جزوه آزمایشگاه ایمنی PDF

‫جلسه اول آزمایشگاه ایمنی‪:‬‬ ‫خونگیر ماهر‪ :‬کسی است که وقتی از یک بیمار خون گرفته بتواند تضمین دهد فاکتور های قابل اندازهگیری خون تحت تاثیر‬ ‫شرایط نمونه گیری قرار نگرفته است‪.‬‬...

‫جلسه اول آزمایشگاه ایمنی‪:‬‬ ‫خونگیر ماهر‪ :‬کسی است که وقتی از یک بیمار خون گرفته بتواند تضمین دهد فاکتور های قابل اندازهگیری خون تحت تاثیر‬ ‫شرایط نمونه گیری قرار نگرفته است‪.‬‬ ‫خونگیری‪ :‬بر سه نوع است‬ ‫‪ )1‬وریدی‬ ‫‪ )2‬شریانی‬ ‫‪ )3‬مویرگی‪ :‬از این روش برای انجام آزمایش هایی که حجم کمی از خون را نیاز دارد یا تست غربالگری نوزادان و چک کردن‬ ‫بیلیروبین استفاده میکنیم‬ ‫در این نوع خونگیری ‪ ،‬انتخاب محل مناسب برای خونگیری دارای اهمیت است ؛ در نوزادان از پاشنه پا و در بزرگساالن از‬ ‫انگشت دست خونگیری میکنیم‪.‬‬ ‫بهترین انگشت برای زدن النست ‪ ،‬انگشت وسط ( سومین بند بیرونی ) است‪.‬‬ ‫به انگشت شست النست نمیزنیم چون نبض دارد و همچنین به انگشت سبابه هم النست نمیزنیم به دلیل اینکه ما از انگشت‬ ‫سبابه زیاد استفاده میکنیم و پوست آن ضخیم تر شده است و خونگیری از آن دردناک تر است‪.‬‬ ‫ضد عفونی‪:‬‬ ‫مکانیسم عملکرد اتانول اینگونه است که غشاء باکتری را سوراخ میکند و محتویات داخل باکتری به بیرون میریزد و باکتری‬ ‫میمیرد‬ ‫در استفاده از الکل اتانول ‪ ، %96‬غشا باکتری پاره میشود ولی اگر باکتری وارد خون شود میتواند غشاء آسیب دیده خود را‬ ‫ترمیم بکند و فعال شود ولی در صورت استفاده از الکل اتانول ‪ %70‬که از ‪ %70‬الکل اتانول و ‪ %30‬آب تشکیل شده است‪.‬‬ ‫الکل غشاء باکتری را از بین میبرد (منفذ ایجاد میکند) و آب از طریق این منافذ وارد باکتری میشود و باکتری را کال تخریب‬ ‫میکند‪.‬و باکتری نمیتواند رشد بکند چون کالً متالشی شده است‪.‬‬ ‫نمی توانیم غلظت الکل را دست کاری بکنیم چون قدرت تاثیر آن از بین میرود به طور مثال الکل ‪ %60‬تاثیری بر روی غشاء‬ ‫باکتری ندارد‪.‬‬ ‫حتماً محل وسیع تری از محل خونگیری را ضد عفونی بکنید‪.‬‬  ‫جلسه دوم‪:‬‬ ‫در نوزادان به کناره های پاشنه پا نیدل میزنند (قسمت های جانبی پاشنه پا)‬ ‫بیش از ‪ %95‬خونگیری های آزمایشگاهی را خونگیری وریدی شامل میشود‬ ‫هر وریدی که قابل لمس باشد و به اندازه ای باشد که شما بتوانید ازش خون بگیرید منعی برای خونگیری ازش وجود ندارد‬ ‫بهترین محل برای پیدا کردن رگ حفره کوبیتال هست‬ ‫وقتی در یک دست رگ پیدا نکردیم قدم اول ‪ ،‬رفتن به سراغ رگ های دست دیگر مریض میباشد‬ ‫قدم دوم زدن ضربه به قسمتی است که رگ ها حضور دارند‬ ‫قدم سوم رگ های پشت دست هست ولی حد المقدور سراغ رگ های پشت دست نروید چون خونگیری از این رگ ها درد‬ ‫بیشتر و احتمال کبودی بیشتری دارد‬ ‫گارو دو کار را برای ما انجام میدهد‪:‬‬ ‫‪ )1‬کمک به برجسته شدن رگ‬ ‫‪ )2‬کمک به فیکس شدن رگ‬ ‫محل بستن گارو‪ 7 :‬تا ‪ 10‬سانتیمتر باالی محل خونگیری‬ ‫منعی برای بستن گارو روی لباس وجود ندارد‬ ‫بعد از بستن گارو ‪ 2 ،‬دقیقه فرصت داریم برای خونگیری اگر گارو روی دست مریض بیش از ‪ 2‬دقیقه بماند باعث میشود روی‬ ‫یکسری از فاکتور های خون تاثیر بگذارد مثال میزان سدیم ‪ ،‬پتاسیم ‪ ،‬کلسیم و به ویژه تست ‪( PT‬تست انعقادی) با بستن‬ ‫طوالنی مدت گارو کامالً تحت تاثیر قرار میگیرد‬ ‫در مشت کردن ‪ ،‬انگشت شست داخل و سپس دست را مشت میکنیم‬ ‫مریض هایی که در حین خونگیری ‪ Faint‬میکنند ‪ 2‬حالت دارند‪:‬‬ ‫‪ )1‬هموفوبی (ترس از خون)‬ ‫‪ )2‬افت قند پیدا کرده بعلت ناشتایی زیاد‬ ‫اگر بیمار غش کرد اولین کار حفظ اعتماد به نفس میباشد و سپس باید مریض را از حالت نشسته به حالت خوابیده در بیاوریم‬ ‫اگر به هر دلیلی مثل وزن زیاد مریض ‪ ،‬نبود همکار و ‪....‬نتوانستیم مریض را به حالت خوابیده دربیاوریم فقط کافی است سر‬ ‫مریض را پایین بیاوریم و این حرکت باعث میشود که جریان خون به مغز برگردد و میتوانیم اگر مریض به حالت خوابیده بود‬ ‫پاهای بیمار را به طرف باال حرکت دهیم تا جریان خون به سمت مغز بیاید‬ ‫اگر با تمام این کار ها اوضاع بیمار بهتر نشد دو ضربه آرام به صورت بیمار میزنیم تا ببینیم اصال عکسالعملی دارد یا خیر و‬ ‫اگر باز هم گیج بود دیگر بر عهده ما نیست و باید با اورژانس تماس بگیریم‬  ‫خونگیری شریانی‪:‬‬ ‫زاویه خونگیری در این نوع خونگیری ‪ 90‬درجه و قائم بر شریان میباشد‬ ‫در این نوع خونگیری بیمار را توجیه کنید که حتما یک پنبه را حداقل بمدت ‪ 15‬دقیقه محکم در محل خونگیری فشار بدهد‬ ‫خونگیری شریانی را از سه شریان فمور ‪ ،‬ژوگوالر و مچ دست انجام میدهیم و معموالً از شریان مچ دست ابتدا خونگیری میکنند‬ ‫شریان فرعی بین دو شریان اولنار و رادیال بهترین شریان برای خونگیری شریانی میباشد ‪ ،‬چرا؟‬ ‫فشارش کمتره چون شریان اصلی نیست و یک شریان فرعی میباشد‬ ‫ولی این شریان در بعضی از افراد وجود ندارد و باید چک بشود نبض دو شریان اولنار و رادیال را پیدا میکنیم و از مریض‬ ‫می خواهیم که با بردن انگشت شست به سمت داخل دست خود را مشت بکند و سپس دو شریان را محکم فشار میدهیم تا‬ ‫جریان خون به سمت دست قطع بشود و سپس از مریض میخواهیم که دست خود را باز بکند و مشاهده میشود که دست‬ ‫مریض به رنگ سفید است و یکی از شریان ها را ول میکنیم و تا ‪ 30‬شماره میشماریم اگر دست به حالت و رنگ عادی خود‬ ‫برگشت مریض شریان فرعی دارد و می توانیم از او خونگیری شریانی انجام بدهیم‪.‬ولی اگر ‪ 30‬ثانیه گذشت و دست به حالت‬ ‫عادی برنگشت اینجا شریان فرعی نداریم‬ ‫یکی از مهم ترین عضو های بدن تو تخلیه لنف بافت سینه است و و در خانم هایی که عمل برداشت سینه را بخاطر سرطان‬ ‫انجام داده اند و در آن ناحیه تخلیه لنف بخوبی انجام نمی شود و خونگیری از دست موافق با سینه برداشته شده چون لنف‬ ‫بخوبی تخلیه نمی شود و مایع میان بافتی زیاد است و مقدار بسیاری از یون های ما تحت تاثیر مایع میان بافتی و اسمز است ؛‬ ‫به همین دالیل تعادل یون ها در آن قسمت به هم میخورد و حتما در بیمارانی که این مشکل را دارند باید از دست مخالف‬ ‫خونگیری بکنیم‬ ‫و گاهی اوقات ماستکتومی دو طرفه انجام شده است و در این شرایط ما به ناچار خونگیری انجام میدهیم ولی زیر جواب بیمار‬ ‫کامنت میگذاریم که خونگیری تحت شرایط ماستکتومی دو طرفه انجام شده است‬ ‫در بیمارانی که آنمی (کم خونی) دارند شما اصال نباید تست ‪ Hba1c‬رو مالک سنجش دیابت قرار بدید‬ ‫هماتوم ‪ 4 3‬هفته طول میکشد تا از بین برود و دو عامل اصلی برای ایجاد هماتوم وجود دارد‪:‬‬ ‫‪ )1‬خونگیر‬ ‫‪ )2‬خود مریض‬ ‫برای جلوگیری از هماتوم می توان به مریض گفت ابتدا چند ساعت منطقه خونگیری را کمپرس سرد (یخ بذار) بکن و بعدش‬ ‫چند ساعت کمپرس گرم (حوله گرم) بذار ؛ حواستون باشه برعکس نگید‬ ‫سرنگ ها ‪ :‬معموال سرنگ ها تا ‪ 10‬سی سی در بحث خونگیری کاربرد دارند و باالتر از اون معموالً استفاده نمیشود‬ ‫محیط داخل فضای سرنگ کامالً با اشعه گاما استریل شده است ؛ ‪ G23‬مناسب برای خونگیری از نوزادان است‬ ‫عدد ‪ G‬سرنگ ها منظورش قطر نیدل سرنگ میباشد و هرچقدر قطر نیدل بیشتر باشد ‪ ،‬عدد ‪ G‬کوچکتر میشود (رابطه عکس)‬  ‫برای لمس کردن رگ فقط از انگشت اشاره استفاده میکنیم‬ ‫برای ضد عفونی کردن رگ ‪ ،‬بصورت دورانی ضد عفونی میکنیم‬ ‫به هیچ وجه نمونه خون را با نیدل داخل لوله خالی نمیکنیم حتماً نیدل را جدا کنید و سپس خون را به لوله ها منتقل بکنید‬ ‫اگر دیدیم مریض سالخورده است و رگ گارو بسته خوب خون نمیدهد میتوانیم در حین خونگیری گارو را باز کنیم‪.