اساس و پایه ی آزمایش های سرولوژی PDF

‫اساس و پایه ی آزمایش های‬ ‫سرولوژی‬  ‫بهترین روش برای تشخیص یک بیماری‪ :‬جداسازی عامل آن بیماری‬ ‫معایب‪ :‬میکروب عمقی یا عدم امکان نمونه گیری یا نیازبه ابزارخاص مانند کشت ویروس‬ ‫← در نتیجه استفاده ازروش های سرولوژی‪ :‬واکنش بین آنتی ژن وآنتی با...

‫اساس و پایه ی آزمایش های‬ ‫سرولوژی‬  ‫بهترین روش برای تشخیص یک بیماری‪ :‬جداسازی عامل آن بیماری‬ ‫معایب‪ :‬میکروب عمقی یا عدم امکان نمونه گیری یا نیازبه ابزارخاص مانند کشت ویروس‬ ‫← در نتیجه استفاده ازروش های سرولوژی‪ :‬واکنش بین آنتی ژن وآنتی بادی‬ ‫ کمپلکس ناپایدار (اتصال از نوع غیر کواالن )‬ ‫ واکنش برگشت پذیر است(رفت و برگشتی) و تحت شرایطی امکان برگشت واکنش و جدایی‬ ‫آنتی ژن از آنتی بادی وجود دارد‬ ‫انواع پیوندهای بین آنتی ژن و آنتی بادی ‪:‬‬  ‫شرایط الزم برای ایجاد واکنش کمپلکس ‪Ag-Ab‬‬ ‫‪.1‬وجود میل کششی بین آنتی ژن و آنتی بادی‬ ‫‪.2‬استفاده از محیط الکترولیت (باردار)‪:‬استفاده از بافر نمکی (شرایط بهینه = فیزیولوژیک)‬ ‫‪PH.3‬مناسب‪ PH:‬فیزیولوژیک (بین ‪ 7.2‬تا‪ PH )7.4‬اسیدی شدید = جدایی کمپلکس‬ ‫‪.4‬زمان کافی برای اتصال(بستگی به نوع آنتی ژن و آنتی بادی)‬ ‫‪.5‬حرارت مناسب‪ :‬دمای بهینه = فیزیولوژیک (‪ 37‬درجه )‬ ‫‪.6‬غلظت مناسب آنتی ژن و آنتی بادی نسبت به هم‬ ‫*پدیده منطقه ای یا ‪phenomenal zone‬‬ ‫بیان کننده این موضوع است که اگر‬ ‫غلظت آنتی ژن بیشتر از آنتی بادی باشد‬ ‫(‪ )post zone‬کمپلکس ایجاد شده ولی قابل‬ ‫مشاهده نمی باشد‪.‬عکس این قضیه نیز به‬ ‫همین صورت بوده و با اصطالح ‪pre‬‬ ‫‪ zone‬یا ‪ pro zone‬شناخته می شود‪.‬‬  ‫شرایط الزم برای ایجاد واکنش کمپلکس ‪Ag-Ab‬‬ ‫‪-7‬تکان دادن (با شیکر یا اپلیکاتور و سانترفیوژ برای افزایش احتمال برخورد آنتی ژن و آنتی بادی)‬ ‫‪-8‬اثر مواد احیا کننده مثل مرکاپتواتانول (‪) 2-Me‬‬ ‫‪.-9‬ساختمان‪:‬باید هر دو ظرفیت آنتی بادی پر شود تا کمپلکس مشاهده شود‪.‬‬ ‫در ‪ IgM‬اگر ‪ 7‬یا ‪ 8‬ظرفیت هم پر باشد واکنش قابل مشاهده است‪.‬‬ ‫*مرکاپتواتانول با تجزیه (پیوند های دی‬ ‫سولفیدی) زیر واحد های آنتی بادی های‬ ‫چندمری مثل ‪ IgM‬به مونومر های سازنده‬ ‫آنها‪ ،‬تشکیل کمپلکس را تسهیل میکند‪.‬البته باید‬ ‫در استفاده از این ماده دقت کرد‪ ،‬زیرا غلظت‬ ‫باالی آن سبب تجزیه کامل آنتی بادی می شود‬  ‫*انواع آنتی بادی‪:‬‬ ‫‪IgG‬‬ ‫‪IgM‬‬ ‫‪IgE‬‬ ‫‪IgA‬‬ ‫‪IgD‬‬ ‫*ساختمان آنتی بادی‪:‬‬ ‫*آنتی بادی ها بصورت مونومری (مثل ‪ ) IgG‬ویا بصورت چندایزومری (مثل ‪، IgM‬پنتامر) هستند‪.