Questions sur la culture cellulaire et les modèles biologiques PDF

**[Questions sur la culture cellulaire et les modèles biologiques:]** 1. - 2. - 3. \- La centrifugation différentielle. Définition de la centrifugation différentielle ? - Limites de cette technique ? - 4. \- Stérilité : ne pas contaminer nos cultures cellulaires avec...

**[Questions sur la culture cellulaire et les modèles biologiques:]** 1. - 2. - 3. \- La centrifugation différentielle. Définition de la centrifugation différentielle ? - Limites de cette technique ? - 4. \- Stérilité : ne pas contaminer nos cultures cellulaires avec des bactéries ou micro-organismes \- Présence de dioxygène dans le milieu \- température adaptée (37°C) :Une humidité de 85-95% limite l'évaporation de l'eau \- Taux de CO2 à 5%:Permet de maintenir le pH entre 7,2 et 7,4 \- milieu de culture riche en eau, en différents sels /source de carbone/Acides aminés /acides gras. 5. \- Ce sont les premières cellules de lignées cellulaires immortelles cultivées en laboratoire, provenant d\'une tumeur humaine du col de l'utérus de Mme Henrietta Lacks (1951). Ont révolutionné la recherche médicale et soulevé des questions d'éthique importantes. Les cellules HeLa sont la première lignée cellulaire humaine considérée immortelle, ces cellules cancéreuses du col de l'utérus ont été prélevées sur un femme afro-américaine nommée Henrietta Lacks le 8 février 1951. 6. Des agrégats auto-organisés de cellules, de 50 à 500 μm, formés en 2-3 jours, pouvant provenir de différents types cellulaires, incluant des co-cultures. 7. Sont des structures complexes de, 2-3 mm, reproduisant un organe in vivo à partir de cellules souches, nécessitant un milieu semi-solide, et se forment en 21-28 jours. 8. \- Modèles les plus simples des cellules eucaryotes, organismes unicellulaires faciles à cultiver, se reproduisent vite (\~ 2 heures), adaptés à l'analyse génétique (génome entièrement caractérisé) économiques. Près de la moitié de leurs gènes ont des homologues chez les mammifères. 9. \- Elle partage 98 % d'homologie génétique avec l'humain, et permet d'étudier la fonction de gènes à l'échelle de l'animal entier. 10. \- L'embryon est transparent et se développe hors de l'eau, se développe hors de la mère, ce qui permet d'étudier son développement sans sacrifier la mère. Possède la capacité de réparer ses organes 11. \- Elles sont faciles et rapides à cultiver (mauvaises herbes) et utilisées pour l\'étude de gènes avec 5 à 6 générations par an grâce à leur cycle de vie court et leur petit génome. Faciles à manipuler car faculté d'autopollinisation et utilisées en biologie du développement végétal. **[Questions sur la microscopie:]** 12. - Formule de la résolution : (0,61 × λ) / (n × sin(α)). 13. \- Il permet de générer une image basée sur les indices de réfraction des différentes parties d'un échantillon, qui dépendent du degré d'obscurité ou de luminosité. Il n'y a pas de coloration, ce qui est utile pour observer des cellules transparentes et vivantes 14. 15. La fluorescence résulte de l\'émission de lumière après excitation d\'un fluorochrome. Lors de l\'excitation, des lasers ou des filtres d\'excitation sélectifs sont utilisés pour diriger une lumière d\'énergie plus haute sur l\'échantillon. L\'échantillon émet ensuite une lumière de longueur d\'onde différente, que l\'on peut isoler à l\'aide de filtres, en bloquant la lumière d\'excitation. 16. Méthode utilisant des anticorps pour visualiser des antigènes dans des cellules ou tissus. Après fixation, perméabilisation, et saturation des sites non spécifiques avec de la BSA, l\'anticorps primaire se lie à l\'antigène cible. Un anticorps secondaire fluorescent se lie ensuite à l\'anticorps primaire. Après plusieurs lavages, l\'échantillon est monté et observé sous un microscope à fluorescence pour localiser l\'antigène. 17. - 18. - 19. - - Mettre photos de différentes microscopies et demander de quel type de microscopie il s'agit piocher la définition de la technique utilisée et retrouver l'image correspondant **[Questions sur la détection des protéines:]** 20. Permet de détecter des protéines spécifiques dans un échantillon. Après séparation des protéines par électrophorèse, celles-ci sont transférées sur une membrane pour faciliter leur interaction avec des anticorps, car elles ne sont pas accessibles dans le gel. Ensuite, des anticorps spécifiques sont utilisés pour détecter et marquer les protéines d\'intérêt. 21. - - Méthode pour détecter la présence d'antigènes sur un support solide, très utilisée pour détecter des allergènes dans la nourriture, détecter des anticorps dans le sang suite à l'exposition à une maladie(anticorps anti-VIH par exemple\...). **(def sortie du cours)** 22. - - L\'immunoprécipitation permet d\'isoler une protéine spécifique à l\'aide d\'un anticorps, tandis que la co-immunoprécipitation capture également les protéines associées, facilitant l\'étude des interactions protéine-protéine. 23. Technique de détection, d\'analyse et d\'identification des protéines, similaire à la technique du western blot, mais qui diffère par le fait que les échantillons de protéines ne sont pas séparés par électrophorèse, mais sont déposés directement sur la membrane. **(def sortie du cours)** 24. - **[Questions sur la détection des acides nucléiques:]** 25. - 26. - 27. - **[Questions sur les protéines dynamiques et leur localisation]** 28. - - 29. - **[Questions sur le fractionnement cellulaire:]** 30. - 31. - - 32. - 33. - - **[Questions sur la microscopie confocale et les protéines:]** 34. - 35. - 36. -