Maturation, activation et différenciation des cellules T PDF

Maturation, activation et différenciation des cellules T  Les cellules T progénitrices commencent à migrer dès premiers sites de l’hématopoïèse (8e---9esemaine de grossesse) vers le thymus Réarrangements des gènes de TCR + expression de différents marq Sélection positive (ne permet qu...

Maturation, activation et différenciation des cellules T  Les cellules T progénitrices commencent à migrer dès premiers sites de l’hématopoïèse (8e---9esemaine de grossesse) vers le thymus Réarrangements des gènes de TCR + expression de différents marq Sélection positive (ne permet que la survie des cellules T dont le TCR reconnaissant les molécules du CMH du soi) cette sélection élimine les Tincapables de reconnaitre le CMH du soi_____restriction aux molécules du CMH Sélection négative des thymocytes pour éliminer les cellules T qui réagissent fortement avec le CMH du soi ou avec le CMH du soi associé avec des peptides du soi (autoAg)____ tolérance aux molécules du soi  98% ou plus des thymocytes totaux meurent par apoptose dans le thymus. La majorité des cellules mortes sont des thymocytes dont le Rc ne reconnait aucune molécule du CMH de soi. Ce sont des cellules qui meurent car elles ne reçoivent pas de signal de croissance. La différenciation des cellules souches en lymphocytes T dépend bcp d’un Rc membranaire des cellules T (Notch) Il suffit que les cellules stromales en culture expriment le ligand de Notch pour pouvoir induire cette différenciation A Noter : la culture de CSH sur les cellules stromales qui expriment le ligand de Notch permet le dev de ces CSH vers la lignee T.  Les DN3 arrêtent de proliférer et les produits de TCRβ sont détectés dans le cytoplasme de ces cellules. Les chaines β s’associent avec une glycop(chaine pré- Tα)et les molécules de CD3----pré-TCR A Noter : Réarrangement de TCR α ne commence qu’après l’arrêt de la prolifération (gènes de RAG-1 et 2 sont actifs mais la protéine RAG-2 est rapidement dégradée dans ces cellules au cours de prolifération) La formation de pré-TCR active une cascade de transduction de signal qui entraine : Sélection des ly ayant la chaine β pour expansion et maturation ultérieure Activation de réarrangement de la chaine α du TCR DN3-----DN4 ayant le niveau de CD25 qui diminue et CD4 et CD8 qui s’expriment a la surface Progression vers les cellules DP(CD4+8+)  Ces thymocytes DP commencent a proliférer. Réarrangement de TCR α ne commence qu’après l’arrêt de la prolifération Expression de TCR-CD3: les cellules DP n’expriment plus le CD44 et le CD25 mais expriment le TCR-CD3, cette expression va permettre aux thymocytes de subir une sélection positive et négative 98%des thymocytes n’arrivent pas a maturation et meurent par apoptose dans le thymus 1-pas de réarrangement productif des gènes du TCR 2-les thymocytes ne survivent pas a la sélection thymique Les thymocytes DP qui expriment le complexe TCR αβ -CD3 et survivent a la sélection thymique se dev en CD4+SP ou CD8+ SP Ces cellules SP subissent une étape supplémentaire de sélection négative et migrent depuis le cortex vers la medulla ou elles passent dans la circulation sanguine  Les cellules stromales thymiques(cellules épithéliales, macrop, CD) jouent des rôles essentiels dans la sélection + et -. Ces cellules stromales expriment des CMH-I et taux +++ du CMHII et c’est l’interaction des thymocytes immatures exprimant TCR-CD3 avec ces cellules stromales -------sélection + et -. Les chercheurs ont suggéré que l’interaction des thymocytes immatures CD4+/CD8+ avec les cellules épithéliales thymiques médiée par TCR restreintes au CMH permet aux cellules de recevoir un signal protecteur qui les empêche de subir une mort cellulaire et les cellules dont les RC ne sont pas restreints au CMH (incapables de se lier aux CMH) donc qui n’entrent pas en contact avec les cellules épithéliales----pas de signal protecteur-----mort La population de thymocytes restreints au CMH qui survivent a la sélection positive comprend certaines cellules qui ont des RC de