Sesión 16 - Método Analítico - Espectrofotometría (PDF)
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Instituto Arzobispo Loayza
César Moisés Gómez Salazar
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This presentation details the analytical method of spectrophotometry, including IR, UV, and visible light absorption. It covers the applications in pharmaceutical analysis and discusses equipment used in the laboratory. The session is from the Instituto Arzobispo Loayza.
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SESIÓN DE APRENDIZAJE 16 BIENVENIDOS A NUESTRA AULA VIRTUAL MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA, IR, UV, VISIBLE, ABSORCIÓN ATÓMICA, MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS Docente: César Moisés Gómez Salazar IMPORTANTE : 1. Sé puntual. 2. Mantén micró...
SESIÓN DE APRENDIZAJE 16 BIENVENIDOS A NUESTRA AULA VIRTUAL MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA, IR, UV, VISIBLE, ABSORCIÓN ATÓMICA, MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS Docente: César Moisés Gómez Salazar IMPORTANTE : 1. Sé puntual. 2. Mantén micrófono y cámara desactivados. 3. Para hacer preguntas usa el chat únicamente, espera indicaciones de la maestra. 4. Al terminar la clase, todos los alumnos deben salir de esta. 5. Se respetuoso en todo momento. RECUERDA: 6. Pon atención, pregunta al final para que puedas usar el tiempo designado para resolver dudas Recuerda que la clase en línea puede estar siendo grabada y nuestro reglamento de conducta se aplica para Cualquier falta a este. ¡Disfruta la clase! CONOCER E IDENTIFICAR LOS EQUIPOS Y METODOS ANALITICOS OBJETIVOS CUALITATIVOS Y DE LA SESIÓN CUANTITATIVOS EN EL DE LABORATORIO DE APRENDIZAJE ANÁLISIS Los laboratorios de productos farmacéuticos son lugares en los cuales se realiza el proceso de estudio e investigación de los medicamentos, mediante los análisis cualitativo y cuantitativo , con el objetivo de identificar y determinar su calidad. Para determinar distintos parámetroen excipientes, materias primasy productosfarmacéuticos, se deberán utilizar distintas técnicas además de contar con los equipos adecuadospara el correcto y eficiente proceso de análisis. Muchas de las sustancias de interés farmacéutico presentan en su estructura grupos funcionales con diferentes propiedades físico- químicas que pueden ser detectados mediante algún tipo de técnica Un buen laboratorio farmacéutico debe estar óptica, que actualmente son los métodos más potentes y equipado con instrumentos modernos acorde confiables. a las metodologías actuales de análisis y a los requerimientos propios del laboratorio. La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la detección específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc) sólido, líquido, gas. Los espectrofotómetros son herramientas clave para medir y analizar la luz con precisión , ofreciendo datos objetivos y precisos La radiaciónes la emisión, propagacióny transferenciade energíaen cualquier medio,se presenta en forma de ondas electromagnéticas. Puedo identificar que solución es? Puedo conocersu concentración, su pureza?. Que diferenciaguarda con las radiaciones. La espectrofotometríaUV- El Espectrofotómetro, visible es una técnica Mide la cantidad de luz que analítica CUALITATIVA Y absorbe un compuesto CUANTITATIVA Mide la químico. concentración o cantidad de determinados compuesto mediante un ESPECTROFOTOMETRO. Este método es utilizado para El Espectrofotómetro, detecta la medir cuanta luz absorbe una cantidad de luz transmitida o sustancia química , midiendo la absorbida a través de la solución intensidad de la luz cuando un en la celda , usando una solución haz luminoso pasa a través de Las moléculas tienen blanca para su calibración. la solución muestra. capacidad de absorber radiaciones (Absorción) de diferentes espectros Las moléculaspueden absorberenergía luminosay almacenarla en forma de energía interna. Esto permite poner en funcionamiento ciclos vitales como la fotosíntesisen plantas y bacterias. Todas las moléculas tiene una serie de estadosexcitados (o bandas)que la distingue del resto de moléculas. La absorción de las moléculas a una radiación dependerá a su espectro de absorción ( longitud de ondas) El espectro de absorción constituye una señal de identidad de la misma. La fotoespectrofotometria mide la cantidad de luz abdorbida en Cuando una molécula absorbe Luz (ENERGIA) , pasa funcion a la longitud de honda de estado basal a estado excitado de mayor energía. (excitación de electronesdel enlace ) El espectro electromagnético se compone de todas las clases de radiación en el universo. La luz visible corresponde con la franja del espectro electromagnético que se encuentra entre la radiación ultravioleta e infrarrojo en longitudes de onda entre los 400-700 nm Amayor longitud de onda, menor energía de radiación. A menor longitud de onda, mayor Amenor longitud de onda,mayor energía de radiación. frecuencia y mayor energía. Estos son los espectrofotómetros más utilizados y ampliamente disponibles. Miden la absorbancia o transmitancia de la luz en el rango ultravioleta-visible, generalmente entre 190 nmy 1100 nm. Son utilizados en aplicaciones como el análisis químico, la bioquímica, la investigación farmacéutica y el control de calidad en diversas industrias. 100 % Luz sale 100 %Atraviesa la luz (Transmitancia ) 0% No se absorbe (Muestra- Agua) Luz NO absorción de moléculas Absorbancia es 0 80 % Sale 80 %Atraviesa la luz (Transmitancia ) 20% Se absorbe (Absorbancia) Absorbe 20 % 40 % Sale 40 %Atraviesa la luz (Transmitancia ) 60% Se absorbe (Absorbancia) Absorbe 60 % LEY DE BEER "La intensidad de un haz de luz monocromática, que incide perpendicular sobre una muestra, decrece exponencialmente con la concentración de la muestra“ “La absorbancia era directamente proporcional a la Establece que la absorbancia es proporcional al concentración numero de moléculas absorbentes LEY DE LAMBERT “La absorbancia de una solución es directamente proporcional a la concentración de una solución Además a la longitudy espesor del frasco” La absorbancia (A) Conocida como densidad óptica (DO), es la cantidad o intensidad de luz absorbidapor una solución. La transmitancia (t) Es la cantidad de luz que atraviesa «con éxito» la sustancia y sale por el otro lado https://www.youtube.com/watch?v=G6dh2CBEI6E https://www.youtube.com/watch?v=wS0va4G2UMA FUENTE DE LUZ: Una bombilla situada en el interior es el punto de origen de la luz que usaremos para la medición. COLIMADOR: «doblar» la trayectoria de la luz de manera que los fotones viajen paraleloslos unosa los otros. PRISMA: Separar sus distintas longitudes de onda. Permite elegir la longitud de onda con la que quiere trabajar. RANURA O APERTURA: Permite seleccionar un conjunto específicode longitudes de onda. SOPORTE PARA LA MUESTRA: ¡Aquí es donde va la cubeta! DETECTOR: Estos componentes convierten la intensidad de la luz que cae sobre ellas en una variación de voltaje dentro de un circuito, por lo que transforman la señal lumínica en una señal eléctrica que se puede interpretar medianteun programa informático. Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna el valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que la intensidad incidente y transmitida sean iguales (Io = It), y por tanto la absorbancia es cero. A continuación se pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la absorbanciade ésta. La espectroscopía infrarroja (IR) se basa en el hecho de que la mayoría de las moléculas absorben la luz en la región infrarroja del espectro electromagnético, convirtiéndola en vibración molecular. Esta absorción es característica de la naturaleza de los enlaces químicos presentes en una muestra. Longitud de onda medible 4000- 600 cm- Identificación de compuestos orgánicos e inorgánicos GRUPOSFUNCIONALES La composición mayoritariade la miel de abeja se ve reflejada en el espectro Miel de abejas La miel de abeja es rica en agua y en carbohidratos (azúcares) ejemplo, se ubican a diferentes posiciones y tienen alturas y anchuras diferentes. En el eje de las X´s se encuentra indicada la intensidad de la radiación infrarroja, en número de onda (cm-1 ) y en el eje de las Y´s se encuentra indicadala intensidad de radiacióninfrarrojaabsorbida La regiónde 4000-2500 cm-1. Las bandas que aparecen en esta región se encuentran relacionadas con enlaces de estiramiento de O-H, C-H y N-H. El enlace O-H, del agua, genera una banda muyampliay alta entre 3500 y 3200 cm-1. La región de 2500-2000 cm-1. En caso, de aparecer tales bandas, estas tienen su origen en enlaces triples, por ejemplo, C≡C, C≡O o C≡N. La regiónde 2000-1500 cm-1. En esta región, también llamada de los dobles enlaces, principalmente aparecen los enlaces de vibraciónC=Cy C=O VIVE TU VOCACION desde el primer día ¡GRACIAS!