Tema 13 ENDOCITOSIS Y EXOCITOSIS 2023-2024

TEMA 13: ENDOCITOSIS Y EXOCITOSIS 1) ENDOCITOSIS MEDIADA POR RECEPTOR Endocitosis de la LDL y de la transferrina, endocitosis del receptor del factor del crecimiento epidérmico (rEGF) , transcitosis. Los complejos clasificadores endosomicos (ESCRT) Retrómeros y nexinas: Clasificación endosomal y rec...

TEMA 13: ENDOCITOSIS Y EXOCITOSIS 1) ENDOCITOSIS MEDIADA POR RECEPTOR Endocitosis de la LDL y de la transferrina, endocitosis del receptor del factor del crecimiento epidérmico (rEGF) , transcitosis. Los complejos clasificadores endosomicos (ESCRT) Retrómeros y nexinas: Clasificación endosomal y reciclaje de receptores endocitados 2) PINOCITOSIS Microdominios lipídicos, caveolas, caveolinas y cavinas Macropinocitosis 3) FAGOCITOSIS Y EFEROCITOSIS Celulas mieloides 4) ENDOCITOSIS COMO MEDIO DE ENTRADA DE PATÓGENOS EN LA CÉLULA 5) EXOCITOSIS Comunicación intercelular por vesículas. Biología de las vesículas exocíticas: exosomas y microvesículas Exosomas y la hipótesis de “Seed and Soil” El tráfico de membrana El tráfico de membrana que se va a dar en este tema. 1) Endocitosis mediada por clatrina 2) Fagocitosis 3) Macropinocitosis 4) Endocitosis mediada por caveolas 5) Exocitosis 6) Los demás procesos no, ya que son poco conocidos Todos los procesos salvo la fagocitosis se clasifican dentro de la pinocitosis El sistema endosoma - lisosoma pH 5-4.5 E. multivesicular pH 6 Endosoma temprano pH 6.5-6 E. tardío pH 6-5 Bajada del pH! 1) ENDOCITOSIS MEDIADA POR RECEPTOR Los tres posibles destinos de los receptores 1) Reciclaje 2) Degradación 3) Transcitosis Possible fates for transmembrane receptor proteins that have been endocytosed. Three pathways from the endosomal compartment in an epithelial cell are shown. Receptors that are not specifically retrieved from endosomes follow the pathway from the endosomal compartment to lysosomes, where they are degraded. Retrieved receptors are returned either to the same plasma membrane domain from which they came (recycling) or to a different domain of the plasma membrane (transcytosis). If the ligand that is endocytosed with its receptor stays bound to the receptor in the acidic environment of the endosome, it will follow the same pathway as the receptor; otherwise it will be delivered to lysosomes. 1) Reciclaje: la endocitosis de la lipoproteína de baja densidad (LDL). El receptor se recicla. superficie polar Apolipoproteína B LDL centro apolar MW LDL humana: 2,700,000 Da Mecanismo de la endocitosis de la LDL y del reciclaje del receptor pH neutro retrómero Viaje del receptor: 10-20 min, vida media: 20 hrs pH ácido Lisosomas: reciclaje de componentes para la biosíntesis de membranas. Hidrolasas hidrolizan la apolipoproteína. Esterasas: hidrolizan los ésteres Colesterol libre Citoplasma. Figura 13-53 Biología molecular de la célula, quinta edición (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010) Mutaciones en el gen del receptor de la LDL contribuyen a la hipercolesterolemia familiar. Hipercolesterolemia familiar. Enfermedad hereditaria con un defecto genético que impide que el colesterol LDL sea degradado, los niveles de colesterol aumentan → infarto de miocardio por engrosamiento de las arterias. Posibles causas: - no se sintetiza el receptor señal de clasificación AP2 -no se pliega bien → ERAD -no puede unirse al ligando -no se acumula en depresiones revestidas de clatrina (falta de péptido de señal de clasificación) El ciclo de la transferrina: reciclaje del receptor y su ligando Transferrina: lanzadera entre fluido extracelular y endosomas no disocia 2) Degradación: el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y su receptor (EGFR) se degradan en los lisosomas El EGF y su receptor entran en vesículas recubiertas por clatrina. (Nota: el EGFr está marcada con una monoubiquitina). Los monoubiquitina endosomas tempranos clasifican el EGF y el EGFr y ambos son secuestrados en endosomas multivesiculares. Las Endosoma en invaginaciones y la formación de proceso de vesículas en los endosomas maduración multivesiculares son esenciales para la digestión completa de las proteínas transmembrana dado que la membrana externa se fusiona con la membrana de los Endosoma lisosomas. Si no se formaran