‬‬  ‫واکنش های اصلی بین آنتی ژن و آنتی بادی‬ ‫بر اساس وضعیت حاللیت آنتی ژن‪ 3 ،‬نوع واکنش اصلی بین آنتی ژن و آنتی بادی تعریف شده است ‪:‬‬ ‫‪-1‬اگر آنتی ژن همانند آنتی بادی محلول باشد‪ ،‬واکنش از نوع رسوبی یا ‪ Precipitation‬است که‬ ‫خود به دو نوع تقسیم می شود‬ ‫واکنش رسوبی در فاز مایع (در لوله)‬ ‫‪-‬‬ ‫واکنش رسوبی در فاز نیمه جامد (در ژل آگارز)‬ ‫‪-‬‬ ‫انتشار یک طرفه و دو طرفه ‪ ،‬از انواع واکنش رسوبی نیمه جامد است‪.‬انتشار دو طرفه روشی بسیار‬ ‫کارآمد برای بررسی اثر آنتی بادی های مختلف برروی آنتی ژن می باشد‪.‬‬  ‫واکنش رسوبی یا ‪Precipitation‬‬ ‫در فاز مایع‪:‬در یک لوله ی مویینه یک حجم از آنتی ژن با یک حجم از آنتی بادی مخلوط میکنیم جایی که تناسب‬ ‫غلظت برقرار باشد و آنتی ژن و آنتی بادی اختصاصی هم باشند یک حاله رسوبی در وسط محلول مشاهده میشود‪.‬‬ ‫در فاز نیمه جامد‪:‬روی ژل آگارز صورت می گیرد(دو نوع‪:‬انتشاریک طرفه وانتشار دو طرفه)‬ ‫یک طرفه‪:‬در این حالت ژل ما حاوی آنتی ژن هست و وسط آن سوراخی تعبیه شده که سرم حاوی آنتی بادی را‬ ‫درون آن قرارمیدهیم‪.‬وقتی آنتی ژن با آنتی بادی اختصاصی خودش برخورد بکند الیه رسوبی روی ژل خواهیم‬ ‫دید‪.‬آنتی بادی به سمت آنتی ژن حرکت میکند(یک طرفه)‬ ‫دو طرفه‪:‬هنگامی که ژل آگارز عاری از آنتی ژن و آنتی بادی باشد‪.‬ژل دارای حفره های مختلفی هست(در حفره‬ ‫ی مرکزی آنتی ژن قرار می دهیم) در حفره های اطراف آنتی بادی های مختلفی را می توانیم بریزیم(زمانی که‬ ‫میخواهیم اثر آنتی بادی های مختلف نسبت به یک آنتی ژن را مقایسه کنیم)‬ ‫نفوذ همزمان آنتی ژن و آنتی بادی درون ژل(دو طرفه)‬ ‫اگر با هم برخورد کنند و اختصاصی هم باشند حالت رسوبی اطراف چاهک ها مشاهده می کنیم‪.‬‬  ‫واکنش های اصلی بین آنتی ژن و آنتی بادی‬ ‫‪-2‬اگر آنتی ژن نامحلول باشد‪ ،‬نوع واکنش لخته ای یا ‪ Agglutination‬است که خود به سه زیر‬ ‫گروه تقسیم می شود‬ ‫‪ -‬واکنش لخته ای مستقیم یا ‪( Direct Agglutination‬زمانی که آنتی ژن ذره ای است)‬ ‫‪ -‬واکنش لخته ای غیر فعال یا ‪( Passive Agglutination‬زمانی که آنتی ژن محلول به‬ ‫وسیله التکس یا گلبول قرمز به ذره نامحلول تبدیل می شود)‬ ‫‪ -‬واکنش لخته ای غیر مستقیم یا ‪( Indirect Agglutination‬زمانی که فقط یکی از ظرفیت‬ ‫های آنتی بادی اشغال شده و مشاهده مستقیم آن امکان پذیر نمیباشد‪ ،‬آن را با آنتی‪-‬آنتی‬ ‫بادی ردیابی می کنند)‪.