faible affinité pour auto-Ag présente par les molécules du CMH du soi ainsi que d’autres cellules ont des RC de haute affinité au CMH Mort par apoptose des cellules T qui sont réactives avec les autoAg- -----la tolérance aux autoAg/tolérance au soi  La sélection positive des thymocytes CD4+8+donne naissance aux cellules T CD8+restreintes au CMH-I et des cellules CD4+restreintes au CMH-II???? 2 modèles pour bien expliquer : Modèle instructionnel : interactions multiples entre TCR, coRC CD8+/CD4+ et CMHI/II----instructions aux cellules de se #cier en cellules SP CD8+ ou CD4+(signaux # si CMHI ou II) Modèle stochastique : expression de CD4 ou de CD8 est arrêtée au hasard sans relation avec la spécificité du TCR. Seuls les thymocytes dont TCR et coRC restant reconnaissant la molécule de même classe du CMH deviendront matures  Les étapes finales de la maturation ------sous-populations CD4+ et CD8+ L’activation des cellules T périphériques commence par interaction TCR/peptide+CMH. Vue la faible avidité du TCR, l’implication de coRc+autres molécules accessoires renforce l’interaction TCR-Ag-CMH-----transduction du signal d’activation. L’activation conduit a la prolifération + #ciation des cellules T en Teffectrices+mémoires  reconnaissance de l'antigène par les cellules T est restreinte au CMH (activation des cellules T dépend de l'antigène traité et présenté par le complexe CMH). La maturation des cellules T progénitrices dans le thymus et l'activation des cellules T matures dans la périphérie sont influencées par la participation des molécules du CMH.  développement des cellules T est un processus coûteux et +++ pour l'hôte car les anticorps sont inutiles contre les antigènes intracellulaires. Elles passent du thymus dans le système circulatoire et gagnent les organes lymphoïdes secondaires (ganglions lymphatiques en particulier). Le récepteur des cellules T est étroitement associé à la CD3, un complexe de chaînes polypeptidiques (2 hétérodimères) impliquées dans la transduction du signal. La queue cytoplasmique de CD3 contient des motifs appelés ITAM (motif d'activation immunoreceptor tyrosine-based) qui interagissent avec des tyrosines kinases et jouent un rôle important dans la transduction du signal+ chaine ζ qui porte 3motifs ITAM chacune. Le TCR porte 10 ITAM en tout Des molécules membranaires accessoires des cellules T sont +++ : Les cellules T expriment des molécules membranaires, y compris les CD4, CD8, CD2, LFA-1, CD28, et CD45R, qui jouent un rôle accessoire dans la fonction des cellules T ou dans la transduction du signal.  Activation des cellules T Étape 1: fixation de l'antigène L’événement central de la création des RI humorale ou cellulaire est l’activation et l’expansion clonale des cellules T par le peptide antigénique apprêté et lié à une molécule de CMH I(CD8+) ou de classe II(CD4+) à la surface Initiation de l’activation des cellules T : interaction TCR-CD3 et un peptide Ag apprêté et lié à une molécule de CMH II à la surface d’une cellule présentatrice de l’Ag  Après ce contact des TCR des cellules T avec l’Ag des nombreux gènes sont activés : 1-les gènes immédiats : exprimés une demi heure après la reconnaissance; ils codent de nombreux facteurs de transcription : c-Fos, c-Myc, c-Jun, NF-AT et NFkB 2-les gènes précoces : exprimés 1-2h après la reconnaissance, ils codent l’Il-2, Il-6, IFN-g et autres protéines 3-les gènes tardifs : exprimés 2j après et codent à # molécules d’adhésion Ces profonds changements sont les résultats des voies de transduction du signal activées par la rencontre entre TCR et complexe CMH-peptide Ces facteurs de transcription régulent la transcription d’IL-2  L’interaction entre TCR et CD4 est stabilisé par des contacts multiples entre : 1-La protéine kinase de transduction du signal (lck) 2- CD4 3-Homodimère ζζ du complexe CD3 *Dans une cellule T au repos cette protéine (protéine kinase), essentielle pour l’initiation de la signalisation du TCR, est a l’écart du complexe TCR *est normalement trouvée dans les radeaux lipidiques. 