multivesicular vesículas internas, las hidrolasas no podrían digerir la parte citosólica del receptor, en este Regulación por disminución caso del EGFr. 3) Transcitosis de inmunoglobulinas de la leche materna en células epiteliales de ratas recién nacidas pH7.4 El receptor Fc para inmunoglobulinas (Igs) reconoce las Igs de la leche materna en el entorno ácido de la luz del intestino (alta afinidad). Clasificación por endosomas tempranos y endosomas de reciclaje al fluido extracellular con pH neutro. (Baja afinidad). pasan a la sangre. pH 6 Clasificación de proteínas de membrana a los endosomas multivesiculares y mecanismo de formación de los mismos. ESCRT: complejos clasificadores endosómicos necesarios para el transporte. Descubiertos en 2001. Reconocen PI(3)P y proteínas TM modificadas con una ubiquitina o múltiples, pero nunca en cadena. Vps4 = AAA-ATPasa Reclutamiento secuencial: ESCRT 0-I-y-II clasifican, ESCRT- III introduce curvatura y estrangula Vps4 (AAA-ATPasa) desensambla el complejo. Figura 13-58 Biología molecular de la célula, quinta edición (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010) La formación de vesículas con diferentes topologías A) Topología; hacía al citoplasma, estrangulamiento por hidrólisis de Sar1-GTP. B) Topología: fuera del citoplasma, hacía el lumen = equivalente al espacio extracelular. Estrangulamiento por ESCRT-III. Alonso Y Adell et al., 2016. The FEBS Journal 283: 3288-3302. Formación de partículas virales del HIV: gemación hacía el espacio extracelular secuestrando ESCRT celular. GAG: proteína del cápside viral que en su estado plegado tiene una secuencia señal para ESCRT-I y su adaptor ALIX. Implicados ESCRT-I y III, ESCRT-II ?. Micrografías electrónicas de los virus que brotan de células de tipo silvestre y de células deficientes en ESCRT infectadas con HIV silvestre Mutante de ESCRT Gag ESCRT-III y Vps4: papel en gemación y desprendimiento de vesículas * * Resumen de las funciones celulares de ESCRT en la clasificación y el estrangulamiento de membranas. Se verá en clase James H Hurley EMBO J. 2015;34:2398-2407 © as stated in the article, figure or figure legend Clasificación endosomal y reciclaje: el papel de los retrómeros y las nexinas Rescatan proteínas transmembrana de la vía lisosomal degradativa y las reciclan a otros compartimientos celulares como la MP o el trans Golgi. Proceso muy importante para la homeostasis entre degradación proteica y reciclaje. Ciclo endocitosis – exocitosis: la membrana que entra por endocitosis tiene que reciclarse por exocitosis. Gallon and Cullen (2015) Biochem Soc Trans 43: 33-47. Estructura del retrómero: cubierta no en forma de cesta 4 subunidades: SNX1: Nexinas de clasificación. Dímero con dominios PX que se unen a PI(3)P y dominios BAR para la curvatura. VPS26, 29 y 35: participación en la unión a las colas citosólicas de las proteínas transmembrana de carga. Se ensambla cuando: 1) Puede unirse a la carga 2) Puede interactuar con membranas curvadas 3) Puede unirse a fosfoinositol específico para endosomas “detector de coincidencia” Nexinas de clasificación: familia de proteínas evolutivamente conservadas que unen a fosfoinositoles Estructura tubular Figure 13-9 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008) Resumen 1) En el proceso de la endocitosis mediada por receptor hay tres posibles destinos: Reciclaje: El receptor de la LDL: El receptor se recicla y el ligando es degradado en los lisosomas. El receptor de la transferrina: se recicla junto con la transferrina. Ambos procesos dependen del pH. El proceso depende del pH. Degradación: El receptor del EGF y el EGF: El receptor entra junto con su ligando en los endosomas multivesiculares los cuales se fusionan con los lisosomas. Receptor y ligando se degradan. Transcitosis: Las inmunoglobulinas: El receptor y su ligando se transportan de una membrana a la otra. El proceso depende del pH. 2) Los complejos ESCRT ayudan en la clasificación de receptores transmembrana a los endosomas multivesiculares y en el desprendimiento de las vesículas internas. Hay varios procesos celulares que dependen del estrangulamiento por ESCRT-III y Vps4. El HIV usa los complejos ESCRT celulares para su propia gemación de la célula huésped. 