all the answers

    Qual è una condizione di malignità associata alle MG?

    <p>Plasmocitoma solitario</p> Signup and view all the answers

    La fosfatasi alcalina epatica è facile da distinguere dalla fosfatasi alcalina osteoblastica.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quale enzima è principale nel ciclo di Meister?

    <p>Gamma-glutammiltranspeptidasi</p> Signup and view all the answers

    La gamma-glutamiltranspeptidasi è un indicatore di _____ epatobiliare.

    <p>malattia</p> Signup and view all the answers

    Quale metodo è usato per misurare la fosfatasi alcalina?

    <p>Colorimetria</p> Signup and view all the answers

    Quali sono le principali funzioni del glutatione?

    <p>Protezione delle proteine e dei composti ossidabili dai radicali liberi.</p> Signup and view all the answers

    Cosa scinde l'amilasi?

    <p>Legami alfa 1-4 glicosidici</p> Signup and view all the answers

    L'amiloidosi è una diagnosi finale comune collegata al mieloma multiplo.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    I livelli sierici di riferimento della gamma-glutamiltransferasi sono 40 U/L per _____ e 70 U/L per _____

    <p>F, M</p> Signup and view all the answers

    Quale dei seguenti valori non devono essere imparati a memoria?

    <p>Valori scritti in nero</p> Signup and view all the answers

    Qual è il valore di riferimento per l'alfa-1-antitripsina (AAT)?

    <p>0,9-2,0 g/L</p> Signup and view all the answers

    La protidemia totale è una misura della concentrazione totale delle proteine nel sangue.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    La __________ è la proteina di trasporto del ferro nel sangue.

    <p>transferrina</p> Signup and view all the answers

    Quale delle seguenti affermazioni è vera riguardo all'infiammazione acuta?

    <p>Richiede la partecipazione di cellule ematiche e tissutali.</p> Signup and view all the answers

    Abbina le proteine alla loro funzione principale:

    <p>Aptoglobina = Trasporto di emoglobina libera Ceruloplasmina = Metabolismo del rame Proteina C reattiva = Marcatore di infiammazione Fibrinogeno = Coagulazione del sangue</p> Signup and view all the answers

    Che cos'è la VES e a cosa serve?

    <p>È un esame che misura la velocità di sedimentazione degli eritrociti, utilizzato per valutare infiammazioni.</p> Signup and view all the answers

    Le immunoglobuline aumentano nelle malattie autoimmuni.

    <p>True</p> Signup and view all the answers

    L'albumina diminuisce la sua produzione durante la sintesi di __________.

    <p>APP positive</p> Signup and view all the answers

    Quale proteina è indicativa della fase acuta dell'infiammazione?

    <p>PCR</p> Signup and view all the answers

    Quali sono i principali componenti del plasma?

    <p>Acqua, proteine, glucosio, ioni, metaboliti di scarto.</p> Signup and view all the answers

    Il siero contiene i fattori di coagulazione.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Quale tappo si usa per l'analisi dei fattori della coagulazione?

    <p>Tappo blu chiaro</p> Signup and view all the answers

    Cosa si ottiene utilizzando un tappo rosso per il campione di sangue?

    <p>Solo il siero.</p> Signup and view all the answers

    L'EDTA è un chelante del _____ che si trova sulle pareti della provetta.

    <p>calcio</p> Signup and view all the answers

    Come si ottiene il plasma dal sangue?

    <p>Aggiungendo sostanze anticoagulanti per bloccare la coagulazione.</p> Signup and view all the answers

    Qual è il rapporto usato per diluire una sostanza in una diluizione 1:10?

    <p>9 parti di solvente e 1 parte della sostanza.</p> Signup and view all the answers

    Abbina i seguenti tipi di provetta con il loro utilizzo:

    <p>Tappo blu scuro = Valutazione dei metalli pesanti Tappo grigio = Misurazione della glicemia Tappo giallo = Inibisce la coagulazione del sangue Tappo verde = Separazione siero e plasma</p> Signup and view all the answers

    Un errore comune nella fase pre-analitica è l'uso di strumenti sterili.

    <p>False</p> Signup and view all the answers

    Qual è la funzione dell'SDS nel campione per elettroforesi?

    <p>Denaturare le proteine e conferire loro una carica negativa.</p> Signup and view all the answers

    Quale non è un tipo comune di elettroforesi?

    <p>Elettroforesi a pezzo</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Il Laboratorio di Biochimica Clinica

    • Il laboratorio di biochimica clinica assiste il medico nella scoperta e conferma delle malattie, nella scelta e monitoraggio della terapia e nella definizione della prognosi.
    • Il laboratorio è multidisciplinare, con biologi, chimici, fisici e personale tecnico specializzato.

