Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales PDF

1 MÓDULO 2 Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales Manipulación, procesamiento, conservación y transporte de muestras biológicas animales Asistente y auxiliar técnico veterinario ADAPTADO A LA CUALIFICACIÓN PROFESIONAL AGA 488_3 “ASISTENCIA A LA ATENCIÓN CLÍNICA EN CE...

1 MÓDULO 2 Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales Manipulación, procesamiento, conservación y transporte de muestras biológicas animales Asistente y auxiliar técnico veterinario ADAPTADO A LA CUALIFICACIÓN PROFESIONAL AGA 488_3 “ASISTENCIA A LA ATENCIÓN CLÍNICA EN CENTROS VETERINARIOS” MÓDULO 2 Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales Obra completa 978-84-16172-14-6 ISBN TOMO I 978-84-16172-97-9 ISBN TOMO II 978-84-16172-98-6 ISBN TOMO III 978-84-16172-99-3 ISBN TOMO IV 978-84-15627-54-8 ISBN TOMO V 978-84-938548-9-8 ISBN TOMO VI 978-84-946100-0-4 D.L. C 1645-2016 Autora Ana Chas Dirección Editorial Beatriz Nespereira Rodríguez Dirección de Arte Edu Evia Portadas Olalla Carrillo Barral y Edu Evia Maquetación Alejandro González Corrección de estilos Laura Álvarez Salgado Revisión pedagógica Carolina Val Ilustraciones Ferrán Sirvent Fotografía Campus Training, Getty Images, Wikimedia Commons, Pixabay, Thinkstock Impresión ULZAMA DIGITAL, S.L. Edición 2023 AGRADECIMIENTOS: Veterinaria Vilaboa Reservados todos los derechos. Ni la totalidad ni parte de este libro puede reproducirse ni transmitirse por ningún procedimiento electrónico ni mecánico, incluyendo fotocopia, grabación magnética ni cualquier al- macenamiento de información y sistema de recuperación, sin el permiso previo o por escrito de las personas titulares del copyright. “Nubika ha puesto todos los medios a su alcance para reconocer en citas y referencias los eventuales derechos de terceros y cumplir todos los requisitos establecidos por la Ley de Propiedad Intelectual. Por las posibles omisiones o errores, se excusa anticipadamente y está dispuesta a introducir las correcciones precisas en posteriores ediciones o reimpresiones de esta obra”. MÓDULO 2 Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales Índice unidades Manipulación, procesamiento, conservación y transporte de 1 muestras biológicas animales 5 Estudio de muestras animales de sangre, orina, heces y otros 2 fluidos corporales 49 Procesamiento de muestras animales para su estudio 3 anatomopatológico 87 Prevención de riesgos laborales en el laboratorio de análisis 4 de muestras animales 121  1 MÓDULO 2 Análisis de laboratorio en muestras biológicas animales Manipulación, procesamiento, conservación y transporte de muestras biológicas animales MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Índice 1 Materiales y equipos básicos del laboratorio de análisis clínicos 11 1.1 Material básico de laboratorio 11 1.2 Equipos 13 2 Reactivos de laboratorio 17 2.1 Reactivos químicos 17 2.2 Reactivos biológicos 18 3 Material de protección, seguridad y contenedores para eliminación de residuos 20 3.1 Gestión de residuos 20 3.1.1 Minimizar o evitar la generación de residuos 21 3.1.2 Separación y envasado de residuos 21 3.1.3 Etiquetado de los envases de almacenamiento 22 3.1.4 Almacenamiento temporal 22 3.2 Tipos de residuos 22 3.2.1 Asimilables a los urbanos 22 3.2.2 Químicos 22 3.2.3 Sanitarios 23 4 Operaciones básicas de laboratorio: preparación de disoluciones y diluciones. Resolución de problemas. Centrifugación de muestras 27 4.1 Disolución 27 4.2 Diluciones 27 4.3 Centrifugación de muestras 28 4.4 Tinciones 28 4.4.1 Tinción simple 28 4.4.2 Tinción compuesta 28 Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 7  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Índice 5 Tipos de muestras: sangre, orina, LCR, semen, exudados u otros 30 6 Parámetros comunes analizables en las muestras biológicas 32 7 Procesamiento de muestras en función de las mismas 34 7.1 Identificación de muestras para analizar en el propio centro 35 7.2 Identificación de muestras para enviar a un laboratorio externo 36 8 Análisis cuantitativo y cualitativo 37 8.1 Análisis cuantitativo 37 8.2 Análisis cualitativo 38 9 Determinación analítica. Batería de pruebas 39 10 