1-Avant engagement, le TCR est exclu de ces domaines 2-Lors de l’engagement du complexe TCR avec peptide-CMH le complexe TCR s’associe aux radeaux suivi de la formation de grappes de coRC CD4 ou CD8 qui se lient aux régions invariables de CMH La kinase(lck) se trouve alors à côté des queues cytoplasmiques du ζ et du CD4 Génération des tyr-P dans ITAM de zêta----site d’ancrage de ZAP70 qui catalyse la P de certaines protéines adaptatrices(LAT) Dans les cellules T une des Fn principales du trio AP-1, NFAT et NFkB est d’agir ensemble afin de stimuler la transcription d’IL-2 Ceci assure que la sécrétion d’IL-2 n’est produite que dans des circonstances précises  Étape 2: signaux de costimulation sont requis pour l'activation complète des cellules T et la survie Cette interaction et les signaux activateurs impliquent aussi # molécules membranaires accessoires présentées sur la cellule T et la CPA et l’interaction d’une cellule TH et d’un Ag initie alors l’entrée de la cellule T au repos dans le cycle cellulaire (à proliférer et se différencier en Teffectrices + Tmémoires)  La reconnaissance par une cellule Th d’un complexe peptide Ag- CMH------activation et expansion clonale ou anergie clonale L’absence de signal de costimulation amène à une anergie clonale des cellules Th L’anergie est un état d’inactivation des cellules à proliférer en réponse à un complexe peptide-CMH  Activation dépend d'un signal induit par l'engagement du complexe TCR et un signal de co-stimulation induite par l'interaction CD28-B7. l'activation des lymphocytes T induit la transcription du gène de l'IL-2 et la chaîne α du récepteur d’IL-2 de haute affinité. En outre, le signal de co-stimulation entraine l'augmentation de la demi-vie de l’ARNm d’IL-2 Sécrétion d'IL-2 et sa liaison à la suite au RC d'IL-2 de haute affinité induit l'activation des cellules T naïves (CD4 +) pour proliférer et se différencier en populations de cellules T mémoire ou effectrice En absence de costimulation CD28 les cellules T connaissant un Ag spécifique produisent des Q d’IL-2 faibles ne prolifèrent pas. Les cellules T activées engagées se divisent 2 -3fois par jour pendant 4-5jours créant un large clone de cellules qui sont capables de se différencier en cellules effectrices + cellules mémoires  Étape 2: signaux de costimulation sont requis pour l'activation des cellules T Les cellules T naïves nécessitent 2 signaux distincts pour l’activation et la prolifération subséquente en cellules effectrices : Signal 1 = signal initial : est crée par interaction d’un peptide Ag et du complexe TCR-CD3 étape spécifique de l’Ag Signal 2 = signal ultérieur de costimulation non spécifique de l’Ag est fourni essentiellement par les interactions entre CD28 de la surface de T et les membres de la famille B7 de la surface de l’APC “les molécules B7 sont des membres de la famille des Ig avec un domaine qui ressemble à V et l’autre à C : B7-1 et B7-2 avec domaines extracell semblables et domaines cytosoliques trop # Les ligands de B7-1 et B7-2 sont CD28 et CTLA4 qui agissent de façon antagonistes CD28 _____ signal de costimulatio + à T CTLA4 ____ signal inhibiteur de l’activation de T Le CD28 est exprimé sur T au repos et T actives CTLA4 est exprimé après l’engagement de TCR (24 h après stimulation et max en 2 ou3j) Les pics de CTLA4 sont plus faibles que ceux de CD28 mais vue sa grande avidité(20 fois plus) alors elle se fixe sur B7 Les signaux de freinage par CTLA4 sont importantes dans l’homéostasie des lymphocytes  expériences avec des souris knock-out CTLA-4. cellules T chez ces souris prolifèrent massivement, ce qui conduit à une adénopathie (ganglions lymphatiques grandement élargie), splénomégalie (rate), et la mort de 3 à 4 semaines après la naissance.De toute évidence, la production de signaux d'inhibition par l'engagement de CTLA-4 est important dans l'homéostasie lymphocytaire.CTLA- 4 peut effectivement bloquer la co-stimulation CD28 par inhibition compétitive sur le site B7. une capacité qui est prometteuse pour l'utilisation clinique dans les maladies auto-immunes et transplantation