Bordetella: Présentation PDF

Bordetella Les Bordetella sont de petits bacilles à Gram négatif, immobiles, aérobies stricts. Leur culture exige des milieux riches. La principale espèce pathogène est B. pertussis, l’agent de la coqueluche.  Généralités Le genre Bordetella regroupe une espèce strictement humain...

Bordetella Les Bordetella sont de petits bacilles à Gram négatif, immobiles, aérobies stricts. Leur culture exige des milieux riches. La principale espèce pathogène est B. pertussis, l’agent de la coqueluche.  Généralités Le genre Bordetella regroupe une espèce strictement humaine (B. pertussis) et des espèces retrouvées à la fois chez l'homme et l'animal (B. parapertussis, B. bronchiseptica, B. avium, B. hinzii, B. holmesii et B. trematum) ainsi qu'une espèce de l'environnement retrouvée très rarement chez l'homme (B. petrii).  Les bactéries du genre Bordetella pathogènes pour l'homme sont classiquement de petits coccobacilles à Gram négatif à coloration bipolaire, immobiles, à l'exception de B. bronchiseptica. B. pertussis est très court (0,2 à 0,3 μm × 0,5 à 0,8 μm) et immobile ; d'autres espèces peuvent être plus longues (1 à 2 μm) voire devenir filamenteuses lors des repiquages.  BORDETELLA PERTUSSIS Habitat C’est une bactérie strictement humaine qui se multiplie sur l’épithélium bronchique. Il ne semble pas exister de porteurs sains. Transmission Elle se fait par voie aérienne lors des accès de toux. La coqueluche est une maladie très contagieuse, se propageant par épidémies. Avant la vaccination, la plupart des enfants contractaient la maladie. Actuellement, la maladie est moins fréquente, mais n’a pas disparu. On peut l’observer chez l’enfant non vacciné ou chez l’adulte.  Pouvoir pathogène Après une incubation de 7 à 10 jours, l'expression clinique de la coqueluche, qui est une maladie très contagieuse, est très variable selon les sujets et on distingue : la forme classique typique de l'enfant qui comporte trois phases après une incubation de 7 a 10 jours : – phase catarrhale (1 à 2 semaines) avec des signes non spécifiques d'infection des voies aériennes supérieures et une très grande contagiosité ; – phase paroxystique (4 à 5 semaines) avec des quintes de toux, reprises inspiratoires sonores (chant du coq), vomissements, cyanose et possibles complications infectieuses ; – phase de convalescence (plusieurs semaines voire plusieurs mois).  la forme du petit nourrisson (< 6 mois) qui peut se traduire par une détresse respiratoire avec défaillance polyviscérale et hyperlymphocytose majeure. Cette pathologie peut être grave voire mortelle ; la coqueluche de l'adulte qui est souvent méconnue; elle est très fréquente et doit être évoquée devant une toux persistante durant plus d'une semaine.  Facteurs de pathogénicité B. pertussis se multiplie sur l’épithélium bronchique sans le franchir. Les altérations des cellules bronchiques ont pour effet d’inhiber les mouvements ciliaires. Le mucus bronchique ne peut être alors éliminé que par la toux. La bactérie adhère à la muqueuse bronchique par différentes adhésines. La principale est l’hémagglutinine filamenteuse, mais des adhésines de type fimbriae et une protéine de la membrane externe, la pertactine, interviennent également.  La bactérie produit une toxine, la toxine de pertussis, qui possède de nombreuses activités biologiques : elle augmente la lymphocytose (en empêchant les lymphocytes circulants de regagner les organes lymphoïdes périphériques), elle augmente la sensibilité à l’histamine, elle abaisse la glycémie en stimulant la production d’insuline. Son mode d’action est le suivant : elle bloque l’activité d’une protéine G intervenant dans la régulation négative de l’adénylcyclase (protéine Gi). Son action s’exerce par un processus d’ADP-ribosylation. Elle a pour résultat d’augmenter la production d’AMPc dans la cellule.  