3) El retrómero es un complejo importante en que juega un papel en el la clasificación y el reciclaje de proteínas en el sistema endosomal. Para aclararnos: CLASIFICACIÓN DE LOS DIFERENTES TIPOS DE ENDOCITOSIS fagocitosis pinocitosis Mucho menos conocida. No se va a dar. 2) PINOCITOSIS Modelo del mosaico fluido (Singer y Nicolson, 1972) El modelo mosaico de balsas lipídicas (Simons y Gerrit van Meer, 1988) Dominios lipídicos: zonas resistentes al la extracción con detergentes no iónicos. Microdominios lipídicos: ricos en colesterol y esfingolípidos. Grosor aumentado de la membrana. Caveolas: ricas en colesterol y esfingolípidos asociados con caveolina estabilización. A simplified model of lipid rafts in cell membranes. The phospholipids (blue and brown) and cholesterol (yellow) are distributed in both the leaflets, whereas sphingolipids (violet) are enriched in the outer leaflet of the bilayer. The acyl chains of raft lipids are generally long and saturated (violet and brown), whereas those in non-raft domains are shorter and contain singly or multiply unsaturated acyl chains (blue). Raft domains contain concentrations of dually-acylated (green) and GPI-anchored (brown) proteins, whereas transmembrane (blue) and prenylated (green) proteins are usually non-raft associated. Dominios lipídicos, microdominios lipídicos, caveolas, caveolinas y cavinas Funciones de los microdominios lipídicos (balsas lipídicas, lipid rafts) Transducción de señales Tráfico de vesículas * Homeostasis del colesterol Adhesión, crecimiento y movilidad celular Apoptosis Infección por virus y bacterias* Caveolas “Little caves”: Pequeñas invaginaciones con forma de frasco o de roseta, presentes en la membrana. Subclase de microdominios lipídicos enriquecidos en caveolina. Muy abundantes en células endoteliales, adipocitos y músculo esquelético. Las caveolinas Formación de oligómeros Anclaje en la membrana - Proteínas integrales que forman los componentes principales de la membrana de las caveolas. - Funciones: - Estabilizar los microdominios lipídicos. - Introducir curvatura a la membrana. Anclaje al citoesqueleto Las cavinas: proteínas de cubierta Microdominio lipídico - Estabilización de los oligómeros de caveolina - Formación de más curvatura en la membrana - Papel en el desprendimiento de las caveolas Formación de las caveolas Lipid raft dinamina Caveolinas: sintetizadas en el RE Cavinas: sintetizadas en el citosol 2 destinos: internalización o aplanamiento Parton et al. (2020) Current Opinion in Cell Biology 65:8-16 El papel de las caveolas como sensores de la tensión de la membrana y su control. HOT TOPIC - Aplanamiento de las caveolas en respuesta a un aumento en la tensión de la membrana plasmática. - Disociación de las cavinas (al citosol) de las caveolinas (se quedan en la membrana). ¿Para qué? Una manera de evitar daño a la membrana plasmática o su lisis. Mecanoprotección. También la presencia de caveolas señaliza baja tensión. Se piensa que existe una señalización activa entre caveolas y citoesqueleto y caveolas y núcleo. Las cavinas puede entrar en el núcleo. Puede jugar un papel en el remodelado de la matriz extracelular. Macropinocitosis vs Fagocitosis Macropinocitosis: después de un estímulo en muchas tipos celulares para obtener nutrientes. En células de la línea mieloide (macrófagos, neutrófilos y células dendríticas) es un proceso constitutivo. Fagocitosis: solamente en células mieloides. Macropinocitosis Es un proceso mediante el cual se incorporan grandes cantidades de fluido extracelular y partes de la MP. En la superficie celular se crean evaginaciones a modo de ola cuyo frente cae sobre la membrana plasmática y se fusiona con ella formando una gran vesícula interna o macropinosoma. El proceso involucra polimerización de actina. La mayoría de la membrana se recicla a la MP y el macropinsoma maduro se fusiona con el endosoma tardío. 