‬‬  ‫واکنش های اصلی بین آنتی ژن و آنتی بادی‬ ‫است‪.‬‬ ‫‪-3‬اگر آنتی ژن کلوئیدی باشد‪ ،‬واکنش از نوع کلوئیدی یا ‪flocculation‬‬ ‫تعیین گروه های خونی‬ ‫‪12‬‬  ‫تعیین گروه های خونی‬ ‫‪A‬‬ ‫‪B‬‬ ‫فنوتیپ ها‬ ‫‪AB‬‬ ‫‪O‬‬ ‫‪13‬‬ ‫تعیین گروه های خونی‬ ‫‪AA‬‬ ‫‪BO‬‬ ‫‪AO‬‬ ‫ژنوتیپ ها‬ ‫‪BB‬‬ ‫‪AB‬‬ ‫‪OO‬‬ ‫‪14‬‬ ‫هر گروه خونی‪،‬آنتی بادی ضد گروه خونی دیگر را در بدن دارد‬ ‫مثال ‪:‬‬ ‫فرد دارای گروه خونی ‪،A‬سرم حاوی آنتی بادی‬ ‫ ‬ ‫ضد گروه خونی ‪ B‬دارد‪.‬‬ ‫گروه خونی ‪،B‬سرم حاوی آنتی بادی ضد گروه‬ ‫ ‬ ‫خونی ‪ A‬دارد‪.‬‬ ‫گروه خونی ‪ AB‬بدون آنتی بادی ضد ‪ A‬و ‪B‬‬ ‫ ‬ ‫گروه خونی ‪ O‬هر دوآنتی بادی ضد ‪ A‬و ‪ B‬را‬ ‫ ‬ ‫دارد‪.‬‬ ‫اهمیت‪:‬در بررسی سازگاری انتقال خون‬ ‫‪15‬‬ ‫آنتی ژن های گروه خونی از جنس گلیکولیپید یا گلیکو پروتئین هستند‬ ‫از یک هسته ی مرکزی(ماده ی ‪)H‬‬ ‫تشکیل شده اند که این هسته ی مرکزی‬ ‫شامل دوتا قند است‪:‬‬ ‫قند بتا گاالکتوزیل‪-N -‬استیل گلوکوزآمین‬ ‫و قند ‪-L‬فوکوز‬ ‫اگر گروه خونی ‪ A‬باشد به قند انتهایی ‪-L‬‬ ‫فوکوز قندی متصل می شود به نام دی‬ ‫آلفا ‪-N-‬استیل گاالکتوزآمین‬ ‫اگر ‪ B‬باشد>> دی آلفا گاالکتوز‬ ‫اگر‪ AB‬باشد>>هردو قند‬ ‫‪16‬‬ 17  ‫‪Rh‬‬ ‫آنتی ژن ‪ Rh‬در واقع شاخص قندی برروی گلبول قرمز بوده که تحت کنترل ‪ 3‬ژن ‪ A‬و ‪ D‬و ‪ E‬میباشد که نوع‬ ‫‪ D‬آنتی ژنیسیته بیشتر دارد و معموال با ‪ D‬بررسی میشود‬ ‫گروه خونی ‪ Rh‬دارای ژنوتیپ ‪ DD‬یا ‪ Dd‬میباشد‪ Rh.‬منفی ژنوتیپ ‪ dd‬دارد‬ ‫برای آزمایش آن از آنتی کور ضد ‪ D‬استفاده می شود و اگر آگلوتیناسیون مشاهده شد ‪ Rh‬مثبت است و‬ ‫در غیر اینصورت منفی‬ ‫اهمیت‪:‬در یرقان همولیتیک نوزاد‬ ‫اختالل عدم تطابق ‪ Rh‬مادر و جنین می تواند مشکل ساز شود‪.‬‬ ‫معموال افرادی که با این موضوع دچار مشکل می شوند‪،‬در بارداری اول در حد یرقان همولیتیک باقی‬ ‫می ماند و در بارداری های بعدی چون میزان ‪ IgG‬تولیدی بشدت افزایش پیدا می کند سبب سقط جنین‬ ‫می شود‪.‬‬ ‫درمان‪:‬آمپول روگام(یک آنتی ژن ‪)D‬‬ ‫‪18‬‬ ‫آنتی بادی بر علیه شاخص های ‪ A‬و ‪ B‬از کالس ‪ IgM‬هست‪:‬‬ ‫ واکنش سریع‬ ‫ از جفت عبور نمیکند‬ ‫آنتی بادی بر علیه شاخص های ‪ Rh‬از کالس ‪ IgG‬هست‪:‬‬ ‫ واکنش کند‬ ‫ از جفت عبور میکند‬ ‫‪19‬‬ 20  ‫روش های آزمایش‪:‬‬ ‫‪.1‬روش ‪Cell type‬‬ ‫به دو روش المی و لوله ای انجام پذیر است‬ ‫‪.2‬روش ‪Back type‬‬ ‫معموال به صورت لوله ای‬ ‫‪21‬‬  ‫‪ Cell type‬المی ‪:‬‬ ