Uji Kualitatif Protein PDF

Uji kualitatif protein Asri Hendrawati  Protein Protein merupakan pembentuk tubuh, berfungsi sebagai zat utama dalam pembentukan dan pertumbuhan tubuh. Struktur Protein : H R O N C C H H OH GUGU...

Uji kualitatif protein Asri Hendrawati  Protein Protein merupakan pembentuk tubuh, berfungsi sebagai zat utama dalam pembentukan dan pertumbuhan tubuh. Struktur Protein : H R O N C C H H OH GUGUS AMINO GUGUS KARBONIL  Uji pengendapan 1. Pengendapan oleh garam : Garam bersifat menarik air, terjadi kompetisi antara molekul protein dengan garam dalam mengikat air. 2. Pengendapan oleh logam berat: pada suasana pH lebih alkalis dari titik isoelektriknya, protein bermuatan negatif. Penambahan ion logam berat bermuatan positif menyebabkan terjadinya reaksi penetralan muatan sehingga protein mengendap. 3. Pengendapan oleh alkohol pekat : alkohol menarik air sehingga protein mengendap. 4. Pengendapan oleh asam atau reagen alkaloid : Pada suasana pH lebih asam dari titik isoelektrisnya, protein bermuatan positif. Ion negatif dari asam akan menetralkan muatan sehingga protein mengendap.  Contoh reagen alkaloid: asam trikloroasetat, asam fosfotungstat, asam fosfomolibdat, asam perklorat, asam sulfosalisilat.  Reaksi Biuret Uji ini digunakan untuk menguji adanya ikatan peptida. Larutan protein jika ditambah pereaksi Biuret maka akan terbentuk warna merah muda sampai ungu. Perubahan warna karena terbentuk senyawa kompleks antara Cu2+ dengan gugus C=O dan N-H dari rantai peptida. Reaksi Millon-Nassae Untuk mengetahui adanya protein yang memiliki inti fenol, ex: tirosin. Reagen Millon adalah larutan merkuri sulfat dalam asam sulfat, apabila ditambahkan pada larutan protein, akan menghasilkan endapan kuning yang dapat berubah menjadi merah oleh pemanasan. Reaksi ini positif untuk fenol karena terbentuknya senyawa merkuri dengan gugus hidroksifenil yang berwarna merah.  Reaksi Hopkins-Cole Larutan protein yang mengandung triptofan dapat bereaksi membentuk cincin ungu karena adanya Kondensasi 2 inti indol dari trptofan oleh asam glioksilat akan menghasilkan senyawa berwarna ungu. Asam glioksilat memiliki gugus aldehida dan asam karboksilat  Gugus indol pada triptofan Gugus fenol pada tirosin Penggumpalan/koagulasi Uji positif terhadap percobaan ini adalah adanya gumpalan yang tidak dapat larut dalam asam encer maupun basa encer. Albumin dan globulin yang dipanaskan pada suhu tinggi akan terjadi penggumpalan karena adanya denaturasi protein.  Pengendapan kasein Bromkresol hijau merupakan indikator asam basa yang jika ditempatkan di lingkungan asam akan berwarna kuning, jika ditempatkan di lingkungan basa akan berwarna biru. Tujuan penambahan asam asetat pada larutan kasein alkalis adalah untuk mengendapkan kasein pada pH isoelektrisnya (sekitar 4,6).  Pengendapan&penggumpalan metaprotein Metaprotein merupakan hasil hidrolisis protein, larut dalam asam dan alkali encer tetapi tidak larut dalam larutan garam netral. Klor fenol merupakan indicator pH yang akan berubah warna merah jika larutan bersifat basa dan akan berwarna kuning jika larutan bersifat asam. Metaprotein yang dipanaskan mengalami denaturasi yang tidak larut dalam keadaan asam. Endapan tersebut disebut koagulan. Sifat protein yang mengalami koagulasi pada keadaan denaturasi bersifat irreversible dan permanen.  Pengaruh formaldehid terhadap asam amino Fenolftalein merupakan indicator pH yang akan berubah warna merah jika larutan bersifat basa dan akan berwarna kuning jika larutan bersifat asam. Formaldehid menyebabkan asam amino kehilangan sifat basanya karena formaldehid terikat gugus amino dan membentuk asam amino dimetilal. Timbulnya gelembung gas N2 Asam amino ditambah Na-hipobromit akan keluar gelembung gas nitrogen (N2) karena Na-hipobromit akan melepaskan gugus amin dari asam amino membentuk gas N2. Selamat bekerja