B7 (APCs)-CD28 (T cells) costimulatory signal is a crucial costimulatory signal CTL-A4 or CD152 Les cellules T activees doivent agir sur tt cellule infectee par un virus que La cellule exprime ou non des molecules costimulatrices  Une caractéristique de la phase d’initiation de la signalisation du TCR est la formation une structure supramoléculaire appelée synapse immunologique ou SI La SI est une structure dynamique et organisée qui se forme au niveau des régions de contact entre cellule T et CPA La région centrale de la SI est fortement enrichie en complexes TCR/CD3 ainsi que d’autres protéines de signalisation intracellulaires associées au complexe TCR tandis que l’anneau extérieur en forme de beignet contienne des molécules d’adhésion comme LFA-1 L’activation de la cellule T est plus efficace si une SI est formée L’implication d’un seul peptide présenté par TCR-peptide induit la libération des ions Ca2+ el le max est obtenu dans TCD4+ quand 10 complexes TCR-peptide sont engagés  Les molécules d'adhésion cellulaire facilitent Interactions médiées par TCR CD2 et l'intégrine LFA-1 sont des molécules d'adhésion cellulaire à la surface des cellules T qui se lient respectivement aux LFA-3 et ICAM (molécules d'adhésion cellulaire sur les cellules présentatrices d'antigènes et les différentes cellules cibles(infectées ou modifiées (tumeur)) permettent le prolongement de l'interaction entre les cellules.  Etape 3 : Differentiation des cellules T CD4 et CD8, quittent le thymus et entrent dans la circulation en tant que cellules au repos en phase G0(cellules naïves CD4 + ou CD8 +). Il y a environ deux fois plus grand nombre de cellules T CD4 + en cellules T CD8 + dans la périphérie. Les cellules T circulrent continuellement entre le sang et la lymphe Les cellules T qui n’ont pas reconnu un Ag (Tnaives) : chromatine condensée, peu de cytop et faible transcription. Au cours de recirculation, les lymphocytes T naïfs résident dans les tissus lymphoïdes secondaires comme les ganglions lymphatiques où la cellule T rencontre l'antigène sinon il en sort par un Vx ly efférent--- sang Les cellules T activées générent les cellules T effectrices et les cellules T mémoire Si une cellule T naïve reconnaît un complexe antigène-CMH sur une cellule présentatrice d'antigène appropriée ou la cellule cible, elle sera activée Environ 48 heures après l'activation, la cellule T naïve se développe en cellule blastique et commence la division cellulaire.  Les cellules T se differencient en plusieurs sous populations effectrices fonctionnellement differentes les cellules effectrices CD4 se # en *TH1 restent liées aux macrophages qui affichent les complexes peptide-CMH de classe II *TH2 restent liées à des cellules B qui affichent peptide- CMH de classe II *Treg, TH17 * TCD8cytotoxiques = CTL se lient étroitement à des cellules cibles infectées par des virus qui affichent les complexes peptide-CMH de classe I.  Les différentes cellules T effectrices exercent des fonctions spécialisées telles que la sécrétion de cytokines et d'aider les cellules B (cellules activées TH CD4) et l'activité cytotoxique (CD8 CTL) a-Un lymphocyte T effecteur CD4 a deux sous-populations qui se distinguent par les différents panels de cytokines qu'elles sécrètent : 1-Une population, appelé le sous-ensemble TH1, sécrète l'IL-2, IFN et le TNF. Le sous-ensemble TH1 est responsable de fonctions classiques à médiation cellulaire, tels que l'hypersensibilité de type retardé et l'activation des lymphocytes T cytotoxiques. 