Culture Cellulaire et Modèles Biologiques

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Questions and Answers

Quel est le principe de la méthode qui génère une image basée sur les indices de réfraction?

  • Elle nécessite la séparation des échantillons par électrophorèse.
  • Elle s'appuie sur la fluorescence pour visualiser les échantillons.
  • Elle utilise des colorants pour observer les cellules.
  • Elle observe des cellules transparentes sans coloration. (correct)

Quel type de lumière est utilisé pour exciter un fluorochrome?

  • Lumière d'énergie plus basse.
  • Lumière produite par des LED.
  • Lumière d'énergie plus haute. (correct)
  • Lumière réfléchie par l'échantillon.

Que se passe-t-il après la fixation et la saturation des sites non spécifiques dans la détection d'antigènes?

  • Les protéines sont séparées par électrophorèse.
  • Aucun anticorps n'est utilisé dans cette méthode.
  • L'anticorps primaire se lie à l'antigène cible. (correct)
  • L'échantillon est coloré pour rendre les antigènes visibles.

Quelle méthode est utilisée pour détecter des protéines spécifiques dans un échantillon?

<p>Le western blot. (C)</p> Signup and view all the answers

Quelle technique permet d'isoler une protéine spécifique à l'aide d'un anticorps?

<p>L'immunoprécipitation. (D)</p> Signup and view all the answers

Quelle méthode est souvent utilisée pour détecter des allergènes dans la nourriture?

<p>La méthode ELISA. (A)</p> Signup and view all the answers

Comment les échantillons de protéines sont-ils traités dans une technique similaire au western blot?

<p>Ils sont déposés directement sur la membrane. (B)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle des anticorps secondaires dans la détection d'antigènes?

<p>Ils se lient à l'anticorps primaire pour signaler l'antigène. (B)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la principale caractéristique des cellules HeLa ?

<p>Elles sont immortelles et ont révolutionné la recherche médicale. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel est le rôle du taux de CO2 dans la culture cellulaire ?

<p>Réguler le pH du milieu de culture. (D)</p> Signup and view all the answers

Quelles conditions sont essentielles pour assurer la stérilité des cultures cellulaires ?

<p>Une humidité de 85-95% et une température adaptée. (D)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la taille typique des agrégats auto-organisés de cellules ?

<p>50 à 500 μm. (C)</p> Signup and view all the answers

Quelle structure reproduit un organe in vivo à partir de cellules souches ?

<p>Un agrégat auto-organisé. (A)</p> Signup and view all the answers

Quel est un avantage des organismes unicellulaires en biologie ?

<p>Ils se reproduisent vite et sont faciles à cultiver. (C)</p> Signup and view all the answers

Qu'est-ce qui distingue embryons d'études de développement ?

<p>Ils se développent hors de l'eau et hors de la mère. (B)</p> Signup and view all the answers

Quelle est la formule de la résolution en microscopie ?

<p>$(0,61 × ext{λ}) / ( ext{n} × ext{sin(α)})$ (B)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Microscopie en contraste de phase

Technique d'imagerie utilisant les indices de réfraction pour générer une image. Elle est utile pour observer des cellules transparentes et vivantes car elle ne colore pas l'échantillon.

Microscopie à fluorescence

Technique utilisant la fluorescence pour visualiser des molécules spécifiques dans un échantillon. Un fluorochrome est excité par un laser ou un filtre d'excitation et émet une lumière de différente longueur d'onde.

Immunofluorescence

Méthode utilisant des anticorps pour visualiser des antigènes spécifiques dans des cellules ou tissus. Un anticorps primaire se lie à l'antigène, puis un anticorps secondaire fluorescent se lie au primaire.

Western blot

Technique permettant de détecter des protéines spécifiques dans un échantillon. Après séparation par électrophorèse, les protéines sont transférées sur une membrane pour être marquées par des anticorps spécifiques.

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ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

Méthode permettant de détecter la présence d'antigènes sur un support solide. Elle est utilisée pour détecter des allergènes dans la nourriture ou des anticorps dans le sang.

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Immunoprécipitation

Technique utilisée pour isoler une protéine spécifique à l'aide d'un anticorps. Elle peut aussi capturer les protéines associées et faciliter l'étude des interactions protéine-protéine.

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Dot blot

Technique de détection, d'analyse et d'identification des protéines, similaire au western blot, mais les échantillons de protéines ne sont pas séparés par électrophorèse.

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Dosage immunoenzymatique

Technique utilisée pour détecter et quantifier des anticorps dans un échantillon. Elle utilise des antigènes fixés sur une surface pour capturer les anticorps.