Errores de manipulación 40 10.1 Errores en la fase preanalítica 40 10.1.1 Errores en la solicitud de la analítica 40 10.1.2 Errores en la identificación 40 10.1.3 Errores en la obtención de la muestra 41 10.1.4 Errores en el sistema informático 41 10.1.5 Errores de conservación de la muestra 42 10.2 Errores en la fase analítica 42 10.3 Errores en la fase post-analítica 43 10.3.1 Errores en la transcripción de resultados 43 10.3.2 Errores en el cálculo de magnitudes 43 10.3.3 Errores en la interpretación de resultados 43 8 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Introducción Para diagnosticar una patología, el profesional veterinario se basa en la historia clínica y la exploración. Muchas veces son necesarios estudios complementarios, como los análisis de laboratorio. Se trata, a modo general, de pruebas sencillas y de bajo coste que pueden aportar mucha información relevante y, a veces, definitiva sobre una determinada alteración fisiológica. Las pruebas de laboratorio deben ser correctamente interpretadas por el clínico y consideradas de forma integrada con los demás hallazgos exploratorios. Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 9  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Objetivos »» Conocer los equipos y materiales de laboratorio más utilizados. »» Saber realizar las operaciones básicas empleadas en cualquier laboratorio. »» Determinar las muestras biológicas a analizar y cómo se realiza su obtención. »» Establecer los protocolos a realizar en función del tipo de muestra y del estudio. »» Enumerar y saber aplicar las normas y medidas relacionadas con el trabajo en el laboratorio. 10 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Materiales y equipos básicos del 1 laboratorio de análisis clínicos En un laboratorio de análisis de muestras animales de una clínica veterinaria podemos encontrar los siguientes materiales y equipos. 1.1 MATERIAL BÁSICO DE LABORATORIO En la tabla a continuación están las imágenes y usos del material básico de laboratorio: Tabla 1. Imágenes y usos del material de laboratorio Pipetas y micropipetas: utilizadas para el transvase de líquidos de un recipiente a otro. Probeta: es un vaso tubular con pie y generalmente graduado que se usa para medir volúmenes que no requieren mucha precisión. Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 11  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Matraz aforado: matraz de cuello largo y estrecho que dispone de una marca de graduación o aforo. Se usa para medir volúmenes exactos. Portaobjetos: sirven para preparar soluciones o bien para colocar sobre ellos muestras de animales y observarlas al microscopio. Cubreobjetos: se colocan encima de la muestra que vamos a observar al microscopio. Tubos de ensayo: tubos de vidrio utilizados para introducir las distintas muestras obtenidas. Pueden no contener sustrato o sí, como heparina, EDTA, fluoruro… Gradillas: sirven para apoyar tubos de ensayo. Material desechable para la realización de cultivos: placas de Petri, frascos, tubos de cultivo, asas de siembra… 12 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… 1.2 EQUIPOS „„ Microscopio: instrumento óptico destinado a observar de cerca objetos extrema- damente diminutos. La combinación de sus lentes produce el efecto de que lo que se mira aparezca con dimensiones extraordinariamente aumentadas, haciéndose perceptible lo que no lo es a simple vista. Microscopio óptico „„ Centrífuga o centrifugadora: máquina que pone en rotación una muestra para acelerar por fuerza centrífuga la decantación o sedimentación de sus componentes o fases (generalmente una sólida y una líquida), en función de su densidad. Se usa, por ejemplo, para separar el plasma del suero, en un proceso de análisis de sangre. Debe cargarse siempre de forma balanceada, colocando un número par de muestras y enfrentadas entre sí. Centrífuga Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 13  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… „„ Mezclador o agitador: dispositivo que se utiliza para mezclar líquidos o preparar disoluciones y suspensiones. Agitador tipo vortex „„ Refractómetro: aparato para medir el índice de refracción de un líquido. Se usa para medir