    Struttura del Laboratorio

    • La struttura del laboratorio comprende lo staff, l'impianto e i compiti assegnati in base alle analisi cliniche da effettuare.
    • Il personale deve essere specializzato e avere titoli di studio congrui con la posizione rivestita.
    • L'impianto è caratterizzato da requisiti impiantistici e di sicurezza obbligatori e regolamentati per legge.

    Processo di Laboratorio

    • Il processo di laboratorio comprende l'accettazione, l'analisi, la validazione del dato e la creazione del referto.
    • Il ciclo analitico segue il TAT (turn around time) che deve essere breve, specialmente in pronto soccorso.

    Tipi di Laboratori

    • Laboratorio di reparto (point of care testing): piccolo laboratorio che si trova nelle vicinanze di un reparto e ha lo scopo di ridurre il tempo tra le analisi e il referto.
    • Laboratorio generale (core laboratory): laboratorio di analisi ospedaliero che effettua analisi di ogni tipo.
    • Laboratorio specialistico: laboratorio che si occupa di un particolare tipo di analisi, ad esempio analisi citogenetiche.

    Motivazioni per la Richiesta delle Analisi

    • Il medico richiede le analisi per controllare i valori attuali, per lo screening di patologie comuni in famiglia, per confermare o escludere dubbi diagnostici, per verificare il follow-up di una malattia o terapia, e per gestire emergenze.

    Controllo del Processo e del Prodotto

    • Il controllo del processo e del prodotto è fondamentale per garantire la qualità del referto.
    • Il ciclo di Deming è un metodo di gestione iterativo in quattro fasi utilizzato per il controllo e il miglioramento continuo dei processi e dei prodotti.

    Valutazione Esterna della Qualità (VEQ)

    • La VEQ è un sistema di controllo che fa si che i vari laboratori abbiano i valori di un parametro nello stesso range.
    • L'ente di controllo invia mensilmente ai laboratori dei campioni di controllo, che simulano i campioni dei pazienti, su cui dovranno essere eseguite determinazioni analitiche.

    Fonti della Variabilità in Medicina di Laboratorio

    • La variabilità dei parametri può dipendere dalle abitudini, dal sesso, dall'età ecc.
    • Gli intervalli di riferimento vengono stabiliti mediante uno step-by-step che comprende la selezione di un individuo di riferimento, la selezione di un gruppo campione di riferimento, l'analisi del parametro, la distribuzione di riferimento e l'osservazione del valore.### Valutazione della distribuzione dei valori
    • La valutazione della distribuzione dei valori assume un'importanza centrale nella scelta del metodo per la valutazione dell'intervallo e dei limiti di riferimento
    • I metodi non parametrici possono essere applicati a tutte le distribuzioni (gaussiane, logaritmiche, ecc.)
    • I metodi parametrici sono preferibilmente utilizzati per le distribuzioni gaussiane o trasformabili in gaussiane

    Valutazione parametrica dei valori di riferimento

    • La valutazione parametrica dei valori di riferimento è basata sul controllo della normalità della distribuzione
    • La trasformazione dei dati in caso di non normalità della distribuzione con la definizione dei limiti di riferimento
    • I limiti si fissano in modo da escludere porzioni del 2,5% dalla coda di distribuzione inferiore o superiore

    Valutazione non parametrica dell'intervallo di riferimento

    • La valutazione non parametrica dell'intervallo di riferimento può essere applicata a qualsiasi distribuzione di valori
    • Non fa alcuna presunzione sul tipo di distribuzione e non effettua alcuna stima dei parametri di distribuzione
    • Si limita a determinare i percentile superiore e inferiore

    Gold standard

    • Il gold standard è un test per un determinato parametro che ci dà il risultato più affidabile in assoluto
    • È un test caratterizzato da maggiore sensibilità e specificità
    • Esempi di gold standard:
      • Emoglobina glicata per il diabete
      • Biopsia epatica per la cirrosi
      • Troponine per l'infarto del miocardio

    Analisi di laboratorio

    Ciclo analitico

    • Fase pre-analitica:
      • Richiesta delle esecuzioni delle analisi
      • Preparazione del paziente
      • Raccolta del campione
    • Fase analitica:
      • Analisi del campione
    • Fase post-analitica:
      • Interpretazione dei risultati

    Fase pre-analitica

    • Preparazione del paziente:
      • Accertamento dell'identità
      • Paziente riposato, a digiuno da almeno 6-8 ore
      • Firma del contratto informato
    • Raccolta del campione:
      • Standardizzazione delle metodologie di prelievo del campione
      • Scelta del campione biologico dipendente dalle indagini da eseguire
    • Campioni biologici più utilizzati:
      • Sangue (sangue venoso e arterioso)
      • Urine (campione della mattina e raccolta delle 24 ore)

    Fase analitica

    • Analisi del campione:
      • Utilizzo di strumentazione specifica (es. centrifughe, pipette, ecc.)

