Μικροβιολογία Gram Negative Διαλέξεις PDF

Βασική Βακτηριολογία  Βασική Βακτηριολογία Gram (-), αερόβιοι, βάκιλοι 7 οικογένειες Enterobacteriaceae Pasteurellceae Pseudomonadaceae Alcaligenaceae Franncisellaceae Moraxellaceae Βrucellaceae  Βασική Βακτηριολογία Enterob...

Βασική Βακτηριολογία  Βασική Βακτηριολογία Gram (-), αερόβιοι, βάκιλοι 7 οικογένειες Enterobacteriaceae Pasteurellceae Pseudomonadaceae Alcaligenaceae Franncisellaceae Moraxellaceae Βrucellaceae  Βασική Βακτηριολογία Enterobacteriaceae Mέλη της φυσιολογικής χλωρίδας του λεπτού εντέρου Aπαθογόνα & ευκαιριακά παθογόνα & πολύ παθογόνα Βάκιλοι, μη σποριωτικοί Αερόβιοι ή προαιρετικά αναερόβιοι Κινητοί >> Ακίνητοι (Shigella spp, Klebsiella spp) Καταλάση θετικοί Οξειδάση αρνητικοί Ζυμώνουν τη γλυκόζη με παραγωγή οξέος Τα περισσότερα στελέχη ζυμώνουν την λακτόζη Μεταβολίζουν τα νιτρικά άλατα σε νιτρώδη Δεν περιβάλλονται από έλυτρο (εκτός από τα στελέχη του γένους Klebsiella spp)  Βασική Βακτηριολογία Enterobacteriaceae Τα περισσότερα στελέχη ζυμώνουν της λακτόζη Στελέχη που αργούν (> 24 h) να ζυμώσουν τη λακτόζη Serratia spp Citrobacter spp  Βασική Βακτηριολογία Enterobacteriaceae Αναπτύσσονται σε υποστρώματα που περιέχουν χολικά άλατά ΜacConkey agar Peptone Proteose peptone Lactose F/NF Bile salts Sodium chloride Neutral red Crystal violet Agar  Βασική Βακτηριολογία Enterobacteriaceae Αναπτύσσονται σε υποστρώματα που περιέχουν χολικά άλατά ΜacConkey agar Peptone Proteose peptone Lactose F/NF Bile salts Sodium chloride Neutral red Crystal violet Agar  Βασική Βακτηριολογία Enterobacteriaceae Γένη  47 γνωστά γένη Τα σημαντικότερα: Escherichia spp Salmonella spp Klebsiella spp Proteus spp Shigella spp Yersinia spp  Βασική Βακτηριολογία Escherichia coli Διαδραματίζει ρόλο στη θρέψη των οργανισμών, συνθέτοντας Βιτ Κ Kατά φύση στο παχύ έντερο και την τελική μοίρα του λ. εντέρου Κινητικό βακτήριο (λίγα στελέχη είναι ακίνητα) Ζευγάρια ή μονήρη βακτήρια στη μικροσκοπική εξέταση Δεν σπορογονεί Δεν είναι οξεάντοχο  Βασική Βακτηριολογία Escherichia coli Αερόβιο ή προαιρετικά αναερόβιο Ανάπτυξη μεταξύ των 10 – 40 °C, ιδανικά στους 37 °C. Σχηματίζει σχετικά μεγάλες, ομαλές, γκρι προς άσπρες αποικίες Κάποια στελέχη μπορεί να είναι αιμολυτικά σε αιματούχο άγαρ Ινδόλη θετικό Μethyl red θετικό Voges–Proskauer αρνητικό Citrate αρνητικό ΙΜViC ++--  Βασική Βακτηριολογία Indole Test  Διερευνά την ικανότητα του βακτηρίου να μεταβολίζει το αμινοξύ τρυπτοφάνη σε ινδόλη (C8H7N)  H αντίδραση γίνεται παρουσία του ενζύμου τρυπτοφανάση. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΤΕΣΤ: Ενοφθαλμισμός του βακτηρίου σε tryptophan broth Επώαση για 24-28h στους 37 °C Προσθήκη του αντιδραστηρίου Kovac Σχηματισμός κόκκινου δακτυλίου σε θετικό αποτέλεσμα  Βασική Βακτηριολογία Μethyl Red test  Διερευνά την ικανότητα του βακτηρίου να παράγει οξέα κατά το μεταβολισμό της γλυκόζης  Το ερυθρό του μεθυλίου γίνεται ερυθρό σε συνθήκες ph< 4.4 ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΤΕΣΤ: Ενοφθαλμισμός του βακτηρίου σε nutrient broth Επώαση για 24h στους 37°C Προσθήκη του Μethyl Red Κόκκινος χρωματισμός του ζωμού σε θετικό αποτέλεσμα  Βασική Βακτηριολογία Voges-Proskauer  Διερευνά την ζύμωση γλυκόζης µε βουτανεδιολική ζύμωση, όπου παράγεται βουτανεδιόλη και αιθανόλη ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΤΕΣΤ: Ενοφθαλμισμός του βακτηρίου σε VP broth Επώαση για 24h στους 37 °C Προσθήκη 40% KOH Κόκκινος χρωματισμός του ζωμού σε θετικό αποτέλεσμα  Βασική Βακτηριολογία Citrate test  Διερευνά τη δυνατότητα του βακτηρίου να διασπά και να μεταβολίζει το κιτρικό νάτριο και να το χρησιμοποιεί ως πηγή άνθρακα ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΤΕΣΤ: Ενοφθαλμισμός του βακτηρίου σε citrate agar Επώαση για 24h στους 37 οC Mπλε χρωματισμός του ζωμού, λόγω αύξησης του ph (ph> 7.6) σε θετικό αποτέλεσμα  Βασική Βακτηριολογία Escherichia coli  Αντιγόνα (Ag) της Ε. Coli 1) Σωματικά αντιγόνα (κυτταρικό τοίχωμα) Ο αντιγόνα >170 διαφορετικά 2) Αντιγόνα κάψας (ελύτρου) Κ αντιγόνα >100 διαφορετικά 3) Αντιγόνα του μαστιγίου Η αντιγόνα >75 διαφορετικά 4) Aντιγόνα των ινιδίων F αντιγόνα  Βασική Βακτηριολογία Escherichia coli  Αντιγόνα (Ag) της Ε. coli Τα αντιγόνα χρησιμοποιούνται για την ταυτοποίηση και ονομασία των στελεχών πχ. E.coli O157:K 85:H19  Βασική Βακτηριολογία Escherichia coli  Λοιμογόνοι παράγοντες της Ε.coli  Η ενδοτοξίνη του λιπιδίου Α (LPS)  To K (έλυτρο) αντιγόνο  Συγκολλητίνες  Α και Β αιμολυσίνες  Σιδηροφορείς  Εντεροτοξίνη (HL/HS)  Vero ή Shiga-like τοξίνες  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella Daniel Salmon, 1885, pig cholera  Παθογόνο των θερμόαιμων και ψυχρόαιμων ζώων  2 είδη: Salmonella enterica και Salmonella bongori  S. enterica χωρίζεται σε 6 υποείδη (I) S. enterica subsp enterica (II) S. enterica subsp salamae (IIIa) S. enterica subsp arizonae (IIIb) S. enterica subsp diarizonae (IV) S. enterica subsp houtenae (V) S. enterica subsp indica  > 2.500 ορότυποι  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Κινητό βακτήριο (με εξαίρεση τις S. gallinarum και S. pullorum - πτηνά)  Δεν σπορογονεί  Δεν είναι οξεάντοχο  Λίγα αιμολυτικά στελέχη  Εξειδίκευση ξενιστή A. Ηost specific serovars B. Ηost restricted serovars Γ. Unrestricted serovars  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Αερόβιο ή προαιρετικά αναερόβιο  Ανάπτυξη μεταξύ των 7 - 48 °C, ιδανικά στους 37 °C.  H μορφολογία των αποικιών σχετίζεται με το είδος  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Κύρια Βιοχημικά Χαρακτηριστικά Καταλάση θετικά - Οξειδάση αρνητικά ΝLF (με εξαιρέσεις πχ. S. enterica diarizonae), δεν ζυμώνει τη σουκρόζη Ζυμώνουν τη γλυκόζη, μαλτόζη, μανιτόλη, αραβινόζη και σορβιτόλη Παραγωγή αερίου από τη ζύμωση της γλυκόζης ΙMViC -+++ Παραγωγή υδροθείου ποικίλλει Aποκαρβοξυλίωση της λυσίνης θετικό (XLD αγαρ) Urease αρνητικό  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Αντιγoνική σύνθεση o Σωματικά αντιγόνα (κυτταρικό τοίχωμα) Ο αντιγόνα o 2 αντιγόνα