‬‬  ‫جلسه سوم‪:‬‬ ‫قبل از خونگیری حتماً پیستون را چک میکنیم و نیدل را محکم میکنیم‪.‬‬ ‫در خونگیری همواره ارجحیت با لمس کردن رگ است نه با دیدن رگ و محلی که میخواهیم خونگیری بکنیم از مرکز به‬ ‫صورت دورانی ضد عفونی میکنیم‪.‬‬ ‫قبل از خونگیری و وارد کردن نیدل به رگ دوباره مسیر رگ را فقط با کف انگشت اشاره (نه با دو انگشت) لمس میکنیم‪(.‬بند‬ ‫انگشتمان باید روی مسیر رگ بخوابد)‬ ‫در مورد باز کردن گارو در حین خونگیری باید گفت که اگر باز کردن گارو در حین خونگیری باعث تکان خوردن دستمان شود‬ ‫و باعث شود نیدل از داخل رگ بیمار خارج شود بهتر است این کار را نکنیم چون ما دو دقیقه فرصت داریم تا خونگیری را انجام‬ ‫دهیم ولی در بعضی مواقع رگ مریض خون نمیدهد ‪ ،‬در این مواقع میتوانیم آرام گارو را از دست بیمار باز کنیم‪.‬‬ ‫پس از خونگیری به هیچ وجه نیدل ها در هوا نباشد و لطفاً در ‪ safety box‬اوت شود‪.‬‬ ‫‪ :Wright Test‬با این تست تشخیص میدهیم که بیمار به تب مالت مبتال هست یا نه ؟‬ ‫عامل ایجاد بیماری تب مالت یک باکتری گرم منفی به نام بروسال است(هوازی‪ -‬بیهوازی اختیاری) ‪ ،‬به بیماری که توسط بروسال‬ ‫ایجاد میشود بروسلوزیس یا همان تب مالت گفته میشود‪.‬این بیماری یک بیماری زئونوز است (مشترک بین دام و انسان) و‬ ‫اتفاقاً ابتالی انسان از طریق تماس با دام آلوده اتفاق میافتد‪.‬‬ ‫در داخل گونه های مختلفی ما باکتری بروسال را داریم مثالً در داخل حیوانات مختلف مثل‪ :‬گاو ‪ ،‬گوسفند ‪ ،‬خوک ‪ ،‬سگ و ‪...‬‬ ‫باکتری بروسال در میزبان های مختلف اسامی متنوعی نیز دارد مثالً‬ ‫‪ )1‬گاو (بروسال آبورتوس)‬ ‫‪ )2‬گوسفند و بز (بروسال ملیتنسیس)‬ ‫‪ )3‬سگ (کنیس)‬ ‫انتقال بروسال به انسان یا بوسیله تماس مستقیم با دام آلوده است یا بوسیله تماس با فراورده های آلوده دامی که مبتال بوده‬ ‫است صورت میگیرد مثالً مصرف لبنیات از جمله شیر ‪ ،‬ماست‪.‬‬ ‫حیوانات اگر مبتال به تب مالت بشوند گاهی باعث سقط جنین میشود‪.‬البته بستگی دارد به اون دامی که االن بروسال گرفته‬ ‫که تو چه سنی از بارداریش هست ‪ ،‬اگر تو ماه های آخر بارداریش باشه سقط اتفاق نمی افته ولی قطعاً جنینی که متولد میشه‬ ‫آلوده هستش ولی اگر تو ماه های اولیه باشه ‪ ،‬اصالً خود به خود جنین سقط میشود یعنی اجازه ادامه باروری داده نمیشود‬ ‫ولی دقت کنید که برای انسان سقط ایجاد نمیکند حتی به بچه هم انتقال پیدا نمیکند‬ ‫باکتری بروسال به شدت نسبت به شرایط محیطی مقاوم هست ‪ ،‬اگر یک پنیر یا ماستی به باکتری بروسال آلوده باشد این پنیر‬ ‫یا ماست در شرایط یخچال گاهی تا ‪ 3‬هفته و بعضی مواقع تا یک ماه باکتری بروسال توش زنده است و قابلیت انتقال دارد‪.‬حتی‬ ‫گاهی در ماست آلوده و در دمای یخچال باکتری بروسال تا دو ماه باقی میماند و این اصالً شوخی نیست‬ ‫گاهی اوقات انتقال بیماری میتواند از طریق گوشت هم باشد (عالوه بر دامداران ‪ ،‬قصابان هم در معرض ابتال به تب مالت هستند‬ ‫در صورتی که دام آلوده باشد)‬ ‫بروسال هرچند باکتری مقاومی هست اما در شرایط جوش(‪100‬درجه) به مدت ‪ 20‬دقیقه از بین میرود‪.‬‬ ‫قضیه و احتمال انتقال تب مالت از انسان به انسان رد نشده ولی احتمالش خیلی ضعیفه مگر اینکه فرد آلوده در پیک بیماری‬ ‫باشد و ترشحات آلوده اون وارد بدن فرد سالم بشود مثالً از طریق عطسه یا سرفه‬ ‫بیماری تب مالت وقتی اتفاق میافتد عالئم متنوعی ایجاد میکند گاهی در یک فرد پکیجی از عالئم اتفاق می افتد و گاهی در‬ ‫یک فرد تک عالئم اتفاق می افتد و یکی از عالئم این بیماری تب نوبه است (االن تب میکنی ‪ 2‬روز خوبی بعدش دوباره تب‬ ‫میکنی دوباره ‪ 2‬روز خوبی بعدش دوباره تب میکنی) این تب های سینوسی که اتفاق میافتد یکی از عالمت های تب مالت‬ ‫است ‪ ،‬ضعف ‪ ،‬خستگی ‪ ،‬حالت تهوع ‪ ،‬کم اشتهایی از عالئم شایع همه عفونت هاست و در تب مالت هم دیده میشود‬ ‫یکی از عالمت های بارز تب مالت درد های استخوانی است بویژه کمر درد های بسیار شدید‬ ‫کمر درد های تب مالتی این شکلی اتفاق میافتن که تا به حال هیچ سابقه ای از کمر درد نداشتی بعد یک دفعه کمرت درد‬ ‫میکنه و کمر دردش جوریه که وقتی میگیره بیمار حتی نمیتونه سرپا وایسه‬ ‫یکی از مهم ترین گام های تشخیص تب مالت شرح حال میباشد و باید شرح حال مرتبط با تب مالت بگیریم نه پرسیدن سابقه‬ ‫چربی خون و دیابت و تیروئید و‪....‬بلکه پرسیدن شغل طرف دامدار هستید یا نه شغلتون در ارتباط با دام هستش یا نه به منطقه‬ ‫روستایی خاصی رفتید یا خیر و امثالهم‪.....‬‬ ‫اگر شما به اشتباه فردی که مبتال به تب مالت است رو سالم گزارش بکنید سیستم ایمنی طرف بیکار نمینشینه و این همه ‪B‬‬ ‫‪ cell & T cell‬داره و این سلول ها خودشون میان و با بروسال وارد معرکه میشوند باعث میشه بیماری تب مالت وارد فاز مزمن‬ ‫میشه‬ ‫بروسال یک باکتری داخل سلولی هستش ‪ ،‬عمدتاً تمایل داره داخل سلول باشد و به شدت تمایل به حرکت به سمت سیستم‬ ‫عصبی مرکزی را دارد وقتی تب مالت در بدن بیمار وارد فاز مزمن میشود یعنی باکتری بروسال در بدن ریشه کن نشده است و‬ ‫به محض اینکه بروسال بتونه فرصتی برای رشد مجدد پیدا بکنه میتونه مجدداً عالئمی برای فرد ایجاد بکنه که اصالً اختصاصی‬ ‫با عالئم ابتال به بروسال نیست‬ ‫ما داریم بیمارانی رو که مبتال به آرتروز های شدید تک مفصل هستند حتی تو سنین کم‬ ‫آیا این عالئم در همه افرادی که تب مالت در بدن آنها مزمن میشود بروز میکند؟ خیر در بین افرادی که بیماری در بدن آنها‬ ‫مزمن میشود تنها ‪ %10‬موارد ممکن است که به این عالئم دچار شوند ولی خود این درصد هم قابل توجه است حتی یک نفر‬ ‫هم برای ما مهم میباشد‬ ‫بیماری که االن بروسال حاد دارد فقط کافیه بهش تتراسایکلین بدیم ؛ با مصرف یک دوره ‪ 10‬روزه تتراسایکلین ‪ ،‬بروسال کالً تو‬ ‫بدنش ریشه کن میشه ولی اگر درمان را به موقع دریافت نکنه و بیماری وارد فاز مزمن بشه ‪ ،‬ریسک بروز اون عالئم برای فرد‬ ‫باال میره‬ ‫ما واکسن بروسال رو برای دام داریم ولی برای انسان واکسن بروسال نداریم به استثناء بعضی کشور ها مثل‪ :‬استرالیا‬  ‫برای انجام دادن تست رایت چند روش وجود دارد‪:‬‬ ‫‪ )1‬اسالیدی‪ :‬که خود این روش دو نوع هستش ‪ ،‬یکی رو اصطالحاً بهش میگن رایت رپید و یکی رو بهش میگن رزبنگال ؛ همون‬ ‫طوری که از اسامی تست ها پیداست این روش یک روش سریع در تشخیص تب مالت میباشد و در کمتر از ‪ 5‬دقیقه میتوانیم‬ ‫تب مالت رو با این تست تشخیص بدهیم‬ ‫جلسه چهارم‪:‬‬ ‫تست رایت تستی است که به منظور تشخیص بیماری تب مالت استفاده میشود‬ ‫(با میکروب بروسال برخورد داشته یا نه ؟)‬ ‫‪ )1‬کیفی (سریع)‪ :‬در عرض ‪ 5-4‬دقیقه میتوانیم بفهمیم طرف به تب مالت مبتال است یا نه ؟‬ ‫‪ )2‬رزبنگال‬ ‫‪ )1‬رایت سریع‬ ‫که خود این روش دو نوع آنتی ژن مختلف دارد‪:‬‬ ‫ما به دنبال ردپای بروسال میگردیم و باید ‪ Ab‬های ضد بروسال را بررسی بکنیم‪.‬درسته که باکتری بروسال یک باکتری درون‬ ‫سلولی هستش اما فاز خارج سلولی هم دارد‪.‬‬ ‫در مرحله فعال تب مالت که دارای تب نوبه و لرز هستیم علت این عالئم تکثیر شدن باکتری ها و گاهی ریخته شدن آن ها به‬ ‫خون و دوباره ورودشون به سلول های جدیده ؛ در کنار تست رایت پزشک درخواست کشت خون میکند‪.‬‬ ‫فاز خارج سلولی باکتری بروسال محرک تولید ‪ Ab‬بر علیه خود باکتری میباشد ‪ ،‬بدن هر فرد روزانه ‪ 3-2‬گرم ‪ Ab‬میسازد‬ ‫(ترکیبی از ‪ Ab‬های مختلف)‬ ‫باکتری ‪ Ab +‬اختصاصی اون باکتری اگر مخلوط شوند ‪ ،‬باکتری ها توسط ‪ Ab‬ها به هم متصل میشوند و یه شبکه ای تحت‬ ‫عنوان آگلوتینین رو ایجاد میکنند‪.‬‬ ‫هر ‪ Ab‬دو دست برای اتصال دارد‬ ‫ما برای تشکیل واکنش آگلوتیناسیون از باکتری کشته شده بروسال استفاده میکنیم‬ ‫به کل ساختار یک میکروارگانیسم میگوییم پاتوژن و ما در تست رایت از پاتوژن بروسال استفاده میکنیم نه از ‪ Ag‬بروسال‬ ‫از کل ساختار باکتری بروسال فقط قسمت های مشخصی توسط سیستم ایمنی شناسایی میشود‬ ‫اون قسمت هایی از پاتوژن که وقتی وارد بدن ما میشود سیستم ایمنی بر علیه اش پاسخ میدهد را ‪ Ag‬میگوییم‬ ‫در نتیجه یک پاتوژن میتواند چندین نوع ‪ Ag‬داشته باشد‪.‬وقتی آنتیبادی میآید و به آنتیژن وصل میشود از یه نقطه به ‪Ag‬‬ ‫متصل میشود ‪ ،‬اون جایی از ‪ Ag‬که ‪ Ab‬بهش متصل میشود رو اپیتول میگوییم‪.‬‬ ‫گول نوشته روی ویال رو نخورید که نوشته ‪ Ag‬بروسال اون اصطالحه ‪ ،‬مهم محتویات درونش میباشد که خود باکتری بروسال‬ ‫(پاتوژن بروسال) در ویال وجود دارد‪.‬‬ ‫تست رایت فقط روی اسالید شیشه ای انجام میشود‬ ‫‪ 25‬الندا میکروب بروسال ‪ 25 +‬الندا سرم بیمار را مخلوط میکنیم بعد از ‪ 3‬تا ‪ 5‬دقیقه در زیر نور از لحاظ دونه های آگلوتیناسیون چک کنید‪.‬‬ ‫اگر آگلوتینه (دانه) داخلش دیدی یعنی در بدن اون بیمار ‪ Ab‬ضد باکتری بروسال وجود دارد و فرد با بروسال برخورد داشته‬ ‫است اما اگر آگلوتینه داخلش ندیدیم جواب تست – است‪.‬‬ ‫برای تست رایت ‪ 2‬جور میکروب داریم‪:‬‬ ‫‪ )1‬آبی رنگ ‪ ،‬که به آنتیژن رایت معروف است ‪ ،‬باکتری بروسال را با رنگ متیلن بلو رنگش کردهاند‬ ‫‪ )2‬صورتی رنگ ‪ ،‬که به آنتیژن رزبنگال معروف است ‪ ،‬باکتری بروسال که با رنگ رزبنگال رنگش کردهاند‬ ‫صورتی= رایت سریع به روش رزبنگال‬ ‫آبی= رایت سریع به روش رایت‬ ‫محتوی ‪ 8‬درصد باکتری بروسال و پیاچ ‪3/5‬‬ ‫محتوی ‪ 11‬درصد باکتری بروسال و پیاچ ‪7/2‬‬ ‫آزمایش رایت سرولوژی – ولی کشت خون بیمار ‪ +‬که نشان دهنده بروسال زیاد است ؛ چرا؟‬ ‫‪ Ag+Ab=immune complex‬اگر نسبت یکی از مواد واکنشدهنده ‪ Ab‬یا ‪ Ag‬نسبت به اون یکی خیلی بیشتر باشد ‪ ،‬هیچ‬ ‫محصولی تولید نمیشود چون این واکنش وابسته به غلظت مواد واکنشدهنده است‪.‬‬ ‫سطح زیر منحنی ما معادل مقدار محصول است‪.‬‬ ‫اگر مقدار آنتیبادی نسبت به آنتیژن خیلی زیاد باشد تشکیل کمپلکس ایمنی ضعیف‬ ‫میشود و به این اتفاق میگویند پروزون (‪)-‬‬ ‫در ناحیه وسط مقدار آنتیبادی و آنتیژن تقریباً برابر است و بیشترین میزان تولید کمپلکس ایمنی را داریم‪.‬‬ ‫ناحیه سوم که مقدار آنتیژن نسبت به مقدار آنتیبادی بیشتره پس اگر مقدار آنتیژن نسبت به مقدار آنتیبادی زیاد باشه پست‬ ‫زون اتفاق میافتد و مقدار محصول کاهش پیدا میکند‪.‬‬ ‫در تست رایت احتمال پروزون وجود دارد چون آنتیژن را ما خودمان ساخته ایم و متغیر ما آنتیبادی است و دست ما نیست ‪،‬‬ ‫اگر آنتیبادی داخل سرم خیلی زیاد شود میتواند پروزون اتفاق بیفتد‪.‬‬ ‫پست زون ؟ بستگی به غلظت آنتیژن دارد که ما غلظت آنتیژن را جوری انتخاب میکنیم که فقط در یک حالت به پست زون‬ ‫نزدیک بشود ‪ ،‬حالتی که هیچ آنتیبادی وجود نداشته باشد و جواب تست – باشد پس عمالً احتمال وجود پست زون نداریم‬ ‫چون آنتیژن دست خودمونه و متغیرمون آنتیبادی است و چون مقدار آنتیبادی در سرم قابل اندازهگیری و تخمین نیست‬ ‫میتواند پروزون اتفاق بیفتد (آنتیبادی خیلی زیاد)‬ ‫پس در آزمایش رایت فقط احتمال بروز پروزون وجود دارد ‪ ،‬پست زون اتفاق نمیافتد‪.‬‬ ‫در واکنش رایت به هیچ وجه نمیتوانیم ادعا کنیم که این منفی ‪ Post zone ،‬است‪.‬‬ ‫در ‪ Post zone‬مقدار ‪ Ab‬خیلی کم است در صورتی که تعریف خیلی کم در این تست یعنی – یعنی ‪ Ab‬وجود نداشته است‬ ‫پس منفی بودن جواب آزمایش رایت را نمیتوانیم ‪ Post zone‬قلمداد بکنیم‪.‬‬ ‫‪ -‬کاذب ‪ Ab ، Pro zone ،‬در سرم بیمار خیلی باال بوده و واکنش دیده نشده است ولی احتمال ‪ Post zone‬وجود ندارد‬ ‫چون ما غلظت ‪ Ag‬طوری تنظیم کرده ایم که اگر مقدار ‪ Ab‬خیلی کم باشد در حد منفی باشد‪.‬‬ ‫در مورد منفی بودن تست رایت کسی نمیتواند ادعای ‪ Post zone‬داشته باشد چون غلظت ‪ Ag‬جوری تنظیم شده است که‬ ‫فقط زمانی نزدیک ‪ Post zone‬میشودکه اصالً ‪ Ab‬وجود ندارد‪.‬‬ ‫برای اطمینان از جواب آزمایش رایت باید با چند غلظت متفاوت سرم انجام شود ولی مقدار ثابتی ‪ Ag‬را به همه چاهک ها اضافه‬ ‫میکنیم‪.‬‬ ‫‪ 10‬الندا‬ ‫‪ 20‬الندا‬ ‫‪ 40‬الندا‬ ‫‪ 80‬الندا‬ ‫سرم‬ ‫‪ X‬الندا‬ ‫‪ X‬الندا‬ ‫‪ X‬الندا‬ ‫‪ X‬الندا‬ ‫آنتیژن‬ ‫اگر فرد بیمار باشد و در همه این چاهک ها نشون نداد مریض دیگه مریض نیست ‪ ،‬میّته که اینقدر تیترش باال باشد‬ ‫ما مقدار سرم را کم میکنیم که هی مقدار ‪ Ab‬کاهش پیدا بکند و از ‪ Pro zone‬فرار بکنیم‪.‬‬ ‫چاهک اول – ولی چاهک دوم به بعد ‪ = +‬جواب نهایی تست ‪+‬‬ ‫چاهک اول و دوم – ولی چاهک سوم و چهارم ‪ = +‬جواب نهایی تست ‪+‬‬ ‫‪ -‬ها بخاطر پروزون بوده و – کاذب است ولی اگر قرار است از رزبنگال استفاده بکنیم غلظت و ‪ PH‬آن متفاوت است‪PH=3.5(.