    Fasi di errori

    • Errori nella fase pre-analitica:
      • Prescrizione di analisi errata
      • Scambio di persona
      • Errore nella preparazione del paziente
      • Errore nella tenuta del laccio emostatico
      • Provetta sbagliata
    • Errori nella fase analitica:
      • Mescolamento sbagliato
      • Etichetta sbagliata
      • Il campione è stato portato al laboratorio sbagliato
      • Errata conservazione
      • Errato trattamento in laboratorio### Il Campione di Sangue
    • Il campione di sangue, trattato con sostanze anticoagulanti e lasciato sedimentare in una provetta, mostra una stratificazione visibile ad occhio nudo:
      • 44% Ematocrito: contiene eritrociti e si trova nella parte inferiore della provetta
      • 1% Buffy coat: contiene globuli bianchi e piastrine e si trova al centro della provetta
      • 55% Plasma: composto da H2O, proteine, glucosio, ioni e metaboliti di scarto, e si trova nella parte superiore della provetta

    Il Plasma

    • Il plasma contiene più di 300 proteine diverse, molte delle quali hanno un ruolo specifico:
      • Mantengono la pressione osmotica colloidale (albumina)
      • Trasportano sostanze (trasportatori di lipidi, ormoni, bilirubina, ferro)
      • Partecipano alla difesa immunitaria (immunoglobuline, sistema del complemento)
      • Regolano la coagulazione e la fibrinolisi (proteine della coagulazione)
    • Altre proteine possono essere presenti nel plasma solo in condizioni patologiche (enzimi di provenienza tissutale e marcatori tumorali)

    Errori Pre-Analitici

    • Le etichette sulle provette devono:
      • Non essere facilmente asportabili
      • Permettere l'identificazione inequivocabile del paziente (nome, cognome, codice fiscale, codice a barre)
      • Presentare almeno un doppio codice di identificazione
      • Utilizzare strumenti sterili
    • I campioni possono essere rifiutati se:
      • Sono stati etichettati erroneamente
      • Sono emolizzati o coagulati
      • Sono arrivati in laboratorio troppo tardi
      • Sono stati conservati male
      • La richiesta non corrisponde al tipo di provetta utilizzata

    Raccolta delle Urine

    • La raccolta delle urine può essere:
      • Qualitativa: comune analisi delle urine, usata per esami microbiologici
      • Quantitativa: usata per valutare la funzionalità renale, richiede una precisa quantificazione del campione urinario

    Protidogramma

    • Il protidogramma è una tecnica utilizzata per analizzare la composizione proteica dei liquidi biologici
    • Le tecniche di separazione elettroforetica utilizzate sono:
      • Elettroforesi zonale
      • Elettroforesi capillare (CE)
      • Tecniche di immunosottrazione (ISE)
      • Elettroforesi/immunofissazione (IFE)

    Elettroforesi su Gel di Agarosio

    • L'elettroforesi su gel di agarosio è utilizzata per separare gli acidi nucleici
    • Il gel di agarosio è formato da unità di D-galattosio e 3,6-anidro-L-galattosio
    • La velocità di migrazione del DNA dipende dalla concentrazione del DNA, dalla dimensione del DNA e dalla concentrazione di agarosio

    Elettroforesi su Gel di Poliacrilammide

    • L'elettroforesi su gel di poliacrilammide è utilizzata per separare le proteine
    • Il gel di poliacrilammide è formato da acrilammide e bisacrilammide
    • La velocità di migrazione delle proteine dipende dalla concentrazione di poliacrilammide, dalla dimensione delle proteine e dalla carica elettrica delle proteine

    SDS Page

    • L'SDS page (Polyacrylamide Gel Electrophoresis) è una tecnica utilizzata per analizzare la composizione proteica degli estratti proteici
    • L'SDS è un denaturante che rompe la struttura articolata delle proteine e conferisce loro una carica negativa
    • Il campione deve essere preparato con un buffer contenente SDS e un agente riducente
    • La corsa elettroforetica viene eseguita in una cella elettroforetica con un tampone di corsa a pH 8,3
    • Le proteine vengono separate in base alla loro dimensione e carica elettrica

    Elettroforesi Capillare

    • L'elettroforesi capillare è una tecnica utilizzata per separare sistemi complessi di molecole grandi e piccole
    • Il capillare deve avere un diametro compreso tra 20 e 70 μm e una lunghezza di 20-100 cm
    • Il tampone di corsa deve essere neutro o basico per garantire un flusso elettroendosmotico uniforme
    • La velocità di migrazione degli analiti dipende dalla loro massa, carica e flusso elettroendosmotico

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    Il laboratorio di biochimica clinica e il suo ruolo nell'aiuto al medico per scoprire patologie.

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