la densidad de una muestra de orina. Refractómetro „„ Equipo de bioquímica. Fotómetro: instrumento que se utiliza para obtener perfiles bioquímicos a partir de una muestra. Fotómetro 14 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… „„ Equipo de hematología: instrumento que se utiliza para obtener perfiles hematológicos a partir de una muestra. „„ Contador celular: cuenta y mide partículas en disolución. Se aplica en hematología para el recuento de células sanguíneas. También es útil para el recuento de bacterias, células procariotas y partículas virales. Contador celular Cámara de recuento „„ Neveras: se usan para guardar muestras, reactivos… que requieran ser conservados a temperatura de refrigeración. Nevera Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 15  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… „„ Estufa/Horno de secado: se utiliza para secar y esterilizar recipientes de vidrio y metal. „„ Balanza: instrumento usado para realizar cálculos precisos de la cantidad de reactivo a usar. 16 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… 2 Reactivos de laboratorio Por reactivo de laboratorio se entiende aquella sustancia capaz de reaccionar químicamente para revelar otra sustancia. 2.1 REACTIVOS QUÍMICOS Pueden presentarse en estado líquido o liofilizado. En el caso de los equipos de bioquímica o autoanalizadores, las casas comerciales ponen en el mercado diferentes kits de diagnóstico para realizar las baterías de pruebas más comunes. Kit de diagnóstico „„ Anticoagulantes: se usan para impedir la coagulación de la sangre y del plasma. Ej. heparina, EDTA… „„ Baterías de tinción „„ Colorantes: cristal violeta, safranina, fucsina… Se usan para teñir y diferenciar células para observarlas al microscopio. „„ Sustancias decolorantes: ej. alcohol acetona. „„ Lugol: es una disolución yodada que se usa como mordiente en las tinciones celulares, es decir, aumenta el poder de fijación las células por el colorante. Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 17  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… „„ Fijadores: metanol, formaldehido… se usan para preservar la estructura celular de la muestra. Cubetas con colorantes para tinción celular 2.2 REACTIVOS BIOLÓGICOS Basan su reacción en una acción de tipo biológico. Se utilizan sueros obtenidos de distintas especies animales. Ejemplo: „„ Reactivos biológicos para el estudio de trastornos de la hemostasia. „„ Reactivos biológicos para el estudio de alteraciones del sistema inmunológico. „„ Anticuerpos monoclonales usados como recubrimiento en placa ELISA. 18 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Anticoagulantes Baterías de tinción Colorantes Reactivos químicos Sustancias decolorantes Lugol REACTIVOS DE Fijadores LABORATORIO Para el estudio de trastornos de la hemostasia Para el estudio de Reactivos biológicos alteraciones del sistema inmunológico Anticuerpos de recubrimiento en placa ELISA Esquema de los reactivos de laboratorio Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 19  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… Material de protección, 3 seguridad y contenedores para eliminación de residuos A la hora de trabajar con material de laboratorio debemos usar pijama o bata de laboratorio. Asimismo llevaremos guantes, gafas y mascarilla cuando las condiciones de trabajo lo requieran. Guantes desechables 3.1 GESTIÓN DE RESIDUOS Está integrada por un conjunto de actividades destinadas a dar a los residuos tóxicos y peligrosos el destino más adecuado y seguro. Cada laboratorio debe elaborar una política de gestión de residuos de acuerdo con la normativa vigente. Se lleva a cabo en dos fases: Tabla 2. Fases de la gestión de residuos 1º La lleva a cabo el „„ Recogida. Gestión personal del labora- interna torio. Consta de: „„ Clasificación. „„ Etiquetado. „„ Almacenaje temporal de los residuos del labo- ratorio. 20 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… 2º Corre por cuenta „„ Recogida en el laboratorio. Gestión de una empresa externa externa especia- „„ Transporte. lizada. Incluye los „„ Tratamiento. procedimientos de: „„ Eliminación o recuperación de los residuos. NORMAS GENERALES 3.1.1 Minimizar o evitar la generación de residuos „„ Comprar reactivos de forma racional para evitar las caducidades. „„ Utilizar las técnicas con menor impacto ambiental. „„ No derrochar reactivos. Emplear la cantidad mínima necesaria en cada tarea. „„ Reutilizar los equipos cuando sea posible. 