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MOUCHART Camille 2024 CHAPITRE 5 : BACILLES GRAM + BACILLES GRAM + NON-SPORULÉS Corynebacterium sp., Listeria sp. et Lactobacillus sp. sont des bacille Gram + (mauve) non sporulés. C’est-à-dire qu’ils n’ont...

MOUCHART Camille 2024 CHAPITRE 5 : BACILLES GRAM + BACILLES GRAM + NON-SPORULÉS Corynebacterium sp., Listeria sp. et Lactobacillus sp. sont des bacille Gram + (mauve) non sporulés. C’est-à-dire qu’ils n’ont pas d’endospors. On retrouve le Lactobacillus sp. engendre l’acidification dans le milieu par exemple dans la flore vaginal, yaourt, choucroutte, … BACILLES GRAM + SPORULÉS Clostridium sp. est une bactérie Gram + sporulés et anaérobie. Bacillus sp. est une bactérie Gram + sporulés et aérobies C’est la mise en place d’une endospore (endo= intérieur) quand les conditions environnemental ne lui convient pas (pH, T°, …). On observe que l’endospore n’est pas coloré contrairement au reste de la bactéries car les endospores sont très épaisse. On observe que chez le Clostridium sp. l’endospores est généralement en subterminal déforment. Et chez le Bacillus sp. c’est généralement central non déformant. Les patient atteint de Clostridium sp. sont isolé car il nécessite des protocole de désinfection. 1 MOUCHART Camille 2024 BACILLES GRAM + : NON SPORULÉS ; Corynebacterium ET Listeria 1. ESPÈCES ET PATHOLOGIES Corynebacterium cystitidis provoque des infections urinaires. Corynebacterium pseudotuberculosis est responsable de folliculite qui est une infection de la peau. Corynebacterium ulcerans est responsable de mammite. Listeria monocytogenes peu provoque des avortements chez les mammifères, des septicémies ou encore des méningites. Il passe par le voie digestive et arrive dans les voies sanguinne. Il ce peut que jusqu’à la fin, la maman n’a pas de symptômes. 2. RÉSERVOIRS Corynebacterium cystitidis provient du tractus génital et bovins. Corynebacterium pseudotuberculosis provient de la peau. Corynebacterium ulcerans provient de la peau et des muqueuses. Listeria monocytogenes est ubiquitaire. On les retrouve dans les silos mal tassé ce qui fait que les bactéries sont en aérobiose partielle et le pH supérieur à 5,6. Il y a, dès lors, une croissance élevé des bactéries et donc part la suite très présent dans intestins animaux. Nous pouvons ensuit être atteint part contamination fécale. Le sillage est une technique de conservation des végétaux. Si elle est bien faite il auras une fermentation ce qui acidifiera le milieu et le conservera. 2 MOUCHART Camille 2024 3. DÉFINITION-CLASSIFICATION CORYNEBACTERIUM SP. Famille : Corynebacteriaceae Genre : Corynebacterium Caractères morphologiques et biochimiques : Petits bacilles Gram+ en massue et lettres chinoises Petites colonies blanches Hémolyse variable selon les espèces Catalase + Esculine - Camp test - LISTERIA SP. Famille : Listeriaceae Genre : Listeria Caractères morphologiques et biochimiques : Petits bacilles Gram+ droit en palissade Petites colonies blanches Hémolyse variable selon les espèces Catalase + Esculine + Camp test - → Listeria sp. Camp test + → Listeria monocytogenes ESCULINE L’esculine est un sucre complexe ou tout le monde n’est pas capable de la dégrader. C’est une bonne source d’énergie vue que c’est un sucre si et seulement si on est capable de la dégrader. La bactérie dois donc posséder l’enzyme elsulinase pour transformer l’esculine en glucose et esculetine. Ils ne font rien de l’esculetine mais c’est ce qu’on va observer dans le milieu. L’esculetine est donc encore toujours dans le milieu et devient brun/noire grâce au citrate de