Sélection Thymique PDF

Organisation cellulaire du thymus CORTEX -cellules épithéliales corticales (CEC) -macrophages -thymocytes (DN et DP) JONCTION CORTICO-...

Organisation cellulaire du thymus CORTEX -cellules épithéliales corticales (CEC) -macrophages -thymocytes (DN et DP) JONCTION CORTICO- MÉDULLAIRE -entrée des précurseurs hématopoiétiques -cellules dendritiques (DC) -thymocytes DP MÉDULLA -cellules épithéliales médullaires (MEC) -cellules dendritiques (DC) -thymocytes (CD4SP et CD8SP) Figure 2-12 Kuby  CD4SP Périphérie DP RCT+ Sélection positive CD8SP Périphérie Sélection négative  SÉLECTION DU RÉPERTOIRE -lors du développement des lymphocytes T dans le thymus -élimination des lymphocytes T exprimant un RCT autoréactif (sélection négative) -survie des lymphocytes T exprimants un RCT capable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH du soi (restriction par le CMH, sélection positive) -mort des lymphocytes T ayant un RCT incapable d’interagir avec les molécules de classe I ou II du CMH -mort des lymphocytes T n’exprimant pas un RCT Preuve du rôle du thymus dans la sélection du répertoire Zinkernagel et collaborateurs, 197  Est-ce que les cellules dendritiques (d’origine hématopoïétique) peuvent induire la sélection positive? lection positive et négative dans le thym Mort par négligence (RCT incapable d’interagir avec le CMH du soi) Sélection positive (RCT interagissant avec le CMH du soi) CORTEX (cellules épithéliales) Sélection négative (RCT de trop haute affinité pour le CMH du soi) (cellules dendritiques dérivées Survie des cellules T de la moëlle osseuse) restreintes au CMH du soi et non JONCTION CORTICO- auto-réactives MÉDULLAIRE MÉDULLA Effet de l’absence des molécules de classe I ou de classe II du CMH sur le développement des thymocytes DN DP CD4SP CD8SP  Formation et sélection de cellules ES recombinantes de souris où un gène cible est invalidé Fig 20.25 de Kuby Production de souris KO Fig 20.26 de Kuby  Est-ce que l’absence des molécules de classe I et II du CMH va affecter la génération des thymocytes DP?  Est-ce que l’absence des molécules de classe I du CMH va affecter la génération des thymocytes CD4SP?  Est-ce que l’absence des molécules de classe II du CMH va affecter la génération des thymocytes CD4SP? Effet de l’absence des molécules de classe I ou de classe II du CMH sur le développement des thymocytes DN DP CD4SP CD8SP  Preuve expérimentale de la sélection positive Cellule cible infectée Clone de cellule Tc par le virus de la grippe (H-2k) Souris transgéniques pour les gènes du RCT Thymocytes RCT+CD4+CD8+ (DP) RCT+CD8+ (CD8SP) Création de souris transgéniques Fig 20.24 de Kuby euve expérimentale de la sélection négativ Von Boehmer et Kisielow 1988 Est-ce que nous retrouverons les mêmes populations de thymocytes (DN, DP, CD4SP et CD8SP) chez le mâle et la femelle?  Quelle population de thymocytes sera absente chez le mâle? euve expérimentale de la sélection négativ -- - Von Boehmer et Kisielow 1988 onnaissance des superantigènes par les cellule ex. toxine bactérienne ex. protéine virale de MMTV SEA, SEB... (intégré dans le génome) -pas d’apprêtement -pas de restriction au CMH -liaison du RCT via la région Vb -grande proportion de cellules T répondent reuve expérimentale de la sélection négativ résence de thymocytes CD4+CD8+ exprimant un RCT ntenant une chaîne b spécifique pour le superantigène endogène bsence de thymocytes et de cellules T matures CD4SP ou CD8SP utilisan aînes b du RCT spécifiques pour le superantigène endogène Kappler et collaborateurs, 1987  RÉCAPITULATIF Stade du développement Thymocytes DP Thymocytes DP et SP  Problème central de la sélection thymique -sélection positive: survie des thymocytes réactifs contre le CMH du soi -sélection négative: élimination des cellules autoréactives Comment le processus de sélection négative n’élimine pas tout le répertoire sélectionné ? HYPOTHÈSE DE L’AFFINITÉ (AVIDITÉ) Le niveau d’intensité des signaux médiés par le RCT reçus par le thymocyte détermine l’issue de l’interaction  AFFINITÉ/AVIDITÉ Culture d’organe thymique lobe thymique jour 16 gestation (DN) souris TAP déficiente (classe I intracytoplasmique, sans peptide) souris RCT transgénique (spécifique pour le peptide abcdabcd présenté par classe I) pas de peptide peptide abcdabcd peptide abcdabcd quantité x (avidité) quantité xxx ou ou peptide ab’cdabcd peptide abcdabcd affinité x affinité xxx pas de sélection (DP) sélection positive (CD8SP) sélection négative (peu DP, pas SP) hoix de différenciation vers la voie CD4 ou CD8 Instructif Stochastique Cinétique de la liaison Effet de l’affinité du RCT pour son ligand Lors du développement du lymphocyte T Lymphocytes T matures Goldrath and Bevan 1999. Nature 402:255-26 EXERCICES EN CLASSE SUR LE DÉVELLOPPEMENT THYMIQUE Un thymocyte se différencie dans le thymus d’une souris H-2b; exprimant les molécules du CMH Kb, Db et I-Ab. Suite au réarrangement des chaînes a et b du récepteur spécifique des cellules T (RCT), ce thymocyte exprime un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe lorsque présenté par la molécule de classe II du CMH I- Ab. Ce thymocyte sera t’il sélectionné positivement? A. Oui, par les cellules épithéliales corticales B. Non, car les cellules dendritiques n’expriment pas la molécule du CMH pour lequel le TCR de ce thymocyte est restreint C. Oui, par les cellules dendritiques de la médulla thymique D. Non, puisque le peptide du virus de la grippe est absent du thymus de ces souris Un thymocyte se différencie dans le thymus d’une souris H-2b; exprimant les molécules du CMH Kb, Db et I-Ab. Suite au réarrangement des chaînes a et b du récepteur spécifique des cellules T (RCT), ce thymocyte exprime un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe lorsque présenté par la molécule de classe II du CMH I- Ab. Si ce thymocyte parvient à compléter sa maturation et à coloniser les organes lymphoïdes périphériques, quel(s) co-récepteur(s) exprimera t’il? A. CD4 B. CD4 et CD8 C. CD8 D. Aucun Un thymocyte se différencie dans le thymus d’une souris H-2b; exprimant les molécules du CMH Kb, Db et I-Ab. Suite au réarrangement des chaînes a et b du récepteur spécifique des cellules T (RCT), ce thymocyte exprime un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe lorsque présenté par la molécule de classe II du CMH I-Ab. Vous effectuez une culture de lobe thymique fœtal (de la souris décrite dans l’énoncé) à laquelle vous ajoutez une très forte concentration du peptide du virus de la grippe. Selon le modèle de l’avidité, vous observerez l’effet suivant sur la différenciation du thymocyte décrit dans l’énoncé. A. Il n’y aura aucun effet sur la différenciation de ce thymocyte B. La sélection positive sera très efficace C. Il y aura sélection négative du thymocyte D. Il n’y aura ni sélection positive ni sélection négative Un thymocyte se différencie dans le thymus d’une souris H-2b; exprimant les molécules du CMH Kb, Db et I-Ab. Suite au réarrangement des chaînes a et b du récepteur spécifique des cellules T (RCT), ce thymocyte exprime un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe lorsque présenté par la molécule de classe II du CMH I- Ab. Quelle conséquence aurait l’inactivation du gène Rag-1 sur le développement des thymocytes? A. Aucun effet B. arrêt de la différenciation thymique au stade DP (CD4+CD8+) C. arrêt de la différenciation thymique au stade DN3 par défaut d’expression de la chaine alpha du TCR D. arrêt de la différenciation thymique au stade DN3 suite à un échec de la beta-sélection Un thymocyte se différencie dans le thymus d’une souris H-2b; exprimant les molécules du CMH Kb, Db et I-Ab. Suite au réarrangement des chaînes a et b du récepteur spécifique des cellules T (RCT), ce thymocyte exprime un RCT spécifique pour un peptide du virus de la grippe lorsque présenté par la molécule de classe II du CMH I- Ab. Si on produit des souris transgéniques exprimant le RCT de ce thymocyte dans la souche de souris H-2d. Quelles sous-populations de thymocytes retrouverons-nous chez ces souris transgéniques? A. CD4SP (CD4+CD8-) B. DN (CD4-CD8-), DP (CD4+CD8+), CD4SP (CD4+CD8-), CD8SP (CD4-CD8+) C. DN (CD4-CD8-), DP (CD4+CD8+) D. DN (CD4-CD8-), DP (CD4+CD8+), CD8SP (CD4-CD8+)