3) FAGOCITOSIS Es un tipo especial de endocitosis que consiste en la incorporación de partículas de gran tamaño como son bacterias, restos celulares o virus. El proceso contribuye a esterilizar el tejido, minimizar la inflamación e inhibir una respuesta inmune mas extensa. Este mecanismo lo llevan a cabo células especializadas como son los macrófagos, neutrófilos y las células dendríticas. (más en Inmunología e Inmunopatología, 4. año) Pregunta abierta: ¿De dónde vienen las membranas? ¿RE? ¿endosomas tardíos o de reciclaje? A) Reconocimiento (Ig en partícula y receptores de macrófago) B) Adhesión y despolimerización de la F-actina cortical. C) Polimerización de la Factina formando una “copa”. D) Cierre e internalización del fagosoma. Fagocitosis y macropinocitosis en células mieloides El citoesqueleto en células mieloides no activadas. Córtex de F-actina Mylvaganam et al. (2021) Current Biology 31: R619-632) Protuberancias en forma de filopodios y lamelipodios para el sondeo inmunológico. Macropinocitosis constitutiva e inducida Macropinocitosis constituiva: se activa por el Ca2+. Se forman evaginaciones pequeñas. Macropinocitosis inducida: estímulos solubles activan receptores. Las células ya no responden al Ca2+. Formación de diferentes tipos de ondulaciones después de una reorganización local del citoesqueleto. Se forman macropinosomas grandes. Fagocitosis ¿Qué pasa aquí? Maduración de los fagosomas y macropinosomas - Fusión secuencial con endosomas (temprano, tardío) y finalmente con lisosomas. - Reciclaje de membrana por retrómeros - nexinas de clasificación. - Desplazamiento por microtúbulos hacía el extremo (-). - Nota: bajada del pH. Muerte celular: Necrosis vs Apoptosis Necrosis: muerte celular causando inflamación Apoptosis: muerte celular no inflamatoria Salida del contenido celular Cuerpos apoptóticos con membranas intactas Células del sistema inmune (se verá en “Regulación de la proliferación y destino celular) 3) EFEROCITOSIS: fagocitado de células muertas y en proceso de muerte. - Las células muertas y en proceso de muerte se eliminan mediante eferocitosis, un tipo de fagocitosis. Así el proceso contribuye a la esterilización de los tejidos. Es esencial para la homeostasis de los tejidos. - Si los cuerpos apoptoticos se desintegrasen, su contenido podría causar inflamación con necrosis. Macrófago con fagosomas (en amarillo) El proceso de la eferocitosis: “find me”, “catch me” “eat me”. Ejemplo de una célula infectada con un bacteria. Célula infectada “Find me”: Cuando una célula infectada entra en apoptosis los patógenos se empaquetan con restos celulares en cuerpos apoptóticos con las membranas intactas. (Así no causan respuesta inmune). En el proceso de la apoptosis se expone fosfatidilserina y se secretan quimioquinas, señales que atraen macrófagos. “Catch me”: incremento de moléculas puente y receptores en los macrófagos. Anclaje del cuerpo apoptótico. “Eat me”: Reorganización de citoesqueleto de actina y formación de protrusiones que engloban el cuerpo apoptótico. Formación de un eferosoma y fusión con un lisosoma. ¡¡ENEMIGO DESTRUIDO!! 4) ENDOCITOSIS COMO MEDIO DE ENTRADA DE PATÓGENOS A LA CÉLULA Endocitosis: portada para la entrada de virus y bacterias a la célula 2 estrategias virales para entrar en la célula y liberar el genoma. Virus con nucleocápside y envoltura HIV: fusión con la MP Unión a receptores y correceptores → cambio conformacional en una proteína de la envoltura vírica que provoca la exposición de un péptido fusogénico oculto. - Fusión con la envoltura del huésped a pH neutro y liberación del genoma viral y de las proteínas del cápside. pH neutro pH bajo Virus de la gripe: provocan endocitosis Unión a receptores de superficie y endocitosis → entrada de H+ a través un canal iónico en el cápside del virus causa cambio en el misma y estimula la exposición del péptido fusogénico. - Pérdida de la cubierta y liberación del RNA vírico al citoplasma. Figura 24-24 Biología molecular de la célula, quinta edición (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010) Endocitosis de toxinas bacterianas: entrada de la toxina del cólera en la célula Estructura de la toxina del cólera. A B 5 sitios de unión al receptor GM1 El receptor: El gangliósido GM1 Chinnapen et al., 2007 FEMS Cadena A con unión no covalente al poro del anillo homapentamérico de la cadena B balsa lipídica endosoma La entrada de la toxina del cólera en las células intestinales. 1) Unión de la toxina del cólera (CT) a GM1 localizado en balsas lipídicas de la parte apical de las células de la mucosa epitelial e internalización a endosomas. 2) Viaje al trans Golgi y después directamente al RE sin pasar por el resto del Golgi. 3) En el ER: Reconocimiento de la subunidad A por la PDI y desplegamiento resultando en la disociación de la subunidad. La subunidad A es reconocida como proteína irreversiblemente mal plegada. 4) Reconocimiento por ERAD y retrotranslocación. (Sec61 o Hrd1?) La subunidad A puede ciclar entre ER y Golgi. Señal KDEL. 5) Una vez en el citosol activa la adenilato ciclasa que sintetiza cAMP causando secreción del CL – y agua. Estrategias empleadas por parte de patógenas para asegurar su supervivencia en la célula huésped T. cruzi y virus Listeria monocytogenes Leishmania Salmonella Legionella Figura 24-30 Biología molecular de la célula, quinta edición (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010) macrófago alveolar La enfermedad del legionario La enfermedad del legionario o legionelosis adquirió su denominación en 1976, cuando apareció un brote de neumonía entre los participantes de una convención de la Legión en Filadelfia (EE.UU.). En 1977, los científicos identificaron una bacteria previamente desconocida, como la causa de la misteriosa infección de la enfermedad del legionario, bacteria que se denominó Legionela o Legionela pneumophila.] Este nombre compuesto es un derivado de "legionarios" y de la afectación preferencial a los pulmones (produciendo neumonía). La bacteria vive en amebas de agua dulce que pueden colonizar las torres de aire acondicionado que producen microgotas de agua que pueden ser inhaladas. Infección por Legionella pneumophila (enfermedad del legionario) bloqueo Legionella pneumophila (red) modulates its intracellular trafficking and creates an intracellular compartment similar to the endoplasmic reticulum (ER) in which to replicate. (a) Uptake of L. pneumophila by the eukaryotic host cell. (b) The default endocytic maturation pathway is blocked by wild-type L. pneumophila (as indicated by the red inhibition line and arrows). (c) Instead, the L. pneumophila-containing vacuole (LCV) co-opts host factors Sar1, Sec22b, and Rab1 to facilitate recruitment and fusion of ER-derived vesicles with the LCV. (d) The second phase of vacuole remodeling involves ARF1 and results in fusion of the LCV with ER membranes and delivery of lumenal ER proteins into the lumen of the LCV. Ubiquitinated (Ub) proteins localize to the LCV as early as 1 h after uptake. (e) The bacteria replicate within the rough ER-like vacuole and then (f) are released, which allows further infection cycles. A. Después de 15 min. Vesículas de la célula huésped se asocian con la superficie del fagosoma. B. Después de 19 horas. La membrana de la vacuola está cubierta de ribosomas. Resumen 1) Los microdominios lipídicos pueden ser de diferentes tamaños y se caracterizan por su alto contenido en esfingolípidos y colesterol. Pueden estar involucrados en la selección de proteínas transmembrana durante el transporte vesicular. 2) Se pueden distinguir dos tipos de endocitosis: la fagocitosis y la pinocitosis. Dentro de la pinocitosis existen la macropinocitosis y procesos dependientes de dinamina (vesículas recubiertas de clatrina y caveolas) e independientes de dinamina. 3) Las caveolas son una clase de microdominios con asociación a la caveolina, un molécula que los ancla al citoesqueleto. Los complejos de cavina estabilizan los oligómeros de caveolina. Las caveolas juegan un papel en algunas formas de endocitosis, en la inmovilización de proteínas en la membrana plasmática, procesos de señalización y en la mecanosensibilidad. 4) Bacteria, virus y parásitos pueden usar las vías endocíticas de la célula como portada para la entrada a la misma. 5) EXOCITOSIS. Cominicación intercelular por vesículas. Biología de vesículas exocíticas: exosomas y microvesículas. Las tres vías exocitóticas Vía secretora constitutiva (en todas las células, Org. de la Célula) Vía secretora regulada (en células especializadas en secreción) (Org. de la Célula) Vía secretora lisosomal (reparación de membranas y secreción de deshechos indigeribles, en todas las células) Dinámica Intracelular Tema 12 Comunicación intercelular por vesículas: tipos de vesículas Las vesículas tienen diferentes procesos de formación, origen, tamaño, marcadores y contenido. Biogénesis de exosomas, secreción y captación Endocitosis: los EMV contienen contenido citoplásmico y extracelular. Los MBV tienen 2 destinos: lisosoma o membrana plasmática. Captación por otra célula mediante endocitosis, fagocitosis, macropinocitosis etc. Vesículas extracelulares en procesos fisiológicos 1) Muchos tipos celulares incluyendo células inmunes, células madre y células tumorales secretan vesículas al espacio extracelular. Son muy abundantes en fluidos corporales como la sangre, saliva, orina y leche. 