‬‬ ‫و غلظت = ‪)%8‬‬ ‫اگر از رزبنگال استفاده بکنیم ‪ Pro zone‬اتفاق نمیافتد (‪ -‬کاذب ناشی از ‪ Pro zone‬نداریم) چون ‪ PH‬و غلظت جوری تنظیم‬ ‫شده که اگر مقدار ‪ Ab‬خیلی باال باشد باز واکنش انجام میشود و دیده میشود (‪ 50‬الندا رزبنگال و ‪ 50‬الندا سرم بیمار را‬ ‫مخلوط میکنیم) ولی برای رایت از همون اول برای همه مریض ها چند چاهکی انجام میدهیم‬ ‫محلول رزبنگال (به هیچ وجه نباید رقیق شود) فاقد توانایی گفتن مقدار حدودی ‪ Ab‬است ولی رایت این توانایی را دارد‪.‬‬ ‫بیماری تست رایت چند قسمتی آن – و تست رزبنگال آن ‪ +‬شده است ‪ ،‬چرا؟‬ ‫کیت رایت دارای باکتری بروسال آبورتوس (گاو) است و کیت رزبنگال دارای بروسال مدیتنسیس میباشد و این نتیجه آزمایش‬ ‫نشان دهنده این است که بیمار ما به بروسال مدیتنسیس مبتال است و عمدتاً رزبنگال را میکس مدیتنسیس ‪ +‬آبورتوس تولید‬ ‫میکنند به همین خاطر همیشه در این مواقع حق با رزبنگال است‪.‬‬ ‫بیماری تست رزبنگال آن – و تست رایت چند قسمتی آن ‪ +‬شده است ‪ ،‬چرا؟‬ ‫اوالً نتیجه تست – است و اون ‪ + ، +‬کاذب است چون ‪ Ab‬دیگری شبیه به ‪ Ab‬بروسال آمده و با میکروب بروسال واکنش داده‬ ‫است‪.‬و این واکنش ‪ cross reaction‬است یعنی ‪ Ab‬به جای غ اختصاصی خودش وصل بشود چون بین ‪ Ag‬های بروسال‬ ‫یکی با این ‪ Ab‬ها شباهت ‪ %70-60‬داشته و توانسته به آن متصل بشود مثالً ‪ Ab‬ضد سالمونال است ولی توانسته به بروسال نیز‬ ‫متصل بشود (‪)cross reaction‬‬ ‫ویژگی ‪ Cross Reaction‬ها‪:‬‬ ‫(عدم تکرار پذیری)‬ ‫‪ W+&R-‬بعد از تکرار آزمایش به نتیجه ‪ W-&R-‬میرسیم‬ ‫‪ )1‬گاهی تکرار پذیری ندارند به طور مثال‪:‬‬ ‫‪ cross reaction )2‬ها واکنش های بشدت ضعیفی هستند و انتظار نداریم که آگلوتیناسیون بسیار واضح و مشخصی در‬ ‫‪ cross reaction‬ها وجود داشته باشد‪.‬‬ ‫‪ )3‬محلول رزبنگال اجازه واکنش دادن واکنش های متقاطع (‪ )cross reaction‬را نمیدهد‪.‬‬ ‫جواب ‪ Rapid Wright‬فقط یه چیزی به ما میگوید که فرد با بروسال برخورد داشته یا نداشته است؟ کامالً کیفی گزارش‬ ‫میشود (‪ = +‬برخورد ‪ = - ،‬عدم برخورد)‬ ‫شدت آگلوتینه کم یا زیاد رو نمیشه با رایت نظر داد و صالً مهم هم نیست‪.‬‬ ‫حتماً خوانش تست ما زیر نور باشد به هیچ وجه بیرون چیزی رو گزارش نمیکنیم‪.‬‬ ‫حتماً دقیق باشید که کف چاهک هاتون آشغالی وجود نداشته باشد تا در خوانش تست مشکل ایجاد بکند ‪ ،‬کامالً تمیز کنید و‬ ‫بعداً استفاده بکنید‪.‬‬ ‫قبل از استفاده ‪ ،‬کامل به هم بزنید ‪ ،‬هم رایت و هم رزبنگال رو‬ ‫سرم رو اول بریزیم یا ‪ Ag‬رو و چرا ؟‬ ‫اول ‪ Ag‬را میریزیم که اگر آگلوتیناسیون دیدیم ‪ Ag ،‬ما خراب است و خرابی ‪ Ag‬را زودتر تشخیص بدهیم تا اشتباه گزارش‬ ‫نکنیم‬ ‫همیشه اول ‪ Ag‬را میریزیم که اگر خراب بود همون اول تشخیص بدهیم‪.‬‬ ‫مخلوط کردن به صورت نقطهای غلطه کالً در کف اسالید پخش کنید (منطقهای)‬ ‫جلسه پنجم (رایت لوله ای) ‪:‬‬ ‫تست رایت سریع یه تست ‪ Rapid‬یا اسالیدی بود به منظور تشخیص اینکه آیا ‪ Ab‬ضد باکتری بروسال وجود دارد یا نه ؟‬ ‫(رزبنگال ‪)Wright ،‬‬ ‫وقتی پزشک درخواست تست رایت میدهد شما همیشه تو قدم اول میآیید در واقع رزبنگال و رایت اسالیدی رو میذارید اگر‬ ‫رزبنگال و رایت اسالیدی شما ‪ +‬شد به هیچ عنوان نمیتونید جواب در واقع ‪ +‬یا – بودن رو گزارش بکنید ‪ ،‬وقتی رایت اسالیدی‬ ‫‪ +‬میشود حاال چه رزبنگال یا چه رایت ‪ ،‬شما باید بیاید و روش رایت لوله ای رو انجام بدهید‪.‬‬ ‫پس رایت اسالیدی به هیچ وجه به ما اجازه گزارش نمیده ولی آقا مریض اورژانسی است و تست رایت دارد و مریض میپرسد‬ ‫آقا جواب تست رایت من رو حداقل بگید ‪ +‬یا – (خیر) حتی رزبنگال آن شخص هم واکنش بسیار قوی داده بهش بگم ‪ +‬؟ یا‬ ‫نه ؟ نه چون فردا ممکنه تو رایت لوله ای جواب تست شما – بشود‪.‬‬ ‫پس به هیچ وجه در واقع شما با گزارش اسالیدی نمیتونید به فرد بگید که شما برخورد با بروسال داشته اید یا نه ؟‬ ‫زمانی می تونید جواب بدید که تست شما تست رایت لوله ای باشد ؛ وقتی تست رزبنگال شما ‪ +‬می شود تاییدش به واسطه‬ ‫انجام تست رایت لوله ای است ‪ ،‬شما در تست رایت باید مقدار گزارش بکنید و بعضی از مقادیر یعنی اگر مقدار شما کمتر از‬ ‫مثالً عدد ‪ 1/20‬باشد این ارزش گزارش ندارد یعنی برای پزشک وجود این مقدار ‪ Ab‬اهمیتی ندارد پس در زمانی که تست‬ ‫رایت اسالیدی شما ‪ +‬شد تا رایت لوله ای انجام ندادی هیچ قضاوتی نمیکنی‬ ‫خب در رایت لوله ای چیکار میکنیم ؟ ما بدنبال بدست آوردن مقدار ‪ Ab‬هستیم ولی به چه شکل ؟‬ ‫ابتدا داخل یک جا لوله ای ‪ 10‬تا لوله میچینیم‪.‬‬ ‫آب مقطر رو چیکار کنیم بشه سرم فیزیولوژی ؟ یه ذره نمک بهش اضافه میکنید‬ ‫اگر جواب تست رایت اسالیدی من – شد آیا الزمه رایت لوله ای انجام بدم ؟ خیر جواب بیمار همون جا با گزارش – تموم‬ ‫میشود ‪ ،‬رایت لوله ای برای حالتی است که جواب تست رایت اسالیدی من ‪ +‬شده باشه‬ ‫هرچیزی را در هم حجم خودش حل بکنید یک دوم رقیق میشود‪.‬‬ ‫هرچقدر مقدار ‪ Ab‬داخل سرم من بیشتر باشد ‪ ،‬تا لوله های دورتری میتونه بیاد ولی هرچقدر مقدار ‪ Ab‬داخل سرم من کمتر‬ ‫باشد تا لوله های کمتری میتونه بیاد‪.‬‬ ‫رایت اسالیدی ‪ +‬رایت لوله ای – = مقدار ‪ Ab‬خیلی خیلی کم بوده و جواب – تست رایت لوله ای را گزارش میکنیم ؛ درسته‬ ‫برخورد داشته ولی اون مقدار ‪ Ab‬پاتولوژیک نیست و مقداری نیست که بخواد تو تصمیمگیری و ‪ Order‬پزشک تاثیر گذار‬ ‫باشد‪.‬‬ ‫مقدار خیلی خیلی کم ممکنه در تست رزبنگال شما یه ‪ +‬باشه و اون ‪ +‬اگه به ‪ 10‬نفر نشون بدی ‪ 9‬نفر میگن ‪ 1 ، -‬نفر میگه‬ ‫‪ +‬ولی یه ‪ +‬ضعیف که اگه بیاد تو رایت لوله ای – میشود‬ ‫االن چجوری تشخیص بدم ‪ Ab‬تا کدوم لوله اومده ؟‬ ‫بازم باکتری بروسال رو به لوله ها اضافه میکنیم در هر لوله ای که ‪ Ab‬ضد بروسال وجود داشته باشد ‪ Ab‬و باکتری به هم متصل‬ ‫میشوند و همون دونه های ریز حتی ریز تر از اون چیزی که در اسالیدی میدیدیم اینجا دیده میشود‪.‬‬ ‫هر لوله ای که توش دونه های ریز آگلوتینه وجود داشت یعنی ‪ Ab‬اونجا وجود داره و هر جایی که دونه های ریز آگلوتینه وجود‬ ‫نداشت یعنی ‪ Ab‬ضد بروسال اونجا وجود ندارد‪.‬‬ ‫پس اساس روش لوله ای هم همان آگلوتیناسیون فعالی است که در روش اسالیدی وجود داشت‪.‬‬ ‫رنگ آبی محلول باکتری آزمایش رایت لوله ای کمتر است یعنی نسبت به اون ‪ Ag‬بروسال ‪ Rapid‬شما رقت اش کمتر است‬ ‫(رنگ آبی اون محلول کمرنگ تر است)‬ ‫اگر محلول رایت لوله ای تمام شده باشد و فقط یدونه رایت اسالیدی مونده باشد میتونیم اون محلول رو رقیق تر بکنیم اما به‬ ‫چه نسبتی ؟ ‪ 1‬به ‪ 20‬با سرم فیزیولوژی رقیق میکنیم و میتونیم از اون بعنوان رایت لوله ای استفاده بکنیم‪.‬‬ ‫به تمام لوله هام ‪ 500‬الندا ‪ Ag‬یا همون میکروب بروسال اضافه میکنیم به لوله آخر هم اضافه میکنیم (به لوله آخر میگویند‬ ‫لوله شاهد)‬ ‫لوله شاهد در واقع لوله ای است که شما فقط ‪ Ag‬و آب ریختی و هیچ سرمی به اون لوله اضافه نکردیم پس در لوله آخر شما‬ ‫هیچ آگلوتیناسیونی دیده نمیشود‬ ‫لوله شاهد یعنی کنترل ‪ ، Ag‬یعنی کنترل انکوباسیون انکوباتور ‪ ،‬یعنی کنترل سرم فیزیولوژیت ‪ ،‬اگر در لوله شاهد دونه های‬ ‫آگلوتینه ببینی یا هر ذره دیگری ببینی نشان دهنده این است که ‪ Ag‬خراب بوده و اگر لوله شاهد واکنش داد چه باید کرد ؟‬ ‫کالً تست را میگذاریم کنار و ‪ Ag‬را کالً کنار میاندازیم ‪ ،‬اگر برگردیم و دوباره با همون ‪ Ag‬انجام بدیم و تکرار بکنیم همون‬ ‫اتفاق دوباره میافتد و وقتی لوله شاهد واکنش داد باید ‪ Ag‬ام را عوض بکنم و با یه ‪ Ag‬جدید مجدداً تست رو تکرار بکنم‬ ‫‪ )1‬باید فرصت کافی بدهم که تمام ‪ Ag‬ها و ‪ Ab‬ها وارد واکنش بشود (‪24‬ساعت) انکوبه میکنیم در انکوباتور و در دمای ‪37‬‬ ‫درجه (میتونیم در بن ماری هم بگذاریم ولی در زمان های طوالنی مثل ‪ 24‬ساعت در انکوباتور ‪ 37‬درجه قرار میدهیم)‬ ‫دمای ‪ 37‬درجه باعث می شود که آب داخل لوله ها تبخیر بشود پس برای جلوگیری از تبخیر حتماً باید در لوله را با پارافیلم‬ ‫بپوشانیم که از تبخیر جلوگیری بکند (بدون کشیدن پارافیلم در ‪ 37‬درجه نمیگذاریم)‬ ‫دقیق ترین روش کار با سمپلر ‪ Step2‬به ‪ Step1‬است‬ ‫در آزمایشگاه تمامی حروف و کلمات رو باید التین بنویسید و حتما زیر عدد ‪ 6‬و ‪ 9‬خط بکشید و همیشه یک سوم باالیی لوله‬ ‫را شماره گذاری بکنید‬ ‫همیشه وقتی میخواهید ‪ 2‬تا چیز رو با هم در یک لوله مخلوط کنید همیشه حجم بیشتر رو اول بریزید‬ ‫چون از رقت باال داریم میریم به سمت رقت پایین بنابراین نیاز به تعویض سر سمپلر نیست‪.‬‬  ‫جلسه ششم ‪:‬‬ ‫خوانش تست رایت لوله ای کامالً به صورت چشمی است و ما ‪ 10‬لوله داریم که ‪ 9‬لوله اول رقت های سرم ما بوده و لوله آخر‬ ‫لوله شاهد بود (لوله ای که داخلش فقط ‪ Ag‬بود و سرم فیزیولوژی) و ما انتظار داریم هیچ آگلوتیناسیونی توش دیده نشه‪.‬‬ ‫برای خوانش تست رایت لوله ای حتماً باید زیر نور باشد‪.‬‬ ‫برای خوانش اولین کار اینه که لوله شاهدمون رو برمیداریم و لوله شاهدمون رو از لحاظ آگلوتیناسیون چک میکنیم برای‬ ‫تشخیص بهتر آگلوتیناسیون ‪ 2‬راه داریم‬ ‫‪ )1‬یا از داخل انکوباتور خارج میکنیم و مستقیم شروع به خواندن میکنیم‬ ‫‪ )2‬یا لوله هامون رو به مدت ‪ 1‬دقیقه در دور ‪ rpm 1500‬سانترفیوژ میکنیم و بعد میخوانیم‬ ‫معموالً سانترفیوژ به خوانش بهتر کمک میکند‬ ‫وقتی لوله ها سانتر میشوند در تمام لوله ها در قسمت های انتهایی یه رسوب ‪ Ag‬ایجاد میشود ‪ ،‬آگلوتیناسیون یه واکنشی‬ ‫نیست که کامالً یه ساختار محکمی داشته باشد که از بین نرود نه ؛ آگلوتیناسون اتصال ‪ Ag‬به ‪ Ab‬هستش اگه چندین بار‬ ‫ضربه شدید داده بشه ‪ ،‬این اتصاالت جدا میشود و آگلوتیناسیون دیده نمیشود اما با ضربه های آروم معموالً آگلوتیناسیون‬ ‫حل نمیشود‪.‬‬ ‫شما این رسوبی رو که دارید شروع میکنید آروم یه تکونی میدهید ‪ ،‬اون رسوبی که وجود دارد کم کم شروع میکنه به حل‬ ‫شدن ‪ ،‬چند بار آروم تکون میدهید و به محلول نگاه میکنید اگه رسوب شما کامالً حل بشه و تبدیل به یه سری ذرات نشد ‪،‬‬ ‫این رسوب بوده و اصالً ربطی به آگلوتیناسیون ندارد‪.‬‬ ‫در موقع خواندن خیلی به نور نزدیک نکنید زیر یه نور غیر مستقیم باید باشه ‪ ،‬بعد زمانی که میخواهید بخونید لوله رو طوری‬ ‫تو دستمون میگیریم که یه مقدار از محلول ما حالت مورب داشته باشه تا سطح دید براتون ایجاد بکنه‪.‬‬ ‫برای خوندن باید در زاویه ای لوله را بگیریم که شما ناحیه مورب رو بتونید مستقیم ببینید (زاویه دید باید از بغل باشد)‬ ‫گاهی وقتی یه لوله ای ثابت هست ‪ ،‬من هیچ چیزی توش نمیبینم ولی اگه آروم یه تکونی بهش بدم یه دفعه دقت بکنم میبینم‬ ‫یه عالمه ذرات ریز داخلش در حال حرکت است‪.‬‬ ‫پس اول اینکه لوله باید تو زاویه دید خودتون باشه ‪ ،‬یه تکون آروم بدید و اگه توش ذرات شناوری دیدید باید شک کنید به‬ ‫آگلوتیناسیون‪.‬‬ ‫توی خوانش ‪ ،‬اول میروید سراغ لوله شاهد‬ ‫اگه لوله شاهد شما رسوبی از آگلوتیناسیون نداشت نشون دهنده اینه که ‪ Ag‬شما سالم بوده و اجازه خوانش تست رو دارید ولی‬ ‫اگر لوله شاهد موردی داشت اصالً تست رو نباید بخونید (اگه رسوبی باشه که با حرکت دادن حل نشه و تبدیل بشه به ذرات‬ ‫یعنی کیت خراب بوده)‬ ‫اگه لوله شاهد شما مشکلی نداشت اجازه دارید تست رو بخونید‪.‬‬ ‫یه قانون در خوانش تست های رایت وجود دارد (کالً تو تست هایی که بر اساس سریال دایلوشن هستند این قانون وجود دارد)‬ ‫که شما اجازه نداری لوله ها رو اولی رو برداری بعد دومی رو بعد سومی رو ‪ ،‬باید تکلیف هر لوله مشخص بشه‪.‬‬ ‫اگر لوله اول رو شما برداشتید آگلوتیناسیون داشت میذارید سرجاش و میروید سراغ لوله دوم ‪ ،‬اگر لوله اول رو شک داشتید‬ ‫و هنوز مطمئن نیستیم آگلوتیناسیون داره یا نه ؟‬ ‫اجازه نداری سراغ لوله دوم سوم بری ‪ ،‬تکلیف لوله باید مشخص بشه ‪ 2 ،‬تا حالت داره یا لوله شما ‪ +‬است که در این صورت‬ ‫لوله رو میذاری کنار و میروی سراغ لوله دوم‬ ‫یا لوله شما – است ‪ ،‬آگلوتیناسیون داخلش نیست ‪ ،‬تست تموم شد خوانشی ادامه نمیدهید‪.‬‬ ‫اگر شک کردی نمیدونی واقعاً آگلوتیناسیون داره یا نداره اگه بهت بگن ‪ +‬یا ‪ -‬؟ نمیتونی بگی ‪ ،‬در این صورت میتونید لوله‬ ‫شاهدتون رو بردارید و کنار این لوله بگذارید و با هم مقایسه بکنید و به کمک لوله شاهد جواب بدیم‬ ‫اگه دقیقاً شبیه به لوله شاهد باشه که یعنی قطعاً – است اما اگه ذراتی توش باشه که توی لوله شاهد نیست بنابراین میتونه ‪+‬‬ ‫باشه ‪ ،‬پس به هیچ وجه زمانی که تکلیف لوله رو مشخص نکردی اجازه نداری که بری سراغ لوله های بعدی‪.‬‬ ‫جوابی که شما گزارش میکنید = آخرین لوله ای که توش آگلوتیناسیون دیده شده‬ ‫اینجا ‪ 1/80‬بزرگتر از ‪ 1/20‬است که یعنی با رقیق کردن ‪ ،‬باز هم ‪ Ab‬حذف نشده و وجود دارد ؛ هر چقدر عدد تیتر شما بزرگتر‬ ‫باشد (‪ 20‬به سمت ‪ )80‬یعنی مقدار ‪ Ab‬بیشتر هست‪.‬‬ ‫آیا در تست رایت لوله ای پدیده پروزون اتفاق میافتد یا نه ؟‬ ‫استفاده از سرم فیزیولوژی و حضور سرم فیزیولوژی تو محیط خودش جلوی پدیده پروزون رو میگیرد یعنی شرایط رو مساعد‬ ‫میکنه که حتی اگه مقادیر (‪ Ag‬و ‪ )Ab‬با هم تناسبی هم نداشته باشند ‪ ،‬با هم وارد واکنش میشوند‪.