fer. Les colonies restent grisâtre. Les selle biliaire sont synthétiser dans le foie et stocker dans la vésicule biliaire et sont relâcher lors de la digestion. La bile inhiber tous ce qui ne lui résiste pas / tous ce qui n’’est pas censé être dans l’intestin. « La bile inhibe tout ce qui n’est pas intestinale ». Les bactéries poussant sur la bile esculine sont les bactéries résistant a cette bile et donc en font partie, les bactérie intestinale. Les bactéries poussant sur la bile sont les bactéries résistant a cette bile et donc en font partie les bactérie intestinale. 3 MOUCHART Camille 2024 Composition de la bile esculine : Éléments du milieu Fonction Tryptone Nutritif Extrait de levure Nutritif Chlorure de sodium Élément osmotique Esculine Nutritif (sucre) Citrate de fer Indicateur Bile Inhibiteur Agar Gélifiant Procéder : 1. Isolement d’une colonie typique 2. 24h/37°C/aérobiose 3. Lecture - Si croissance → Résistant au sels biliaires - Si dégradation de l’esculine (esculinase) → esculétine → esculétine + citrate de Fe → précipité marron à noir → Corynebacterium sp. CAMP TEST Le CAMP test met en évidence une ‘synergie -hémolytique’ en amplifiant la -hémolysine de Staphylococcus aureus ATCC (= American Type Culture Collection). Sur gélose au sang de mouton : 1. Strie de Staphylococcus aureus ATCC 2. Strie perpendiculaire de la souche à tester 3. S’arrêter à 1-2mm de la strie de Staphylococcus aureus 4. 24h/37°C/aérobiose L’hémolyse  en forme de marteau est visible à l’intersection des 2 stries ATCC 4 MOUCHART Camille 2024 4. IDENTIFICATION 1. Après croissance sur gélose au sang (+ANC) 2. Hémolyse →  ou  (selon sp.) 3. Coloration de Gram → petits BG + (association selon sp.) 4. Catalase → + 5. BE A. Si Esculine + → Camp test ou galerie api Listeria B. Si Esculine - → galerie api Coryne 5. DANS LE DOMAINE AGRO -ALIMENTAIRE LISTERIA MONOCYTOGENES Listeria monocytogenes est pathogène par ingestion. C’est une bactérie psychrophile, c’est-à-dire un produits alimentaires de longue conservation. Elle peut engendré de possible gastro : nausées, vomissements, diarrhée, fièvre. Mais surtout des méningites, avortements chez YOPI (Young – Old – Pregnant – Immunodeficient Recherche : VH à consommer crue : absence dans 25g Crèmes glacées : absence dans 25g 5 MOUCHART Camille 2024 BACILLES GRAM + : SPORULÉS ; CLOSTRIDIUM ET BACILLUS 1. ESPÈCES ET PATHOLOGIES Bacillus anthracis est responsable d’Anthrax, c’est une zoonose. Elle peut donner des infection nécrotique au niveau de la peau. C’est une bactérie mortelle. Clostridium difficile et Clostridium perfringens sont responsables de pathologies intestinales (infection du tractus intestinal). Clostridium tetani est l’acteur du Tétanos. Elle est mortelle. 2. RÉSERVOIRS Bacillus anthracis est ubiquitaire. Clostridium difficile et Clostridium perfringens sont dans le tractus intestinal. Clostridium tetani est ubiquitaire. Les Bacillus sp. sont aéro- et anaérobie tandis que les Clostridium sp. sont aérobie stricte. On retrouve donc plus de Clostridium sp. dans l’environnement. 6 MOUCHART Camille 2024 3. DÉFINITION-CLASSIFICATION BACILLUS SP. Famille : Bacillaceae Genre : Bacillus Caractères morphologiques et biochimiques : Gros bacilles Gram+ en chaîne voire isolés Sporulés Grosse colonies grises et rugueuses Catalase + CLOSTRIDIUM SP. Famille : Clostridiaceae Genre : Clostridium Caractères morphologiques et biochimiques : Gros bacilles Gram+ en chaîne voire isolés Sporulés Grosse colonies grises et rugueuses Catalase – Anaérobies strictes CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES ET BIOCHIMIQUES Bacillus Autres Bacillus Clostridium Clostridium Clostridium anthracis tetani perfringens difficile Méthode de Aero- anaérobiose Anaérobiose stricte respiration Spore Centrale Terminale Catalase + - Hémolyse Variable     Camp inverse - + - Clostridium difficile à la particularité d’avoir l’odeur de sueur de cheval. 