2) Poseen una bicapa lipídica que contiene además de proteínas específicas vesiculares marcadores típicos celulares. 3) Contienen proteínas citoplásmicas y de membrana además de ácidos nucleicos como mRNAs y microRNAs que se pueden transportar a células vecinas. Se consideran signalosomas por controlar funciones celulares y biológicas fundamentales. Comunicación célula-célula. 4) Participan en procesos fisiológicos como el mantenimiento de células madre, la vigilancia inmune, coagulación sanguínea, la comunicación neuronal etc.. VE: descubrimiento 1983. Hasta 1996 consideradas “basura celular” Vesículas extracelulares en procesos patogénicos 5) El otro lado de la moneda: Están implicadas en procesos patogénicos como la tumorigenesis, la propagación de virus, enfermedades neurodegenerativas como Alzheimer y Parkinson y enfermedades cardiovasculares. 6) Pueden ser potencialmente usados como biomarcadores para enfermedades y como compuestos terapéuticos. The Hallmarks of Cancer The six hallmarks of cancer Hanahan and Weinberg 2000 Cell The Hallmarks of Cancer: The Next Generation Hanahan and Weinberg 2011 Cell * * Tratamiento terapéutico para los pilares del cáncer * * La hipótesis de “SEED AND SOIL” 1858 Virchow: Las metástasis se forman por el anidamiento de una masa tumoral en los vasos. 1889 Stephen Paget: Observación: el cáncer de mama causa metástasis en ciertos órganos. La hipótesis de “Seed and Soil”. El cáncer es la semilla y el microentorno es la tierra fértil. 1929 James Ewing: la localización de la metástasis depende de factores mecánicos como la estructura anatómica de los vasos. A partir de los años 70 se empieza a aceptar la hipótesis de “Seed and Soil”. Establecimiento de una metástasis. Modelo simplificado. Porqué se estabilizan las metástasis de tumores malignos en un órgano sí y en el otro no? 1) El patrón de la circulación entre el sitio primario y el sitio secundario. 2) El órgano diana secreta citoquinas cuyos receptores se encuentran en las células cancerosas. Tropismo del órgano diana. 3) La arquitectura y la disponibilidad de factores de crecimiento en órgano diana. 4) Para desarrollarse a una metástasis activa el cáncer tiene que adaptarse al microambiente y proliferar en él. El microambiente de un tumor El tumor está embebido en el estroma Adenocarcinoma de mama El papel de los exosomas en la progresión del cáncer - Migración tumoral y metástasis - Remodelado del entorno tumoral - Transición tejido epitelial tejido mesenquimal (EMT) - Angiogénesis - Regulación del sistema inmune - Regulación de células tumorales Comunicación bidireccional entre estroma y células tumorales Por un lado, exosomas derivados de células tumorales inducen cambios fenotípicos y funcionales en células estromales causando la diferenciación de fibroblastos y células madre mesenquimales a CAFs activados (fibroblastos asociados al cáncer), que son un componente muy grande del estroma tumoral. Por el otro lado, la gran cantidad de exosomas secretados por CAFs promueven el crecimiento tumoral, la metástasis y la resistencia a fármacos. Fu et al. 2016 J Cancer Res Clin Oncol 142:1892-1907 Vesículas extracelulares como compuestos terapéuticos Pueden ser potencialmente usados como compuestos terapéuticos. Aplicaciones terapéuticas de las vesículas extracelulares HOT TOPIC 1) Uso de las VE como vacuna contra el cáncer. Purificación de las EV de células tumorales y modificación con antígenos tumorales específicos → activación y movilización de células inmunes que eliminan las células tumorales. 2) Uso de las VE como sistema dirigido de portador de fármacos. Los fármacos se introducen en las EV para una mejor biodistribución, estabilidad y menos efectos secundarios.