‬‬ ‫پس در تست رایت لوله ای به علت استفاده از سرم فیزیولوژی پروزون اتفاق نمیافتد ؛ یعنی امکان نداره من لوله اولم واکنش‬ ‫آگلوتیناسیون رو کالً نبینم اما این احتمال وجود داره که شما در لوله اول واکشنت رو ضعیف تر داشته باشی و تو لوله دوم‬ ‫واکنش آگلوتیناسیون بیشتر بشود‪.‬‬ ‫ما ‪ 2‬جور پروزون داریم ‪:‬‬ ‫یکی پروزون مطلق یعنی پروزونی که باعث بشه جواب تست کامل – بشود ‪ ،‬در تست رایت لوله ای پروزون مطلق اتفاق نمیافتد‬ ‫اما پروزون نسبی یعنی پروزونی که باعث میشه تو لوله اول واکنش ضعیف تر باشه و تو لوله دوم واکنش قوی تر باشه‬ ‫این قضیه ممکنه در رایت لوله ای دیده بشود که شما تو لوله اول آگلوتیناسیون ضعیف تری داری و تو لوله دوم اگلوتیناسیون‬ ‫واضح تری داری ؛ این جا نشون میده که مقدار ‪ Ab‬به نسبت زیاده ولی به هیچ وجه اگه در تست رایت لوله ای پروزون مطلق‬ ‫اتفاق میافتاد ‪ ،‬ما بر عکسش رو میگفتیم‬ ‫میگفتیم اگه لوله اولتون – بود حتماً برید لوله ‪ 2‬را ببینید ‪ ،‬حتماً برید لوله ‪ 3‬را ببینید ولی االن داریم میگیم اگه لوله اول –‬ ‫بود به هیچ وجه سراغ لوله دوم سوم نرید و این نشون میده که در تست رایت لوله ای پروزون مطلق به هیچ وجه اتفاق نمیافتد‬ ‫؟ چرا ؟ به علت حضور سرم فیزیولوژی‬ ‫مقدار شدید یا ضعیف بودن آگلوتیناسیون در نحوه گزارش هیچ تفاوتی ایجاد نمیکند ؛ پس هر آگلوتیناسیونی دیده بشه یعنی‬ ‫اون لوله ‪ +‬است حتی ضعیف ترین آگلوتیناسیون هم یعنی اون لوله ‪ +‬است و برو سراغ لوله بعدی‬ ‫پس این جا مقدار و شدت آگلوتیناسیون مهم نیست‪.‬‬ ‫گاهی داخل لوله وقتی تکون میدهید ممکنه یدونه ‪ 2 ،‬تا دونه ذره ای ببینید که حرکت میکند ‪ ،‬به هیچ وجه آگلوتیناسیون‬ ‫در حد یک یا ‪ 2‬یا ‪ 3‬تا دونه نیست‪.‬‬ ‫آگلوتیناسیون اگر ضعیف باشه تعداد ذراتش خیلی زیاده پس اگه من یدونه آرتیفکت دیدم که داخل لوله داره حرکت میکنه‬ ‫نمیگم خب این ‪ ، +‬به هیچ وجه ‪ 2 1‬تا ‪ 3‬تا ‪ 4‬تا دونه ذره داخل لوله به معنی آگلوتیناسیون نیست‪.‬‬ ‫مقدار ‪ Ab‬ضد بروسال ما ‪ 1/80‬در اومد‬ ‫معموالً زیر ‪ 1/80‬و خود ‪ 1/80‬رو میگویند مقادیر کم ‪ 1/160 ،‬مقادیر متوسط و از ‪ 1/160‬به باال (‪ )640/320‬میشود مقادیر‬ ‫زیاد‪.‬‬ ‫پس میگوییم این فرد یه مقدار کمی ‪ Ab‬ضد بروسال دارد ؛ آیا میتونیم با این مقدار کم تست رو تفسیر کنیم ؟ (مربوط به‬ ‫سابقه ابتالی قبلی ‪ ،‬مربوط به شغل فرد ‪ ،‬مربوط به ابتال حاد ‪ ،‬بروسال گرفته و تو مرحله شروع عفونت بروسال است)‬ ‫این ‪ = 1/80‬مقدار کل ‪ Ab‬ضد بروسال‬ ‫‪ Ab‬ها ‪ ،‬کالس های مختلفی دارند و ما میتونیم علیه یک پاتوژن ‪ ،‬انواع کالس های ‪ Ab‬رو داشته باشیم‪.‬‬ ‫در مورد بروسال هم ‪ Ab‬از کالس ‪ IgM‬میتونه ساخته بشه ‪ ،‬هم میتونه ‪ Ab‬از کالس ‪ IgG‬ساخته بشه و هم ‪ Ab‬از کالس‬ ‫‪IgA‬‬ ‫پس ‪ 3‬نوع ‪ Ab‬غالبی که برعلیه بروسال ممکنه ساخته بشه ‪ IgM / IgG / IgA‬هستش‪.‬‬ ‫‪ Ab ، IgA‬بود که که گفتیم هم فرم داخل سرم داره هم فرم مخاط داره‪.‬‬ ‫در مورد بروسال بیشترین مقدار ‪ IgA‬که ساخته میشه فرم مخاطش هست و چون تو این آزمایش ما داریم از خون اندازهگیری‬ ‫رو انجام میدهیم پس طبیعتاً این کالس ‪ Ab‬در اندازهگیری ما وجود ندارد‪.‬‬ ‫پس میمونه ‪ ، IgM & IgG‬من میتونم بگم که ‪ IgG‬ضد بروسال ‪ IgM +‬ضد بروسال در این فرد برابر است با ‪ 1/80‬پس چیزی‬ ‫که شما در جواب آزمایش تست رایت لوله ای به دست میآورید مقدار کل ‪ Ab‬ضد بروسال است‪.‬‬ ‫این مقدار کل شامل ‪ IgA‬نمیشود چون داخل مخاطه و شامل ‪ 2‬کالس ‪ IgM‬و ‪ IgG‬هستش ‪ ،‬االن میتونم بگم تو بدن این‬ ‫فرد ‪ IgG+IgM 1/80‬ضد بروسال وجود دارد ؛ آیا میتونم باهاش تفسیر کنم ؟ خیر‬ ‫من برای اینکه بتونم تفسیر بکنم تو قدم بعد باید مقدار هرکدام از کالس های ‪ IgG‬و ‪ IgM‬رو تشخیص بدم‪.‬‬ ‫میتونه همش ‪ IgG‬باشه یا میتونه همش ‪ IgM‬باشه و امکانش هست مخلوط باشه بطور مثال نصف ‪ ، IgG‬نصف ‪.IgM‬‬ ‫برای اینکه بتونیم مقدار ‪ Ab‬هارو بر اساس کالس به طور جداگانه محاسبه بکنیم باید یه تست دیگه ای انجام بدیم به نام ‪2ME‬‬ ‫‪ IgG‬لوال دارد ولی ‪ IgM‬لوال ندارد (لوال = پیوند های دی سولفیدی از نوع اینتر بین ‪ 2‬تا زنجیره سنگین)‬  ‫یه تفاوت اساسی که بین ‪ IgM‬و ‪ IgG‬وجود دارد در تعداد پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر است‪.‬‬ ‫‪ IgG‬تعداد پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر زیادی دارد اما ‪ IgM‬تعداد پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر خیلی کمی دارد‬ ‫یا اصالً ندارد‪.‬‬ ‫پس ما اگر از یک ماده ای استفاده بکنیم که قابلیت شکستن پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر رو داشته باشه ‪ ،‬اون ماده ‪IgM‬‬ ‫رو سریع تر از ‪ IgG‬متالشی میکند (‪ IgG‬چون تعداد پیوند هاش زیاده طول میکشه تا متالشی بشه)‬ ‫چون پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر هم زنجیره سبک سنگین رو کنار هم نگه میداره و هم زنجیره های سنگین رو کنار‬ ‫هم نگه میداره ‪ ،‬پس اگه پیوند های دی سولفیدی نوع اینتر شکسته بشوند یعنی کالً زنجیره سبک و سنگین از هم باز میشوند‪.‬‬ ‫اگر ما از این ماده با این قابلیت در صورتی که از رقت مشخصی از اون ماده استفاده بکنیم ‪ ،‬اون رقت میتونه یه کالسی رو که‬ ‫حساس تر است رو حذف بکنه و چون رقتش رو خیلی کم انتخاب میکنیم ‪ ،‬رو اون کالسی که یه ذره مقاوم تر است اثری‬ ‫نمیگذارد‪.‬‬ ‫‪ 2 ( 2ME‬مرکاپتو اتانول )‬ ‫نمونه سرم را در معرض ‪ 2ME‬قرار میدهیم تمام ‪ IgM‬ها (چه ‪ IgM‬های ضد بروسال چه ‪ IgM‬های دیگه سرم حذف میشوند)‬ ‫و اونکه باقی میماند ‪ IgG‬است ولی این ‪ IgG‬ها که همش مال بروسال نیست یه عالمه ‪ IgG‬دیگه توش وجود دارد و برای اینکه‬ ‫بتونید ‪ IgG‬ضد بروسال رو بدست بیارید یبار دیگه اون سرمی که تحت تاثیر ‪ 2ME‬قرار گرفته رو میارید سریال دایلوشن انجام‬ ‫میدهی و بهش ‪ Ag‬یا همون باکتری بروسال رو اضافه می کنی و بعد دوباره میری اینو میخونی این بار هر چیزی که بدست‬ ‫آوردیم = مقدار ‪IgG‬‬ ‫غلظت ‪ 2ME‬بسیار مهم است شما اگر غلظت ‪ 2ME‬رو استاندارد استفاده نکنی و یه ذره غلیظ تر استفاده بکنی ‪ IgG‬هات هم‬ ‫از بین میرود‪.‬‬ ‫پزشک درخواست رایت میدهد یعنی رایت اسالیدی بده اگه ‪ +‬بود برو سراغ رایت لوله ای و به من مقدار کل ‪ Ab‬ها رو گزارش‬ ‫بکن‪.‬‬ ‫یه پزشک درخواست ‪ 2ME‬هم میدهد و اگر مقدار توتال رو از مقدار ‪ 2ME‬کم بکنیم چیزی که باقی میمونه میشه مقدار‬ ‫‪IgM‬‬ ‫‪ 2ME‬پیوند های دی سولفیدی ناحیه لوال رو از بین میبرد نه پیوند های دی سولفیدی بین زنجیره سبک و سنگین ؛ چون‬ ‫اگه ‪ 2‬تا بازو از هم جدا شوند هر چند که سبک سنگین به هم وصل باشند ولی دیگر قدرت آگلوتیناسیون ندارد‪.