Biochemie: Gel-Elektrophorese

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Geben Sie den Hauptzweck der folgenden Substanzen in der Gel-Elektrophorese an:

SDS = 負atively chargierte Proteine zu erzeugen Bis-Acrylamid = Polyacrylamid-Monomere zu verknüpfen Coomassie Brilliant Blue = Proteine zu färben Reduzierende Mittel = Disulfidbrücken in Proteinen zu reduzieren

Ordnen Sie den folgenden Begriffen ihre Definitionen in der Gel-Elektrophorese zu:

Polyacrylamid-Gel = Ein quervernetzter Polymer, der einen Siebeffekt bereitstellt Gradienten-Gel = Ein Gel mit einem kontinuierlichen Gradienten der Acrylamid-Konzentration Discontinuous-Gel = Ein Gel mit einem Buffer-System, das entlang des Gels wechselt Continuous-Gel = Ein Gel mit einem einzigen Buffer-System im gesamten Gel

Ordnen Sie den folgenden Schritten in der Gel-Elektrophorese die richtige Reihenfolge zu:

Probenpräparation = Mischen der Protein-Probe mit SDS, Reduzierenden Mitteln und Puffer Probenlade = In die Wells am oberen Ende des Gels Elektrophorese = Anwenden eines elektrischen Felds, um Proteine durch das Gel zu bewegen Protein-Migration = Von negativ zu positivem Elektroden

Geben Sie die Eigenschaften der Proteine an, die sie in der Gel-Elektrophorese trennen:

Größe = Kleinerer Proteine wandern schneller als größere Proteine Ladung = Negativ geladene Proteine aufgrund von SDS-Bindung Molekulargewicht = Proteine trennen sich aufgrund ihres Molekulargewichts pH-Wert = Proteine trennen sich aufgrund ihres pH-Werts

Ordnen Sie den folgenden Nachweismethoden in der Gel-Elektrophorese ihre Funktionen zu:

Coomassie Brilliant Blue = Färben von Proteinen Silberfärbung = Färben von Proteinen Fluoreszenz-Färbung = Färben von Proteinen Western-Blot = Übertragung von Proteinen auf eine Membran für die spezifische Antikörper-Detektion

Geben Sie den Effekt der Acrylamid-Konzentration auf die Gel-Elektrophorese an:

Porengröße = Die Porengröße des Gels wird von der Acrylamid-Konzentration beeinflusst Auflösung = Die Auflösung der Proteine wird von der Acrylamid-Konzentration beeinflusst Geschwindigkeit = Die Geschwindigkeit der Proteine wird von der Acrylamid-Konzentration beeinflusst Ladung = Die Ladung der Proteine wird von der Acrylamid-Konzentration beeinflusst

Ordnen Sie den folgenden Pflanzenteilen ihre Funktionen zu:

Blätter = Photosynthese durchführen Wurzeln = Wasser und Mineralstoffe aufnehmen Stiele = Pflanzenteile verbinden Blüten = Reproduktion ermöglichen

Geben Sie den richtigen Pflanzenschutz an:

Cuticula = Schutz vor Wasser Verlust Borke = Schutz vor mechanischen Schäden Epidermis = Schutz vor pathogenen Keimen Periderm = Schutz vor Feuchtigkeit

Ordnen Sie den folgenden Pflanzenorganelle ihre Funktionen zu:

Chloroplasten = Photosynthese durchführen Mitochondrien = Energie produzieren Endoplasmatisches Retikulum = Proteinsynthese durchführen Lysosomen = Zellabbau durchführen

Geben Sie den richtigen Stoffwechselprozess an:

Photosynthese = Kohlendioxid zu Glucose konvertieren Atmung = Glucose zu Energie konvertieren Fermentation = Glucose zu Alkohol konvertieren Transpiration = Wasser und Mineralstoffe aufnehmen

Ordnen Sie den folgenden Pflanzenhormonen ihre Funktionen zu:

Auxin = Streckung von Pflanzen fördern Gibberellin = Pflanzenwachstum fördern Cytokinin = Zellteilung fördern Ethylene = Fruchtreife fördern

Study Notes

Gel Electrophoresis

Principle

  • Separation of proteins based on their size and charge
  • Proteins are negatively charged due to SDS (sodium dodecyl sulfate) binding
  • Electric field is applied to move proteins through a gel matrix

Gel Composition

  • Polyacrylamide gel: a cross-linked polymer that provides a sieving effect
  • Acrylamide concentration: affects pore size and resolution
  • Cross-linker: bis-acrylamide, which links acrylamide monomers

