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L'extraction du punch est un moment délicat et plusieurs problèmes peuvent se poser : la carotte cutanée reste attachée à la peau : dans ce cas, il suffit de soulever délicatement la carotte avec une pince sans griffe (afin de ne pas écraser le prélèvement) et de couper au ciseau la carotte en pass...

L'extraction du punch est un moment délicat et plusieurs problèmes peuvent se poser : la carotte cutanée reste attachée à la peau : dans ce cas, il suffit de soulever délicatement la carotte avec une pince sans griffe (afin de ne pas écraser le prélèvement) et de couper au ciseau la carotte en passant dans l'hypoderme ; la carotte cutanée reste intégralement dans le punch : dans ce cas, il faut l'extraire avec une pince sans griffe. Hormis en pathologie pédiatrique ou sur le visage, il faut dans la mesure du possible réaliser une biopsie avec un punch de bon diamètre permettant d'examiner l'architecture de la lésion biopsiée (idéalement 4 mm pour l'histologie standard et 3 mm pour une congélation). La réalisation d'un point de suture est souvent nécessaire. Biopsie au bistouri Cette technique est préférable pour l'étude des lésions hypodermiques. Elle trouve également de bonnes indications en pathologie tumorale afin d'examiner un plus grand échantillon. Un fragment cutané en forme de quartier d'orange est prélevé (figure 11.5). Plusieurs points de suture sont en général nécessaires. Artefacts liés au geste biopsique Plusieurs artefacts secondaires au geste peuvent gêner l'interprétation morphologique de la biopsie. Ils peuvent être facilement évités : écrasement de la biopsie par la pince réalisant une fausse impression de densification du derme ou une image pseudo- kystique ; trou lié à l'utilisation d'une aiguille pour extirper la carotte biopsique du punch ; décollement à la jonction dermoépidermique en bordure de biopsie. III. Méthode de conservation de la biopsie Utilisation d'un fixateur Le but de la fixation est la préservation des tissus pour l'analyse morphologique, dite «histologie standard». Le choix du fixateur dépend de l'étude à laquelle la biopsie est destinée : le fixateur le plus communément utilisé est le formol à 10 %. Il permet une étude morphologique correcte et, grâce à la préservation des acides nucléiques, il autorise la réalisation de tous les immunomarquages accessibles sur coupes incluses en paraffine. Il faut immerger la biopsie dans environ 10 à 20 fois son volume de formol et vérifier qu'elle ne soit pas collée à la paroi du flacon ou au bouchon. Le temps de fixation d'un punch biopsique est d'environ 12 heures ; le formol acétique, ou AFA, permet une analyse morphologique de qualité supérieure au formol et la réalisation d'immunomarquages, mais il existe un risque de surfixation et son coût est supérieur ; le glutaraldéhyde est utilisé pour étude en microscopie électronique. La biopsie cutanée doit immédiatement être acheminée au laboratoire en raison du risque de surfixation ayant pour conséquence une étude ultrastructurale de mauvaise qualité ; le liquide de Bouin permettait une analyse morphologique de qualité, mais est de moins en moins utilisé, car il empêche la biologie moléculaire.