‬‬ ‫محلول ‪ 2ME‬بوی بدی میدهد ‪ ،‬قبالً ‪ 2ME‬رو خودشون تو آزمایشگاه درست میکردند و سپس رقیق میکردند ‪ ،‬گاهی بخاطر‬ ‫رقیق سازی اشتباه شما ممکن بود ‪ IgG‬هات هم از بین برود ولی کسی نمیفهمید ‪ ،‬بخاطر همین شرکت ها ‪ 2ME‬رقیق شده‬ ‫رو خودشون ساختند‪.‬‬ ‫اگر غلظت ‪ 2ME‬کمتر باشد ‪ IgM‬ها هم حذف نمیشوند‪.‬‬ ‫فرم غلیظ ‪ 2ME‬رو شما سالیان سال میتونی تو آزمایشگاه نگه داری ‪ Expire‬نداره اما اگر محلول ‪ 2ME‬رو شما رقیق بکنی‬ ‫این مدت ها زمان محدودی میتونه بهت جواب بده بعد از یه مدت اثرش رو از دست میدهد ‪ ،‬به این خاطر ما در مورد محلول‬ ‫های ‪ 2ME‬میگیم حتماً وقتی میخواهید ‪ 2ME‬رو استفاده بکنی حتماً تاریخ انقضاء اش رو نگاه بکنید‪.‬‬ ‫به ‪ Ag‬رایت ‪ Expire‬شده نگاه کن اگه لکه و رسوبی ته لوله نداشته باشد ‪ ،‬استفاده بکن هرچند تاریخ ‪ Expire‬اش هم گذشته‬ ‫چون شما اون جسد باکتری رو میخواهید کار خاصی قرار نیست برامون انجام بده ولی در مورد محلول ‪ 2ME‬اگر شما محلول‬ ‫‪ 2ME‬داشتید که تاریخ انقضاء اش ‪ 1‬روز گذشته ‪ ،‬اجازه نداری استفاده بکنی (به هیچ وجه ظاهرش هم تغییری نمیکند)‬ ‫چون آنزیمی که داخلش هست غیر فعال شده و عمالً کاری که شما الزم دارید رو براتون انجام نمیده‬ ‫روش انجام ‪: 2ME‬‬ ‫یه تفاوتی با ‪ Wright‬داره‬ ‫‪ )1‬تو تست رایت ‪ 10‬تا لوله میگذاشتیم ولی تو تست ‪ 9 2ME‬تا لوله میگذاریم ‪ ،‬یه لوله کمتر ‪ ،‬لوله نهم لوله شاهد است ‪،‬‬ ‫خیلی احتمالش کمه که مقدار ‪ IgG‬تا لوله نهم بیاد بنابراین یه لوله رو بخاطر صرفهجویی در مواد کم کردهاند‪.‬‬ ‫‪ )2‬از بافر ‪ 2ME‬هم برای رقت سازی استفاده میکنیم ‪ ،‬هم برای حذف ‪( IgM‬بافر جایگزین سرم فیزیولوژی میشود)‬ ‫تو لوله اول ‪ 900‬تا بافر و تو لوله های بعدی ‪ 500‬تا بافر ‪ ،‬بعد به لوله اول ‪ 100‬تا سرم اضافه میکنی ؛ فقط این جا وقتی در‬ ‫لوله اول بافر و سرم رو ریختی این رو باید یه مدت زمانی آنکوبه بکنی ‪ 15 ،‬دقیقه و گاهی تا ‪ 40‬دقیقه هم راه دارد‪.‬‬ ‫این زمان بابت حذف ‪ IgM‬ها است بعد سریال دایلوشن تا لوله ‪ 8‬سپس از لوله ‪ 500 ، 8‬الندا اوت میکنیم و لوله ‪ 9‬لوله شاهد‬ ‫ما است که داخلش فقط بافر ‪ 2ME‬و ‪ 2ME Ag‬داریم‪.‬‬ ‫بعد از ‪ Ag‬استفاده میکنیم ‪ 2ME Ag ،‬بیرنگ است‪.‬‬ ‫بعد به هر لوله باکتری بروسال مخصوص ‪ 2ME‬رو اضافه میکنیم ؛ ‪ 24‬ساعت آنکوبه میشود و بعد خوانش دقیقاً شبیه به تست‬ ‫رایت است‪.‬‬ ‫آخرین لوله ای که توش آگلوتیناسیون داشتی اون میشه مقدار ‪ IgG‬شما تحت عنوان عدد ‪2ME‬‬ ‫در رایت آگلوتیناسیون ها آبی رنگ بود ولی اینجا کامالً سفید رنگ هست چون ‪ Ag‬ما سفید رنگ است‪.‬‬ ‫اول لوله شاهد رو نگاه کنید (خیلی مهم)‬ ‫پس به هیچ وجه امکان ندارد که تست ‪ 2ME‬شما از رایت بزرگتر باشه ولی میتونه تست ‪ 2ME‬تون دقیقاً برابر با رایت باشه‪.‬‬ ‫در ‪ 2ME‬ما مجموع ‪ 1 IgG‬بعالوه ‪ 3 IgG‬رو اندازه میگیریم یعنی ‪ 2 IgG‬و ‪ 4‬با روش ‪ 2ME‬قابلیت اندازه گیری ندارند‪.‬‬ ‫‪ IgG‬دو و چهار قادر نیستند وارد واکنش آگلوتیناسیون بشوند ؛ ‪ IgG‬دو و چهار به بروسال متصل میشوند ولی به ما آگلوتیناسیون‬ ‫نمیدهند‪.‬‬ ‫اگر تست رایت – تست ‪ – 2ME‬تست ‪ – Combs‬نیست ‪ ،‬چون تست رایت و ‪ 2ME‬قابلیت شناسایی این ‪ 2‬ساب کالس‬ ‫‪ IgG‬رو ندارند ؛ امکان داره رایت – ‪ + Combs – 2ME‬بشود و ‪ IgG‬دو و چهار وجود داشته باشد‪.‬‬ ‫جلسه ‪ 7‬آز ایمنی ‪:‬‬ ‫در تست ‪ C wright‬پزشک به دنبال ‪ Ab‬از کالس ‪ IgG‬دو و چهار است و برای بیمار رایت – ‪ – 2ME‬خودمون از خودمون‬ ‫اجازه نداریم ‪ C wright‬انجام بدیم حتی ‪ 2ME‬هم نمیتونیم ؛ اگر پزشک بخواد جداگانه بخواد بدونه ‪ ،‬جداگونه درخواست‬ ‫‪ C wright / 2ME‬میدهد‪.‬‬ ‫اگر رایت ‪ + 2ME +‬بود ‪ Combs‬نذار چون روند تولید ‪ IgG‬دو و چهار طوری است که معموالً اگر ‪ IgG1&3‬و ‪ IgM‬حضور‬ ‫داشته باشند ‪ IgG2&4 ،‬حضور ندارند ولی برعکس اگر رایت و ‪ 2ME‬ما – بود الزامه که تست ‪ C/W‬بگذاری چون دنبال کالس‬ ‫هایی از ‪ Ab‬میگردی که در تست ‪ Wright‬و ‪ 2ME‬مشاهده نمیشود‪.‬‬ ‫‪ Ab‬های ناقص یا بلوکان‪ :‬کالس های ‪ IgG2&4‬به ویژه ‪IgG4‬‬ ‫در داخل بدن‬ ‫به این صورت هستند‪.‬‬ ‫به این خاطر به این ها میگویند ‪ Ab‬های ناقص یا بلوکان‬ ‫این ‪ Ab ، Ab‬ضد بروسالست اما بعد از تولیدش رفته یکی از بازوهاش رو معاوضه کرده و خودش رو ناقص کرده ‪ ،‬ما باید به‬ ‫این ‪ Ab‬ناقص کمک بدهیم که علیرغم اون نقص بتونه در واکنش آگلوتیناسیون شرکت بکنه که ما بتونیم به واسطه‬ ‫آگلوتیناسیون اون رو اندازه بگیریم‪.‬‬ ‫اگر بتونیم این کمپلکس ها رو به هم وصل بکنیم بزرگ و قابل دیدن میشوند‪.‬‬ ‫در کالس های ‪ Ab‬ناحیه ‪ Fc‬کامالً شبیه به هم است‪.‬‬ ‫معموالً ‪ Ab‬های ‪ IgG2&4‬با ‪ IgG1&3‬و ‪ IgM‬با هم نیستند ؛ ‪ IgG2&4‬رو همراه ‪ IgM‬به هیچ وجه نداری ولی ممکنه همراه‬ ‫‪ IgG1&3‬داشته باشیم‪.‬‬ ‫بدن اول ‪ IgM‬میسازد بعدش ‪ IgG‬میسازه بعد تو انتهای ساخت ‪ IgG‬کم کم از کالس یک و سه به سمت کالس دو و چهار‬ ‫میرود‪.‬‬ ‫در زمانی که داره از کالس ‪ 1‬و ‪ 3‬به سمت کالس ‪ 2‬و ‪ 4‬میرود ممکنه هر زمان هر دو تا مقدار وجود داشته باشه (هم ‪IgG2&4‬‬ ‫و هم ‪.)IgG1&3‬‬ ‫تبدیل شدن در بین ‪ IgG‬ها رو نداریم که مثالً ‪ IgG2‬بشه ‪ IgG3‬؛ نه اینا هر کدوم یه کالس جداگانه هستن و توسط ‪B cell‬‬ ‫به صورت مستقیم ساخته میشوند‪.‬‬ ‫اگر ‪ IgG1&3‬هم داخل این لوله وجود داشته باشد ‪ AHG‬میتونه به اونا هم متصل بشود ؛ سوال پیش میاد تست ‪Combs‬‬ ‫‪ Wright‬رو باید روی چه لوله ای انجام بدیم ؟‬ ‫اول اینکه تست ‪ C/W‬در ادامه تست رایت لوله ای انجام میشود (روی رایتی که خونده شده ‪ C/W‬انجام میدی) به طور مثال‪:‬‬ ‫در تست رایت در لوله اول آگلوتیناسیون دارم میبینم‬ ‫در لوله دوم آگلوتیناسیون دارم میبینم‬ ‫در لوله سوم آگلوتیناسیون نمیبینم‬ ‫با لوله هایی که آگلوتیناسیون دارند کاری ندارم و میگذارمشون کنار ‪ ،‬پس من ندید جواب ‪ Combs‬لوله اول و دوم رو مثبت‬ ‫در نظر میگیرم ‪ ،‬پس شما تمام لوله های ‪ +‬رایت رو بعنوان ‪ + Combs‬در نظر میگیرید‪.‬‬ ‫لوله – رایت رو برمیدارید و بعد از سانترفیوژ و خالی کردن سرم ‪ ،‬روش ‪ AHG‬میریزید بعد از اضافه شدن ‪ AHG‬هم باز هیچ‬ ‫آگلوتیناسیون جدیدی دیده نمیشود‪.‬‬  ‫جواب ‪= C/W‬‬ ‫اگر عدد کمس رایت و رایت لوله ای شما دقیقاً یه تیتر باشد به معنای کمس رایت – است‪.‬‬ ‫و ‪ C/W= negative‬ادعا میکند در لوله اول من ‪ AHG‬اضافه کردم و آگلوتیناسیون ندیدم در حالی که‬ ‫‪W=1/40‬‬ ‫من تو جواب رایت گزارش آگلوتیناسیون دادم تو لوله اول و دوم ‪ ،‬پس جواب غلطه‬ ‫‪W=1/640‬‬ ‫‪C/W=1/640‬‬ ‫این یعنی جواب کمس منفی است سریع نگو آی این عدد کمس رایتش خیلی باالست نه ؛ ‪ IgG2&4‬زیاد داره نه غلطه به عدد‬ ‫رایت نگاه کن‪.