Une cytotoxine trachéale semble impliquée dans les lésions bronchiques et l’inhibition des mouvements ciliaires. B. pertussis produit également une adénylcyclase qui pourrait altérer les fonctions des cellules phagocytaires. L’expression de la plupart des facteurs de pathogénicité est régulée par un gène appelé bvg (Bordetella virulence gene). L’immunité acquise contre l’infection semble principalement due à des anticorps dirigés contre les principaux facteurs de pathogénicité.  Diagnostic biologique Prélèvements Devant une suspicion de coqueluche, le prélèvement biologique doit être réalise le plus précocement possible. On recommande chez le nourrisson l'aspiration nasopharyngée douce a l'aide d'une sonde molle et fine (Fig. 30.15). Chez les adolescents ou les adultes, une personne entrainée peut réaliser un prélèvement nasopharyngé à l'aide d'un écouvillon.  Transport B. pertussis est très fragile et le prélèvement doit être acheminé immédiatement au laboratoire. Le biologiste doit avoir été prévenu afin de préchauffer des milieux de culture pour ensemencer le prélèvement sans délai à son arrivée, moins d'une demi-heure après sa réalisation. Un milieu de transport Amies® avec charbon peut être utilisé si l'acheminement du prélèvement au laboratoire est trop long.  Culture La culture doit être tentée systématiquement (spécificité 100 %) dans les trois premières semaines de la maladie, même si la sensibilité n'est que de 50 à 60 % durant la 1re semaine de toux et qu'elle diminue fortement ensuite. La viabilité des bordetelles est très faible.  La culture se fait en aérobiose et en atmosphère humide sur milieux spéciaux spécifiques des bordetelles à base de pomme de terre : milieux solides de Bordet-Gengou (BG) ou de Regan- Lowe. La sélectivité de ces milieux de culture peut être augmentée par ajout de cephalexine à 40 μg/ml. La température d'incubation est de 35 a 36 °C et les premières colonies hémolytiques n'apparaissent qu'entre 3 et 7 jours. Celles-ci sont classiquement en ≪ gouttelettes de rosée ≫ (Fig. 30.16).  Un résultat de culture négative ne peut être rendu qu'après 10 jours d'incubation des milieux. Le diagnostic d'orientation repose sur des tests assez simples (Tableau 30.31) et l'identification est correctement réalisée par la spectrométrie de masse de type MALDI-TOF.  Recherche de constituants bactériens sans culture par PCR L'ADN bactérien est recherché par PCR pour porter le diagnostic de coqueluche et/ou de Bordetella directement sur produit pathologique, prélevé dans les mêmes conditions que pour la culture. Différentes cibles peuvent être utilisées : le promoteur du gène codant la toxine de Pertussis : une seule copie par génome, spécifique de B. pertussis avec une sensibilité de 65 à 80 % ; des séquences d'insertion (IS), présentes en multicopies, de 10 à plusieurs centaines induisant une meilleure sensibilité, 80 à 100 % selon les études : – IS481 permet la detection de B. pertussis et B. holmesii, mais parfois aussi celle de B. bronchiseptica ; – IS1001 permet la detection de B. parapertussis, mais aussi celle de B. bronchiseptica dans certains cas.  La PCR permet de détecter le génome sur une période de 3 à 4 semaines après le début de la toux. La positivité de la PCR ne saurait préjuger de la viabilité du germe.  Diagnostic indirect : sérodiagnotic La sérologie n'a d'intérêt qu'après 4 à 5 semaines de toux chez une personne non vaccinée depuis trois ans afin de pouvoir l‘interpréter correctement. En effet, les anticorps n'apparaissent véritablement qu'après 4 à 5 semaines de toux avec un pic à 5 à 6 semaines, et leur progression à l'exception du pic est parallèle à celle d'une personne vaccinée depuis moins de 3 ans (Fig. 30.17). Elle ne doit donc jamais être réalisée chez les nouveau-nés, les nourrissons et les enfants ; elle était possible chez les adolescents et adultes après avoir correctement évalué l'interet de cette prescription. La technique de référence est la détection par technique ELISA d'IgG anti-toxine Pertussis (PT) specifique de B. pertussis dans le sérum.