3.1.2 Separación y envasado de residuos „„ Separar para su reciclado. Los residuos se depositarán de la siguiente manera: ƒƒ Residuos químicos sólidos: bidones de polietileno con cierre de acero galva- nizado. ƒƒ Residuos químicos líquidos: envases de polietileno. ƒƒ Residuos biosanitarios (cortantes y punzantes): contenedores de polipropi- leno rígido resistente a los golpes, perforaciones y disolventes. „„ No envasar los residuos líquidos en recipientes de más de 30 l. Para facilitar su mani- pulación. „„ Verter los residuos en los recipientes de almacenaje cuidadosamente. Si se produjeran gases o aumento de la temperatura, interrumpir el vertido. „„ Cerrar el envase al finalizar el vertido. No llenar nunca los envases más del 90% de su capacidad. Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 21  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… 3.1.3 Etiquetado de los envases de almacenamiento Las etiquetas llevarán el código de identificación del residuo que contiene: „„ Nombre, dirección y teléfono del titular de los residuos. „„ Fechas de inicio y final de envasado. „„ Indicar con los pictogramas correspondientes la naturaleza del riesgo que presentan. „„ Los riesgos específicos: frases R y S asociados a los residuos contenidos. Eliminar etiquetas anteriores si las hubiese antes de adherir la nueva para evitar errores. 3.1.4 Almacenamiento temporal „„ No almacenar en la misma estantería productos que puedan reaccionar entre sí. „„ No almacenar cerca combustibles y comburentes o tóxicos y muy tóxicos. „„ Disponer de bidones, etiquetas y envases de reserva en cantidad suficiente. „„ El almacén debe disponer de estanterías metálicas. „„ Los residuos no se pueden almacenar a más de 170 cm de altura. No apilar unos envases sobre otros. „„ El almacenaje provisional no debe superar los seis meses. 3.2 TIPOS DE RESIDUOS 3.2.1 Asimilables a los urbanos Son aquellos que no representan ningún peligro para la salud o el medio ambiente. No tienen relación directa con la actividad del laboratorio. Son los procedentes de tareas administrativas o restos de embalaje, cocina, cafetería. Se separan en grupos (papel, vidrio, orgánico,…) y se tratan como residuos domésticos. 3.2.2 Químicos Se separan en grupos (7) y se identifican con etiquetas de colores diferentes: 22 MÓDULO 2 Asistente y auxiliar técnico veterinario MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… „D„ Grupo I Naranja Disolventes halogenados „„ Grupo II Verde Disolventes no halogenados „„ Grupo III Azul Disoluciones acuosas „„ Grupo IV Rojo Ácidos „„ Grupo V Marrón Aceites „„ Grupo VI Amarillo Sólidos „„ Grupo VII Morado Especiales Los de mayor relevancia, dentro de los residuos químicos del laboratorio veterinario, son los líquidos radiológicos. Se incluyen dentro del grupo V. 3.2.3 Sanitarios Se separan en grupos (5) y se eliminan según las normas de la administración de cada Comunidad Autónoma. Tabla 3. Grupos de sanitarios GRUPO RESIDUOS SISTEMA QUE INCLUYE DE ELIMINACIÓN I. Asimilables „„ No generados por la actividad „„ Sistema municipal de a los urbanos directa del laboratorio. recogida. II. Sanitarios „„ Objetos sólidos no „„ Bolsas verdes o no específicos cortantes sin punzantes amarillas. Se eliminan (guantes, gasas…). como asimilables a los urbanos. III. Sanitarios „„ Objetos punzantes o „„ Envases rígidos de color especiales cortantes. amarillo o flexibles de color rojo señalados „„ Residuos infecciosos. como residuo bioló- „„ Residuos procedentes de gico. cultivos biológicos. „„ Son recogidos por „„ Sangre y derivados empresas especiali- (>100 ml). zadas. Asistente y auxiliar técnico veterinario MÓDULO 2 23  MANIPULACIÓN, PROCESAMIENTO, CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE MUESTRAS BIOLÓGICAS… IV. Residuos „„ Procedentes de cultivo no „„ Inactivar con lejía al 10% biológicos líquidos patógeno. durante 30 min. o en autoclave a 121 ºC 30 „„ Sangre y derivados min. Usar bolsas espe- (