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2. Cocci à Gram négatif Neisseria Le genre Neisseria se caractérise par un aspect morphologique particulier: Diplocoque à Gram négatif se présentant sous la forme de grains de café ou diplocoque à face aplatie. Principaux co...

2. Cocci à Gram négatif Neisseria Le genre Neisseria se caractérise par un aspect morphologique particulier: Diplocoque à Gram négatif se présentant sous la forme de grains de café ou diplocoque à face aplatie. Principaux cocci à Gram négatif rencontrés en pathologie Bactéries aérobies strictes, fragiles, exigeantes Catalase + et Oxydase +, et de culture souvent difficile Réservoir humain; Plusieurs espèces commensales peuvent être isolées au sein de la flore oropharyngée de l'homme.  2. Cocci à Gram négatif Neisseria Deux espèces pathogènes sont bien individualisées: N. meningitidis, agent régulièrement identifié lors de cas de méningite cérébrospinale N. gonorrhoeae, agent de la gonococcie, de Cette maladie vénérienne (maladie qui se transmet par contact sexuel) peut entrainer de graves complications chez la femme.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) a. Bactériologie Diplocoques à Gram négatifs accolés « en grain de café », non capsulé Culture sur milieux enrichis contenant du sang cuit, du fer, des vitamines, sous une atmosphère enrichie en CO2. Strictement humain : pathogène spécifique- parasite stricte de l'homme (muqueuses génitales) A la coloration de Gram, il s'agit de diplocoques à Gram négatif, le plus souvent associé à de nombreux polynucléaires dans les formes aigues.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) b. Facteurs de virulence Fimbrea (pili): qui permettent au gonocoque de se fixer sur les cellules du tractus génito-urinaire et sur les spermatozoïdes : facteur de pathogénicité, n’est présent que chez les souches virulentes. seule souche de N. gonorrhoeae est capable de produire des pili avec des compositions antigénique plus de 100 sérotypes connus. les OPA protéines (opaques): médient et fortifient l’attachement aux cellules eucaryotes. Protéine porine, généralement indépendant des pilli qui protègent les gonocoques virulent de la phagocytose et de l’action bactéricide. Empêche la fusion de lysosome et le phagosome.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) b. Facteurs de virulence Protéase IgA1 : détruit les IgA muqueuses qui font partie du système immunitaire local Lipopolysaccharide : LPS a une activité endotoxine, ce dernier est libéré par la lyse cellulaire. Protéines liant le fer : ce sont des protéines de liaison à la transferrine, à la lactoferrine et à l’hémoglobine. La pathogénicité des ssp de Neisseria dépendent d’un approvisionnement en fer constant pour la croissance.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) C. Pouvoir pathogène Chez la femme Le risque de contagion après un rapport sexuel avec un partenaire infecté est 75 à 90%. Cervicite, vulvo-vaginite et urétrite avec écoulement purulent. L’infection peut s’étendre avec une localisations au-delà de l’endocol : salpingites (inflammation des trompes de Fallope, principale cause de stérilité). les localisations extra-génitales sont similaires à ceux de l’homme Gonocoque Chez le nouveau né - Complications oculaires chez le nouveau né  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) C. Pouvoir pathogène Chez l'homme Le risque de contagion après un rapport sexuel avec une partenaire infecté est de 35% en moyenne; La maladie apparait brutalement 2 à 5j plus tard Affection aigue : urétrite avec écoulement purulent et brulures vives à la miction L’infection peut s’étendre aux glandes urétrales, prostate, En se prolongeant : dissémination dans l’organisme, lésion cutanées , arthrites.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) d. Diagnostic 1. Prélèvements Avant tout traitement et si possible au laboratoire. – homme : écouvillonnage d'un pus urétral – femme : écouvillonnages multiples Transport immédiat au laboratoire  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) d. Diagnostic 2. Examen direct : Un étalement de pus après coloration de Gram montre des diplocoques à Gram négatif en grain de café intra-leucocytaires ou extraleucocytaires.  2. Cocci à Gram négatif A/ Neisseria gonorrhoeae (gonocoques) d. Diagnostic 3. Culture : Le gonocoque est un germe fragile. Son ensemencement doit être immédiat. Il pousse en 3 à 5 jrs à 37°C , sous CO2, sur gélose chocolat avec ou sans inhibiteurs des saprophytes. Sa croissance est favorisée par un fort taux d’humidité́. Les colonies sont grisâtres, brillantes et irrégulières L’identification de N. gonorrhoeae repose sur les tests biochimiques: Oxydase +, Catalase + Acidification du glucose, sans production du gaz  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) N. meningitidis est un commensal du nasopharynx de l'homme puisqu'une partie non négligeable de la population est porteur asymptomatique. Bactérie strict de l’espèce humaine. De nombreux sujets sont porteurs sains et jouent un rôle capital ds l’épidémiologie de la maladie (rhinopharynx : 5 à 10% de porteurs). Bactérie très fragile, ne résiste pas ds le milieu extérieur. Chez certaines personnes, la bactérie peut exercer son pouvoir pathogène, et disséminer dans le sang où elle sera à l'origine : * soit d'une septicémie dont la forme la plus grave est le purpura fulminans (mortalité de 30% même traitée) * soit d'une méningite après franchissement de la barrière hémato-méningée.  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) a. Bactériologie Cocci Gram négatif (LPS), Diplocoques accolés en grain de café, anciennement appelé N. intracellularis. Capsules et fimbriae Immobile, non sporulée. Culture sur milieu enrichi (sang cuit, fer, vitamines) sous atmosphère enrichi en CO2. 12 sérogroupes (polysaccharides capsulaires): A - B - C - X - Y - Z - 29E - W135 - H - I - K- L  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) b. Facteurs de virulence – Adhésion aux cellules oropharyngées (rôle des fimbriae) – Echappe à la phagocytose (rôle de la capsule) – Echappe à l'immunité locale (rôle des protéase qui clive les Ig A)  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) c. Pathogénie Pathogène spécifique : Transmission interhumaine directe à courte distance (gouttelettes de mucus). Les méningocoques peuvent franchir la paroi des capillaires et passer dans la circulation générale forme septicémique : meningococcémie ou méningite La libération d'endotoxine est responsable de lésions des vaisseaux sanguins Purpura fulminans dans les formes graves (association de fièvre, de lésions purpuriques vasculaires) Syndrome purpurique : Les lésions cutanées sont rapidement extensives et confluentes, évoluant vers la nécrose.  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) d. Diagnostic 1. Prélèvements Prélèvements (LCR, Hémocultures) acheminés rapidement au laboratoire; Germe fragile (froid, dessiccation) ensemencement immédiat (LCR, hémoculture) ) ou milieu de transport pour les autres prélèvement Autres prélèvements (prélèvement de gorge surtout, éventuellement prélèvement cutané en cas de purpura), mentionner dans la demande d'examen: "recherche de méningocoques", car ces prélèvements polymicrobiens nécessitent l'emploi de milieux spéciaux sélectifs.  2. Cocci à Gram négatif B/Neisseria meningitidis (Méningocoque) d. Diagnostic Caractère culturaux: diplocoque gram négatif , en grain de café, nécessite des milieux riches tels la gélose "chocolat" = au sang cuit, Milieu sélectif VCN, si le prélèvement plurimicrobien, Croissance à 37°C en présence de CO2 après souvent plus de 48h d'incubation. L'identification de cette espèce est biochimique. Produit - une oxydase, - Acidifie le glucose et le maltose (seulement glu pour gono) - Croissance à VCN Recherche d'Ag dans le LCR (A et C): agglutination Amplification génique dans le LCR (PCR)