XX-1-0001_Ed7.pdf

Laboratori Servei de Microbiologia XX/1/0001 PROCEDIMENT NORMALITZAT DE TREBALL Ed. 7 (28/01/2021) CONTROL MICROBIOLÒGIC AMBIENTAL Elaboració / Revisió Aprovació Raquel González Sara Sabaté Modificacions respecte a l’edició anterior Actualització del mapa dels punts on es realitza el contro...

Laboratori Servei de Microbiologia XX/1/0001 PROCEDIMENT NORMALITZAT DE TREBALL Ed. 7 (28/01/2021) CONTROL MICROBIOLÒGIC AMBIENTAL Elaboració / Revisió Aprovació Raquel González Sara Sabaté Modificacions respecte a l’edició anterior Actualització del mapa dels punts on es realitza el control ambiental Actualització del rang de temperatura a la que podem incubar les plaques Actualització de la bibliografia Motiu nova edició ☒ Canvi menor ☐ Canvi significatiu Ha requerit validació ☐ No ☐ Sí (LAB- __________ i/o data __________ ) Requereix qualificació ☒ No precisa ☐ Si precisa Canvi reactius i/o productes ☒ Sense canvis ☐ Genera canvis, notificar a PRL (LAB-3184) XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) ☐ Relaciona A.P.: ☐ Formació interna, explicació (LAB-0027) ☐ Qualificació, formació pràctica (LAB-0024) 1 de 6 Laboratori Servei de Microbiologia CONTROL MICROBIOLÒGIC AMBIENTAL INDEX 1. OBJECTE I CAMP D’APLICACIÓ ....................................................................... 3 2. DOCUMENTACIÓ DE CONSULTA.................................................................... 3 3. FONAMENT DEL MÈTODE............................................................................... 3 4. REACTIUS I PRODUCTES ................................................................................. 3 5. MATERIAL I APARELLS .................................................................................... 3 6. PROCEDIMENT OPERATIU .............................................................................. 4 7. 6.1. Control microbiològic de l’aire ........................................................................................ 4 6.2. Control microbiològic de les superfícies ........................................................................ 4 OBTENCIÓ I EXPRESSIÓ DE RESULTATS ......................................................... 4 7.1. Control microbiològic de l’aire ........................................................................................ 4 7.2. Control microbiològic de les superfícies ........................................................................ 4 8. BIBLIOGRAFIA ................................................................................................. 5 9. ANNEXOS ........................................................................................................ 6 9.1. Annex 1- Situació dels punts de control a les àrees de treball del Laboratori ........... 6 XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) 2 de 6 Laboratori Servei de Microbiologia 1. OBJECTE I CAMP D’APLICACIÓ Es descriu un mètode per al control de la contaminació microbiològica de l’aire i de les superfícies de treball en les diferents àrees del Servei. 2. DOCUMENTACIÓ DE CONSULTA - PNT XX/1/0002 “Preparació medis de cultiu i reactius”. - PNT XX/1/0018 “Registres de dades de les anàlisis en el servei de Microbiologia”. - PNT XX/1/0021 “Normes generals de funcionament del Servei de Microbiologia”. - Pla de control de qualitat intern. Control ambiental - Format de registre LAB-0120 3. FONAMENT DEL MÈTODE El nombre de microorganismes viables presents a l’aire es calcula mitjançant el nombre de colònies obtingudes per incubació de plaques de Petri amb medi de cultiu, les quals han estat exposades sobre les superfícies de l’àrea de treball a controlar. En les superfícies de treball el nombre de microorganismes presents es calcula mitjançant el nombre de colònies obtingudes per incubació de les plaques de contacte aplicades sobre les superfícies a controlar, amb un aplicador que permet estandarditzar la presa de mostres de superfície al exercir una pressió i un temps de contacte constants. 4. REACTIUS I PRODUCTES - Agar per a recompte en placa (PCA) - Agar Triptona-Soja Lecitina-Tween 80 en placa Rodac - Etanol al 70%. 5. MATERIAL I APARELLS - Estufa de cultiu a 36 ±2ºC - Aplicador per a plaques de contacte. XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) 3 de 6 Laboratori Servei de Microbiologia 6. PROCEDIMENT OPERATIU Per a la realització de l’assaig cal seguir les instruccions que s’indiquen al PNT XX/1/0021 “Normes generals de funcionament del Servei de Microbiologia”. A l’annex 1 s’indica la situació dels punts de control en els laboratoris de les àrees de treball del Servei. Les plaques de Petri i plaques Rodac s’identifiquen amb el nom de l’àrea de treball i el número corresponent al punt controlat. Les dades de les operacions, resultats i medis de cultiu emprats en el control microbiològic ambiental es fan constar en el full de registre de dades model LAB120. 6.1. Control microbiològic de l’aire Les plaques de Petri amb el medi de cultiu PCA per al recompte de bacteris aerobis es situen sobre les superfícies a controlar i es mantenen obertes durant 15 minuts. A continuació s’incuben invertides a 36±2ºC durant 48h. 6.2. Control microbiològic de les superfícies Mitjançant plaques Rodac, es prenen les mostres de superfície en els punts de control corresponents, després de 15 minuts d'haver realitzat la neteja de la superfície a controlar amb la solució d'etanol al 70%, com es fa habitualment a l'inici del treball a la lleixa. La placa Rodac es situa a l'aplicador amb la tapa cap amunt. A continuació es destapa i es manté l'aplicador contra la superfície sense produir cap desplaçament, fins sentir un senyal acústic. A totes les àrees de treball s’utilitzen plaques Rodac amb agar TSA-Lecitina_Tween 80 per al recompte de bacteris aerobis i s’incuben invertides a 36±2ºC durant 48 h. 7. OBTENCIÓ I EXPRESSIÓ DE RESULTATS 7.1. Control microbiològic de l’aire Es compten les colònies crescudes a la superfície del medi de cultiu. El resultat del recompte s’expressa com ufc/placa/15 min. Es consideren satisfactoris els recomptes  a 15 ufc/placa. 7.2. Control microbiològic de les superfícies Es compten les colònies crescudes a la superfície del medi de cultiu. El resultat del recompte s’expressa com ufc/placa. XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) 4 de 6 Laboratori Servei de Microbiologia Es consideren satisfactoris els recomptes  a 20 ufc/placa. En cas que s’obtinguin recomptes superiors al criteri d’acceptació, s’incrementa la neteja del Laboratori de l’àrea de treball afectada i es realitza un control diari fins obtenir tres recomptes consecutius satisfactoris. 8. BIBLIOGRAFIA  APHA-AWNA-WPCF. Standard Methods for the Examination of Water and wastewater. 23nd ed. Washington: APHA 2017 XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) 5 de 6 Laboratori Servei de Microbiologia 9. ANNEXOS 9.1. Annex 1- Situació dels punts de control a les àrees de treball del Laboratori 2 2 Aigües i Medi Ambient 1 1 2 3 Equips isotèrmics 3 Equips isotèrmics 1 XX/1/0001 – Ed. 7 - (28/01/2021) 4 5 Aliments 5 Equips isotèrmics 2 3 2 4 Pre PCR 2 5 Cap de servei Espai tècnic PCR 2 2 1 6 de 6 Sala reunions 4 1 Pre PCR 1 1 Aigües i Medi Ambient 2 1 Aigües i Medi Ambient 3 3