2-L’autre sous-ensemble appelé le sous-ensemble TH2, sécrète l'IL-4, IL-5, IL-6 et IL-10. Ce sous-ensemble fonctionne plus efficacement en tant qu'aide à l'activation des lymphocytes B. Les lymphocytes TH naifs ne sont activés que par les cellules dendritiques, alors que les cellules TH mémoire peuvent être activées par les macrophages, cellules dendritiques et les cellules B. On pense que l'expression d'un niveau élevé des molécules d'adhésion par des nombreuses cellules TH mémoire permet à ces cellules d'adhérer à un large spectre de cellules présentatrices d'antigène. Des molécules de la famille TNF peuvent transmettre des signaux costimulateurs comme CD40(présent sur DC) et se lie avec CD40L(présent chez T). La reconnaissance CD40-CD40L----- signialisation bidirectionnelle La molécule 4-1BB(T) et 4-1BBL(DC activées ou macro et Ly B) Ces # molécules permettent un dialogue entre les cellules T avec CPA et une activation bidirectionnelle  la population des lymphocytes T mémoire est issue des deux cellules T naïves et des cellules effectrices après avoir rencontré l'antigène. Les cellules T mémoire ont généralement une longue durée de vie et répondent avec réactivité accrue au même antigène, générant une réponse secondaire. Une population élargie de cellules T mémoires semble rester longtemps après que la population de lymphocytes T effecteurs ait diminué. En général, les cellules T mémoires expriment de nombreux marqueurs de surface cellulaire comme cellules T effectrices. On pense que l'expression d'un niveau élevé de molécules d'adhésion par les cellules de nombreux TH mémoire permet à ces cellules d'adhérer à une large gamme de cellules présentatrices d'antigène.  C-Les cellules T cytotoxiques: Les lymphocytes T cytotoxiques ou CTL, sont générés par activation immunitaire des lymphocytes T cytotoxiques (TC). Ces cellules effectrices ont une capacité lytique et sont essentielles à la reconnaissance et l'élimination des cellules modifiées (par exemple, les cellules infectées par des virus et des cellules tumorales) et dans les réactions du rejet du greffon. En général, les CTL sont CD8 + et sont donc restreintes aux CMH de classe I. Puisque pratiquement toutes les cellules nucléées dans le corps expriment les molécules du CMH de classe I, CTL capables de reconnaître et d'éliminer presque n'importe quelle cellule du corps altérée. La réponse CTL peut être divisée en deux phases, ce qui reflète les différents aspects de la réponse. La première phase active : différencie les lymphocytes TC en LTc effecteurs fonctionnels. Dans la deuxième phase : LTc effecteurs reconnaissent les antigènes de CMH classe I sur les cellules cibles spécifiques, ce qui conduit à détruire les cellules cibles.  CTL effecteurs sont générés à partir des précurseurs : cellules naives qui sont incapables de tuer les cellules cibles et sont donc appelées «précurseurs CTL (CTL-P) pour désigner leur état fonctionnellement immatures. Ce n'est qu'après l’activation des CTL-p que cette cellule se différencie en CTL fonctionnel avec une activité cytotoxique. Génération de CTL à partir de CTL-Ps semble nécessiter au moins trois signaux séquentiels: 1-Un signal spécifique de l'antigène transmis par le complexe du TCR et la reconnaissance d'un peptide complexe aux molécules du CMH de classe I 2-Un signal de co-stimulation transmise par l'interaction CD28-B7 du CTL-P et la cellule présentatrice d'antigène. 3-Un signal induit par l'interaction de l'IL-2 avec Rc haute affinité d’IL-2 ce qui entraîne la prolifération et la différenciation de CTL-P activé par l'antigène en LTc effecteurs. CTL-Ps inactifs n'expriment pas d'IL-2 ou récepteurs d'IL-2, ne prolifèrent pas, et n’affichent pas une activité cytotoxique. Dans certains cas, la quantité d'IL-2 sécrétée par CTL-P activées par un antigène peut être suffisante pour induire sa propre prolifération et sa différenciation.  L’activation d’un CTL-p est le résultat de la reconnaissance d’un Ag présente dans le contexte CMH I d’une CPA mais on ne connait pas les facteurs nécessaires Des nouvelles données montrent que le CPA doit d’abord acquérir la capacité d’activer les CTL-p par des interactions préalables par un processus d’éducation ou “LICENSING” Ce licensing peut avoir lieu par l’interaction CPA-TH1 via un Ag présenté dans le contexte d’une molécule CMH II Cette éducation nécessite aussi un signal de costimulation via l’interaction CD40(DC) et CD40L(TH1) Cette éducation peut encore avoir lieu par des TLR de cellule dendritique avec un produit microbien Le rôle de TH1 dans la génération d’un CTL a partir de CTL-p naifs n’est pas tout a fait défini FIGURE 9–6 Role of CD40 in T cell activation. Naive T cells are activated by peptide-MHC complexes on activated APCs. Antigen recognition by T cells together with costimulation (not shown in the figure) induces the expression of CD40 ligand (CD40L) on the activated T cells. CD40L engages CD40 on APCs and may stimulate the expression of B7 molecules and the secretion of cytokines that activate T cells. Thus, CD40L on the T cells makes the APCs “better” APCs, and thus promotes and amplifies T cell activation. 