του μαστιγίου Η αντιγόνα o Αντιγόνα επιφανείας (όχι σε όλα) Κ αντιγόνα  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Αντιγoνική σύνθεση Ο αντιγόνα Παράγουν ενδοτοξίνες Είναι αρκετά θερμοανθεκτικά K (VI) αντιγόνα Προστατεύουν το βακτήριο από τη φαγοκυττάρωση Η αντιγόνα Αρκετά θερμοευαίσθητα Προάγουν την ανοσολογική απάντηση  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Ταξινόμηση και ονοματολογία ανάλογα με την αντιγονική σύνθεση  Βασική Βακτηριολογία Γένος Salmonella  Aπαιτήσεις καλλιέργειας Μη εκλεκτικά υποστρώματα ΜacConkey agar (37oC/24h) Εκλεκτικά υποστρώματα Xylose lysine deoxycholate agar (XLD agar) Salmonella – Shigella agar (SS agar) Modified Rappaport Vassiliadis agar (MSRV) Chromagar  Βασική Βακτηριολογία Γένος Klebsiella  Φυσιολογική χλωρίδα του εντέρου, αλλά παθογόνο όταν εξέρχεται από αυτό  12 είδη, μη κινητικά  Αερόβια, προαιρετικά αναερόβια  Ζυμώνουν τη λακτόζη  Παράγουν βλεννώδης αποικίες  Klebsiella pneumoniae  Klebsiella oxytoca  Klebsiella granulomatis  Βασική Βακτηριολογία Γένoς Proteus  Φυσιολογική χλωρίδα του εντέρου, αλλά παθογόνο όταν εξέρχεται από αυτό. Επίσης στο έδαφος και το νερό.  Ευκαιριακά παθογόνο  NLF, δεν έχει έλυτρο, δεν σπορογονεί  Swarming, αλλά όχι όλα τα στελέχη Proteus vulgaris (IMViC ++--) Proteus mirabilis (IMViC -+-+)  Oυρολοιμώξεις  Βασική Βακτηριολογία Γένoς Shigella  Ευκαιριακά παθογόνο  4 είδη: S. boydii, S. dysenteriae, S. flexneri, S. sonnei  Ακίνητο  NLF, δεν παράγει αέριο κατά τη ζύμωση της γλυκόζης  IMViC -/+/--  Παράγει τοξίνες  Διάρροια,  Συμπτώματα από το Κ.Ν.Σ.  Βασική Βακτηριολογία Γένoς Yersinia  Παθογόνο, προαιρετικά αναερόβιο  18 είδη, Υersinia enterocolitica, Yersinia pestis  NLF, IMViC: v/+/-/-  Τα τρωκτικά είναι φυσικοί ξενιστές του βακτηρίου  Διάρροια  Aποβολές  Συμπτώματα από το ΚΝΣ  Βασική Βακτηριολογία Οικογένεια Pasteurellaceae  Συνδυασμός κόκκου και βακίλου  Κοκκοβάκιλλοι, πιο έντονα χρωματισμένοι στα άκρα τους, όψη παραμάνας  Μη σπορογόνοι  Αερόβιοι ή προαιρετικά αναερόβιοι  Ακίνητοι  Καταλάση θετικοί  Οξειδάση θετικοί  Γαστρεντερικός σωλήνας και αναπνευστική οδός  Βασική Βακτηριολογία Γένος Pasteurella  21 είδη  σωματικά Ο αντιγόνα  αντιγόνα κάψας Κ  5 οροομάδες (Α, Β, C, D, E)  δεν παράγει αιμολυσίνες  δεν αναπτύσσεται στο MacConkey agar (διαφοροποίηση. από Μannhaemia)  Ονομασία: βασίζεται στην οροομάδα και τα O Ag, π.χ. P. multocida B:6  συνήθως επιπλέκει ήδη υπάρχουσες λοιμώξεις  Βασική Βακτηριολογία Οικογένεια Pseudomonaceae Γένος Pseudomonas  181 είδη και 11 υποείδη  Βάκιλοι, μη σπορογόνοι, αερόβιοι, ελαφρά καμπυλοειδείς  Κινητοί >> Ακίνητοι  Χαρακτηριστική οσμή  Παράγει χρωστικές - μπλε (πυοκυανίνη), - κίτρινη (φλουροσεϊνη) - κόκκινη (πυορουβίνη) - σκούρο καφέ (πυομελανινη)  Βασική Βακτηριολογία Οικογένεια Pseudomonaceae Γένος Pseudomonas  LF – χρειάζεται διαφοροποίηση από τα εντεροβακτεροειδή  Παράγει τοξίνες (αιμολυσίνες, λεκιθίνες, λευκοτοξίνες)  Σηπτικά ή χειρουργικά τραύματα  Εξαιρετικά ανθεκτικό σε αντιβιοτικά και απολυμαντικά