‬‬ ‫اگر ‪ W‬با ‪ C/W‬عددش یکسان باشد به معنای منفی بودن ‪ C/W‬هستش‬ ‫عدد ‪ C/W‬یا عدد خود رایته یا از رایت بزرگتره و اگه تست رایت شما کالً منفی باشد تست ‪ C/W‬هم میتونه – باشد‪.‬‬ ‫اصالً ما کمس رایت کوچکتر از رایت نداریم‪.‬‬ ‫‪ C/W=1/80 W=1/40‬به معنی این نیست که مقدار ‪ IgG2&4‬خیلی زیاده چون از ‪ 1/80‬که داری نصفش ممکنه ‪IgG1&3‬‬ ‫باشه‪.‬‬ ‫‪W=1/40 2ME=negative C/W=1/80‬‬ ‫این جواب کالً غلطه ؟ چرا ؟ چون ما هم زمانی حضور ‪ IgM‬و ‪ IgG2&4‬رو نداریم‪.‬‬ ‫‪1/40 IgM & 1/40 IgG2&4‬‬ ‫‪W=1/40‬‬ ‫‪2ME=1/40 C/W=1/80‬‬ ‫‪ 1/40 IgG1&3‬و ‪ 1/40 IgG2&4‬داریم‪.‬‬ ‫هم زمانی ‪ IgM‬و ‪ IgG4‬کالً غلطه‪.‬‬ ‫اتصال ‪ Ab 2‬به هم اونقدر بزرگ نیست که بتونه آگلوتیناسیون تشکیل بدهد ولی این ‪ AHG‬ما رو مصرف میکنه یا نه ؟ بله‬ ‫مصرف میکنه پس برای کمس رایت باید تمام سرم اضافه و آزاد خودم رو یعنی ‪ Ab‬های آزادم رو از داخل لوله بیارم بیرون ‪،‬‬ ‫‪ Ab‬ضد بروسال آزاد نیست به باکتری چسبیده است پس نسبت به بقیه اجزای سرم سنگین تره و وقتی شما سانتر بکنی باکتری‬ ‫بروسال ‪ Ab +‬ضد بروسال ‪ ،‬رسوب میکند ؛ هرچی که رو بمونه = بقیه محتویات سرم‪.‬‬ ‫احتمال اینکه عدد کمس رایت بیاد باال خیلی کمه الکی ‪ AHG‬که محلول گرونی است رو استفاده نکنید پس ‪ 2‬به ‪Combs 2‬‬ ‫بگذار اگر – شد دیگه – شده دیگه ‪ ،‬پس نیاز به انجام بقیه نیست‪.‬‬ ‫اگر هر دو تا لوله ‪ +‬شد برو دو تا لوله دیگه بردار ‪ ،‬اگه یکی از اون ‪ 2‬لوله ‪ +‬و دیگری – بشه ‪ ،‬منفی رو دیدی تست تمومه‬ ‫‪ AHG‬حاوی ‪ Ab‬ضد ‪ IgG‬هست‪.‬‬ ‫یه قطره کوچک سرم ‪ AHG cc 5 ،‬را خنثی میکند‪.‬‬ ‫تو اتصال ‪ Ab 2‬به هم آگلوتیناسیون دیده نمیشود حتی اگه ‪ 3‬تا ‪ Ab‬به هم وصل بشوند شما آگلوتیناسیون نمیبینی‪.‬‬  ‫ما دو نوع ‪ AHG‬داریم ‪:‬‬ ‫‪ )1‬پلی کلونال‬ ‫‪ )2‬مونو کلونال‬ ‫پس از سانتر کردن لوله های رایت باید کل محلول رویی را بیرون بریزید (کوچکترین قطره سرم هم نباید تو لوله بمونه چون‬ ‫که میتونه ‪ AHG‬رو خنثی بکند)‪.‬‬ ‫وقتی لوله را سر و ته کرده و خالی کردیم با همون حالت میریم روی گاز استریل تا ‪ Ag‬ته ظرف از دست نرود‪.‬‬ ‫به لوله های سالم خالی شده بر روی گاز ‪ 1‬قطره ‪ AHG‬اضافه میکنیم و این لوله رو میذاریم به مدت نیم ساعت تو دمای ‪37‬‬ ‫درجه داخل انکوباتور که ‪ AHG‬ها کامالً برن به ‪ Ab‬ها متصل بشوند‪.‬‬ ‫بعد از نیم ساعت آنکوبه کردن میخواهم آگلوتیناسیون رو ببینم ‪ ،‬چون حجم کمه (‪1‬قطره) دیدن آگلوتیناسیون تو یه قطره‬ ‫خیلی سخته ‪ ،‬پس سرم فیزیولوژی رو بهش برمیگردونید همون ‪ 1000‬تایی که برداشتهام دوباره بهش اضافه میکنم‪.‬‬ ‫‪ 2‬تا راه دارم‬ ‫‪ )1‬روش اوژانسی ‪ :‬لوله رو ‪ 1‬دقیقه تو دور ‪ 1500‬سانتر میکنم بعد از لحاظ آگلوتیناسیون چک میکنم‬ ‫‪ )2‬روش روتین ‪ :‬این لوله رو با همین حالت پارافیلم میزنیم و میذاریم تو دمای ‪ 37‬درجه ‪ 24‬ساعت دیگه هم بمونه و بعد فردا‬ ‫صبح میام و از لحاظ آگلوتیناسیون چک اش میکنم‪.‬‬ ‫روش دوم دقیق تره ‪ ،‬روش اول در شرایطی استفاده میشود که بیمار جوابدهی دارد ‪ ،‬همون آگلوتیناسیون رو میبینیم ولی‬ ‫از لحاظ اندازه ممکنه یه مقدار کوچیکتر باشه‪.‬‬ ‫معنی پلی کلونال و مونو کلونال ؛ تهیه ‪ AHG‬برای بخش کمس رایت یه نوعی بهتره و برای تهیه و استفاده در یه بخش دیگه‬ ‫یه نوع دیگهای بهتره ؛ پس نمی تونیم بگیم پلی کلونال بهتره یا مونو کلونال چون بستگی داره به کاری که میخوای باهاش‬ ‫انجام بدی‪.‬‬ ‫پلی کلونال ‪ Ab :‬های مونو کلونال و پلی کلونال ممکنه تو هر کاری باشه مثالً میتونیم ‪ IgG‬پلی کلونال یا مونو کلونال داشته‬ ‫باشی یا میتونی ‪ IgM‬پلی کلونال یا مونو کلونال داشته باشی‪.‬‬ ‫پلی کلونال به جای ‪ 2‬تا ‪ 6 Fab‬تا ‪ Fab‬داره نه این کالً غلطه ‪ ،‬ساختار ‪ Ab‬ما چه پلی کلونال چه مونو کلونال شبیه ساختار‬ ‫روتین ‪ Ab‬هستش ؛ پلی و مونو مربوط به چند زیر واحد بودن نیست‪.‬‬ ‫پلی کلونال یعنی چندین نوع ‪Ab‬‬ ‫آیا ممکنه قسمت های مختلفی از این ‪ Fc‬مورد هدف باشه ؟ بله‬ ‫در تست کمس رایت ما حتماً نیاز به پلی کلونال داریم چون موقعیت قرارگیری ‪ Fc‬باعث در دسترس قرار گرفتن اپیتوپ های‬ ‫مختلف میشود مثالً یه زمانی اپیتوپ شماره ‪ 1‬در دسترس است و یه زمان دیگه ای اپیتوپ شماره ‪ 2‬در دسترس است‪.‬‬ ‫پلی کلونال کمک میکنه با هر ساختاری که ‪ Fc‬قرار گرفته یه ‪ Ab‬بتونه بهش بچسبد و اون نتیجه رو برای ما مشخص میکنه‬ ‫در ‪ C/W‬اولویت استفاده از پلی کلونال باال است‪.‬‬ ‫تو فرایند تولید ‪ Ab‬مونو کلونال شما اون ‪ B cell‬هایی که ‪ Ab‬میسازند رو طوری تقسیم میکنی که داخل هر چاهکی فقط‬ ‫یه ‪ B cell‬بیفته ‪ ،‬بعد اختصاصیت ‪ Ab‬که هر ‪ B cell‬تولید میکند رو چک میکنی و اگه ‪ Ab‬تولید شده توسط ‪ 3‬تا کولون‬ ‫رو باهم مخلوط کنی میشه پلی کولونال ولی اگه فقط از یه کولون استفاده بکنی میشه مونو کلونال‪.‬‬ ‫به اپیتوپ ‪ 1‬شاید ‪ Ab1‬ضد ‪ Fc‬وصل نشد اگه مونو کلونال بود به چوخ میرفت ولی چون در پلی کلونال ‪ Ab2&3‬ضد ‪ Fc‬وصل‬ ‫میشود ‪ ،‬به چوخ نمیره‪.‬‬ ‫توی ‪ 2‬هفته اول ‪ Ab‬ساخته میشود ولی خیلی اندک به طوری که مقدارش قابل اندازهگیری نیست‪.‬‬ ‫دوره سروکانورسیون ‪ :‬دوره ای که از زمان ورود تا ساخت اولین ‪ Ab‬طول میکشد‪.‬‬ ‫شما تو تست تب مالت اجازه تکرار دادن به بیمار رو دارید ؛ تو تست بارداری تو رنج مشکوک ما اجازه داریم تکرار بدیم ولی تو‬ ‫‪ CRP‬به هیچ وجه اجازه نداری تکرار بکنی‪.‬‬ ‫بیمار با بدن درد شدید ‪ ،‬تعریق ‪ ،‬تب و لرز ‪ ،‬خودشم میگه من دامدارم و ‪........‬خالصه همه عالمت ها به سمت تب مالته ولی‬ ‫بعد از انجام تست جواب کالً – است = دوره سروکانورسیون‬ ‫تب ‪ 6‬ساعت بعد از شروع عفونت شروع میشود‪.‬‬ ‫اگه بیمار در فاز حاد تشخیص داده بشه و درمان بگیرد خیلی راحت با قرص تتراسایکلین به طور کامل درمان میشود‪.‬‬ ‫‪W=1/40 2ME=negative C/W=1/40‬‬ ‫در نتیجه چون عدد کمس رایت با خود رایت برابره نشون میده کمس منفیه ‪ ،‬عدم وجود ‪ IgG‬و فقط یه مقداری ‪ IgM‬داره یا‬ ‫تو دوره آغاز تولید ‪ Ab‬است یا این مقدار مربوط به ابتالی قبلی اش به تب مالت است پس با اجازه تکراری که داریم به بیمار‬ ‫تکرار میدهیم‬ ‫‪W=1/160 2ME=1/80 C/W=1/160‬‬ ‫نتیجه آزمایش به ما میگه که بیمار ‪ IgM‬داشت االن بیشتر هم شده و قبالً ‪ IgG‬نداشت االن ‪ IgG‬هم ساخته شده تو بدنش‬ ‫پس بیمار تو فاز حاد بیماری هستش که پزشک براش بدون شک تتراسایکلین تجویز میکنه‪.‬‬ ‫در انتهای فاز مزمن کالس ‪ A