95 96  Additionally, TH1 can induce the up-regulation of co-stimulatory molecules on the surface of antigen- presenting cells APCs (licensing process). In this manner, TH1 cells help CTL-P division and differentiation by causing the generation of adequate levels of co-stimulation. 98  Une fois éduquée la DC doit interagir avec le CTL-p via l’Ag présenté par une molécule du CMH I pour achever son activation en CTL (on ne sait pas si le contact entre DC et les 2 types des cellules T doit être concurrent ou simultané) La nécessité absolue que les 2 cellules TH1 et TC reconnaissent l’Ag avant que la cellule T ne soit activée pour devenir CTL garantit une protection contre une auto réactivité des cellules cytotoxiques Présentation croisée permet la présentation d’Ag exogènes a la fois par les molécules CMH I et II ceci permet une reconnaissance simultanée par les 2 types de cellules CD8+ et CD4+ d’un même Ag présenté par DC dans le contexte I et II Cette particularité fait de DC un réservoir d’Ag viraux vers lequel CTL et TH1 peuvent être dirigés pour générer des CTL contre des virus ayant des profils d’infection tissus-spécifiques(rencontrer de CTL avant que l’infection ne soit bien établie)  Après l’élimination de l’Ag le niveau de l’IL-2 décroit ce qui induit la mort programmée par apoptose des cellules TH1 et des CTL Diminution de la probabilité de lésions tissulaires non spécifiques par une réponse inflammatoire  La formation d’un conjugué`CTL-cellule cible`conduit dans les minutes qui suivent a`une étape Ca2+-dépendante nécessitant de l’En au cours de laquelle le CTL programme la mort de la cellule cible Dans une période de temps variable (qlq h) suite a la dissociation du CTL la cellule cible meurt par apoptose Le complexe TCR-CD3 d’un CTL reconnait l’Ag –CMH I Apres liaison LFA-1 et ICAM ou l’activation de CTL par l’Ag ----- passage LFA-1`d’un état faible affinité _____forte En raison de ce Ph les CTL n’adhérent qu’aux cellules cibles On pense qu’une chute de l’affinité du LFA1 facilite la dissociation du CTL de la cellule cible  La mort apoptotique est une fonction importante de l’homéostasie lymphocytaire. L’apoptose élimine les thymocytes auto réactifs (sélection -/+) Les cellules se protègent de la mort par apoptose en temps normal en maintenant les caspases sous forme inactives A réception d’un signal de mort certaines caspases s’activent et activent les autres caspases effectrices Les cellules T utilisent 2 voies # pour activer les caspases Les cellules T périphériques suite a une stimulation Ag ___ prolifération des cellules T + production de # cytokines (IL-2) 1- Après activation les cellules T augmentent leur expression des 2 protéines de surface clés impliquées dans la mort apoptique des cellules T : Fas et son ligand FasL____ mort de T induite par activation(AICD)___ mécanisme général de l’homéostasie des cellules T___mort rapide en 2-4h 2-mort via le TCR_____voie apoptotique dependant des mitochondries___ activation des caspases ______8-10h  1 - CTL induit perforine / granzymes CTL adhérent avec les cellules cibles appropriées qui affichent des peptides antigéniques associés aux molécules du CMH classe I (antigènes provenant de la voie endogène, virus, tumeurs, les cellules étrangères de la transplantation ou une transfusion). Aussi la prolifération des cellules Th1-------libération d'IL-2 et permet la différenciation des CTLs (expression du facteur de co-stimulation, les molécules d'adhésion...). Contact de CTL à la cellule cible ____ production des monomères de 65-kDa formant des pores appelée perforine et plusieurs sérine protéases appelées granzymes ou fragmentines CTL-P (précurseur) n’a pas des granules cytoplasmiques contenant la perforine et les granzymes Après activation, les granules cytoplasmiques apparaissent dans le cytoplasme et après sa conjugaison avec la cellule cible ces granules s’associent dans la zone du contact. Les monomères de perforine après le contact avec la membrane des cellules cibles subissent un changement de conformation et s'insèrent dans la membrane cible cellulaire; puis polymérisation des monomères (en présence de Ca2 +) pour former des pores cylindriques d'un diamètre de 5-20 nm. Un grand nombre des pores a perforine sont visibles sur la membrane des cellules cibles dans la région de conjugaison. les pores de la membrane formés par la perforine sont similaires à ceux observés en lyse par complément. Figure: formation de pores CTL à médiation cellulaire membrane cible. (A) une augmentation de la concentration intracellulaire de Ca2 + provoquée par l'interaction des cellules CTL-cible (1) induit l'exocytose, dans laquelle les granules fusionnent avec la membrane cellulaire CTL (2) et la libération de perforine monomère dans le petit espace entre les deux cellules (3). Les monomères de perforine libérée subissent un changement de conformation induite Ca2 + qui leur permet de s'insérer dans la membrane des cellules cibles (4). En présence de Ca2 +, les monomères se polymérisent dans la membrane (5), formant des pores cylindriques (6).  2 - CTL entrainent apoptose de cellules cibles par Fas : Certaines CTL ont montré l'absence de perforine et les granzymes. Dans ce cas, la cytotoxicité est médiée par Fas, une protéine transmembranaire, qui est un membre de la famille du TNF-récepteur, peut délivrer un signal de la mort quand réticulé par son ligand naturel, un membre de la famille de nécrose des tumeurs appelée ligand Fas. ligand Fas (FasL) se trouve sur la membrane de CTL, et l'interaction de FasL avec Fas sur la cellule cible déclenche l'apoptose. Une autre sous population des lymphocytes T : TReg Sont identifiés par la présence de CD4 et CD25 sur leur membrane Sont des régulateurs négatifs de la RI : humorale ou cellulaire Les lymphocytes Treg inductibles sont marques par FOXP3 : facteur de transcription régulateur majeur dans le développement et le fonctionnement des TReg TReg peuvent inhiber la prolifération in vitro des différentes populations de T En effet TReg empêchent la transcription d’IL-2(essentiel pour la prolifération et la différenciation en T effecteurs()  Il existe deux types de TReg : 1-T Reg naturels : se forment dans le thymus 2- Treg induits : qui se développent a partir des cellules T matures conventionnelles sous l’effet de TGFβ et d’IL-10, n’apparaissent pas dans le thymus mais plutôt dans les organes lymphoïdes secondaires ou TGFβ induit l’expression de FOXP3 ces TRegi secrètent par la suite d’IL-10 et de TGFβ qui exercent leurs fonctions suppressives Déplétion de TRegi entraine des maladies auto- immunes chez les animaux de même des études récentes montrent que ces cellules ont un role important dans la tolérance fœto- maternelle FIGURE 9-10 How regulatory T cells inactivate traditional T cells. Some possible mechanisms of TREG activity are illustrated in this schematic. These may all contribute to quelling immune responses in vivo. (1) Cytokine deprivation. TREGs express relatively high levels of high-affinity IL-2 receptors and can compete for the cytokines that activated T cells need to survive and proliferate. (2) Cytokine inhibition.TREGs secrete several cytokines, including IL-10 and TGF-β, which bind receptors on activated T cells and reduce signaling activity. (3) Inhibition of antigen presenting cells. TREGs can interact directly with MHC Class II expressing antigen-presenting cells and inhibit their maturation, leaving them less able to activate T cells. (4) Cytotoxicity. TREGs can also display cytotoxic function and kill cells by secreting perforin and granzyme.