7 MOUCHART Camille 2024 CAMP INVERSE Le CAMP inverse met en évidence une ‘synergie -hémolytique’ en amplifiant la -hémolysine de Streptococcus agalactiae ATCC (= American Type Culture Collection). Sur gélose au sang de mouton : 1. Strie verticale de Streptococcus agalactiae ATCC 2. Strie perpendiculaire du BG + anaérobie à identifier 3. 24h/37°C/anaérobiose L’hémolyse  en forme de « chapeau de gendarme » à l’intersection. 4. IDENTIFICATION Après croissance sur gélose au sang (+ ANC) 1. Hémolyse →  ou  2. Coloration de Gram → gros BG + en chaîne ou isolé (voire sporulé) 3. Catalase A. Catalase + → Bacillus B. Catalase - (et anaérobie stricte ) → Clostridium 4. Si Clostridium → Camp Inverse Ou MALDI TOF 5. DANS LE DOMAINE AGRO -ALIMENTAIRE BACILLUS CEREUS Elle provoque des intoxination (Il n’y a pas de faute d’orthographe !), qui est une pathologie avec des symptômes de gastro due à l’ingestion d’une toxine former dans l’aliment synthétiser par la bactéries. Donc indirectement lié à la bactérie ! On les retrouve dans les repas collectif de masse car quand il y à de grande quantité́ et riche en féculents (amidon) comme dans le riz, haricots, etc. Il y à germination des spores avant et après cuisson car ils y resistant (et nutriments faciles d’accès). Des toxine thermostable sont produite sur matières premières ou après cuisson. Ce sont des toxines émétiques (= céréulide). C’est donc un pathotype émétique. Des entérotoxine sont produite dans l’intestin. Ce sont des pathotype diarrhéique. 8 MOUCHART Camille 2024 CLOSTRIDIUM BOTULINUM Clostridium botulinum est une souche qui provoquent des symptômes botuliques à cause d’une toxine (neurotoxine). Cette dernière est thermolabile ou thermosensible, elle meurt après cuisson. Elle provoque des intoxination (Il n’y a pas de faute d’orthographe !), qui est une pathologie avec des symptômes de gastro due à l’ingestion d’une toxine former dans l’aliment synthétiser par la bactéries. Donc indirectement lié à la bactérie ! Les neurotoxine bloquent le largage de l’acéthylcholine. L’apparition des symptômes ce fait graduellement : 1. Troubles oculaires (strabisme, difficulté d'accommodation, mydriase) 2. Arrêt des sécrétions naturelles (larmes, salive, mucus nasal,...) 3. Troubles de la déglutition et de l'élocution 4. Paralysie flasque → muscles respiratoires 5. Mort dans 65% des cas Il est possible qu’il y ai contamination de plaies profondes part toxinogénèse (botox). Quelques rares cas de toxi-infection et toxinogénèse chez les nouveau-nés ont été rencontré. CLOSTRIDIUM PERFRINGENS Clostridium perfringens est toxinogène. C’est une endotoxine (entérotoxine) produite lors de la sporulation et libérée lors de la lyse de la spore (germination) intoxination? Symptômes : Diarrhée Crampes intestinales Ni fièvre, ni vomissement Disparition des symptômes : 24-48h En résumé : Espèces Réservoirs Pathogénicité Corynebacterium cystitidis Tractus génital Infections urinaires Corynebacterium Peau Folliculite pseudotuberculosis Corynebacterium ulcerans Peau et muqueuses Mammite Listeria monocytogenes Avortements chez les mammifères, Ubiquitaire septicémies et méningites Bacillus anthracis Ubiquitaire Anthrax Clostridium difficile Tractus intestinal Pathologies intestinales Clostridium perfringens Clostridium tetani Ubiquitaire Tétanos 9