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Centrifugation différentielle

Méthode de séparation de différents types de cellules en fonction de leur taille et de leur densité par rotations successives à des vitesses croissantes.

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Limites de la centrifugation différentielle

La centrifugation différentielle est un moyen indirect et parfois brutal de séparer les organites. Elle peut endommager les cellules et les organites, certaines populations cellulaires peuvent se chevaucher et la purification n'est pas parfaite.

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Cellules HeLa

Les cellules HeLa sont les premières cellules humaines considérées comme immortelles. Elles ont été isolées à partir d'une tumeur du col de l'utérus de Henrietta Lacks en 1951. Elles ont révolutionné la recherche médicale mais ont soulevé des questions d'éthique importantes.

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Sphéroïdes cellulaires

Ce sont des modèles cellulaires tridimensionnels formés par l'auto-organisation de différents types de cellules. Ils reproduisent des aspects de la structure et de la fonction des tissus et organes.

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Organoïdes

Les organoïdes sont des modèles cellulaires 3D complexes qui reproduisent la structure et la fonction d'un organe in vivo. Ils sont formés à partir de cellules souches et nécessitent un milieu semi-solide.

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Levures

Les levures sont des modèles simples des cellules eucaryotes. Faciles à cultiver, elles se reproduisent rapidement et ont un génome bien caractérisé.

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Poisson zèbre

Le poisson zèbre est un modèle animal utilisé en recherche biologique. Il partage 98% d'homologie génétique avec l'humain. Il permet d'étudier les fonctions des gènes à l'échelle de l'animal entier.

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Xénope

Le modèle de l'embryon de xénope est utilisé en biologie du développement. L'embryon est transparent et se développe hors de l'eau.

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Study Notes

Culture Cellulaire et Modèles Biologiques

  • Deux grands types de cellules animales en culture : adhérentes et en suspension.
  • Cellules adhérentes : adhèrent à la paroi du récipient et ont besoin d'être ancrées.
  • Cellules en suspension : flottent et prolifèrent librement dans le milieu.
  • La centrifugation différentielle sépare les cellules selon leur densité et taille.
  • La stérilité est essentielle pour les cultures cellulaires pour éviter la contamination.
  • Les cultures cellulaires animales nécessitent un milieu riche en oxygène, à une température de 37°C, une humidité de 85 à 95%, du CO2 à 5% et des nutriments comme l'eau, les sels, les sources de carbone, les acides aminés et les acides gras.
  • Les cellules HeLa sont une lignée cellulaire cancéreuse du col de l'utérus devenue un modèle important en recherche.
  • Les sphéroïdes sont des agrégats de cellules qui se développent en 2 à 3 jours.
  • Les organoïdes sont des structures complexes imitant des organes in vivo.

Microscopie

  • La résolution en microscopie est la distance minimale entre deux points distinguables.
  • La microscopie à contraste de phase utilise les différences de réfraction pour visualiser les structures transparentes.
  • La microscopie à fluorescence utilise la fluorescence pour visualiser les composés fluorescents dans un échantillon.
  • La cytométrie en flux analyse les propriétés de cellules individuelles dans une suspension.
  • L'immunofluorescence indirecte utilise des anticorps pour visualiser les antigènes.
  • La microscopie photonique utilise la transmission de photons à travers l'échantillon.
  • La microscopie électronique à transmission (MET) permet d'étudier l'intérieur d'échantillons.
  • La microscopie électronique à balayage (MEB) visualise la surface des échantillons.

Détection des protéines

  • ELISA est une technique pour détecter les protéines par des anticorps.
  • Immunoprécipitation isole une protéine cible en utilisant des anticorps et en précipitant par un agent précipitant.
  • La co-immunoprécipitation détecte les protéines qui interagissent avec une protéine cible.
  • Dot Blot détecte les protéines ou d'autres biomolécules sans séparation par électrophorèse.
  • FRET mesure l'interaction de deux protéines par transfert d'énergie entre deux fluorophores.
  • Le Southern Blot détecte les séquences spécifiques d'ADN dans un échantillon par hybridation.

Protéines dynamiques

  • GFP (Green Fluorescent Protein) marque les protéines dans les cellules vivantes.
  • FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching) mesure la mobilité des protéines au sein des cellules.

Fractionnement cellulaire

  • La centrifugation sépare les cellules et les organites en fonction de leur densité.
  • La centrifugation sur gradient de densité sépare les organites cellulaires selon leur densité.

Microscopie Confocale

  • La microscopie confocale améliore la résolution en bloquant la lumière diffusée, ce qui permet d'obtenir des images plus claires.
  • CLEM (Correlated Light and Electron Microscopy) combine les images de microscopie optique et électronique pour étudier les cellules et les protéines.

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