Running the Gel

  • Sample preparation: mixing protein sample with SDS, reducing agents, and buffer
  • Sample loading: into wells at the top of the gel
  • Electrophoresis: applying an electric field to move proteins through the gel
  • Protein migration: from negative to positive electrode

Gel Types

  • Continuous gel: a single buffer system throughout the gel
  • Discontinuous gel: a buffer system that changes along the gel
  • Gradient gel: a gel with a continuous gradient of acrylamide concentration

Protein Separation

  • Proteins separate based on their molecular weight and charge
  • Smaller proteins migrate faster than larger proteins
  • Protein bands: visible after staining, representing individual protein species

Detection Methods

  • Staining: Coomassie Brilliant Blue, silver staining, or fluorescent dyes
  • Western blotting: transferring proteins to a membrane for specific antibody detection

Gel-Elektrophorese

Prinzip

  • Trennung von Proteinen basierend auf ihrer Größe und Ladung
  • Proteine sind negativ geladen aufgrund der Bindung von SDS (Natriumdodecylsulfat)
  • Ein elektrisches Feld wird angewendet, um Proteine durch eine Gelmatrix zu bewegen

Gelzusammensetzung

  • Polyacrylamid-Gel: ein vernetzter Polymer, der einen Siebeffekt bietet
  • Acrylamidkonzentration: beeinflusst die Porengröße und Auflösung
  • Vernetzer: Bisacrylamid, das Acrylamidmonomere verbindet

Ausführung des Gels

  • Probenpräparation: Mischen der Proteinprobe mit SDS, Reduktionsmittel und Puffer
  • Probenlade: in die oberen Löcher des Gels
  • Elektrophorese: Anwendung eines elektrischen Felds, um Proteine durch das Gel zu bewegen
  • Proteinauswanderung: von der negativen zur positiven Elektrode

Gel-Typen

  • Kontinuierliches Gel: ein einziges Puffersystem über das gesamte Gel
  • Diskontinuierliches Gel: ein Puffersystem, das entlang des Gels ändert
  • Gradientengel: ein Gel mit einem kontinuierlichen Gradienten der Acrylamidkonzentration

Proteintrennung

  • Proteine trennen sich aufgrund ihrer molekularen Masse und Ladung
  • Kleinere Proteine wandern schneller als größere Proteine
  • Proteinbanden: sichtbar nach Färben, repräsentieren einzelne Proteinspezies

Detektionsmethoden

  • Färben: Coomassie Brilliant Blau, Silberfärben oder fluoreszierende Farbstoffe
  • Western-Blot: Übertragung von Proteinen auf eine Membran für die spezifische Antikörpererkennung

Gel-Elektrophorese

Prinzip

  • Trennung von Proteinen basierend auf ihrer Größe und Ladung
  • Proteine sind negativ geladen durch Bindung von SDS (Natriumdodecylsulfat)
  • Ein elektrisches Feld wird angewendet, um Proteine durch eine Gelmatrix zu bewegen

Gelzusammensetzung

  • Polyacrylamidgel: ein vernetzter Polymer, der einen Siebeffekt liefert
  • Akrylamidkonzentration: beeinflusst die Porengröße und die Auflösung
  • Vernetzer: Bis-Akrylamid, das Akrylamidmonomere verbindet

Durchführung der Gel-Elektrophorese

  • Probenvorbereitung: Mischen einer Proteinprobe mit SDS, Reduktionsmitteln und Puffer
  • Probenladung: in die Wells am oberen Ende des Gels
  • Elektrophorese: Anwendung eines elektrischen Felds, um Proteine durch das Gel zu bewegen
  • Proteinfaltung: von der negativen zur positiven Elektrode

Geltypen

  • Kontinuierliches Gel: ein einziges Puffersystem innerhalb des Gels
  • Diskontinuierliches Gel: ein Puffersystem, das entlang des Gels wechselt
  • Gradientengel: ein Gel mit einem kontinuierlichen Gradienten der Akrylamidkonzentration

Proteintrennung

  • Proteine trennen sich aufgrund ihrer molekularen Masse und Ladung
  • Kleine Proteine wandern schneller als große Proteine
  • Proteinbänder: sichtbar nach Färben, repräsentieren einzelne Proteinspezies

Detektionsmethoden

  • Färben: Coomassie Brilliant Blue, Silberfärben oder fluoreszierende Farbstoffe
  • Western-Blot: Übertragung von Proteinen auf eine Membran für die spezifische Antikörpererkennung

Lernen Sie die Grundlagen der Gel-Elektrophorese, einschließlich des Prinzips, der Gelzusammensetzung und des Ablaufs. Eine wichtige Methode in der Biochemie, um Proteine zu trennen.

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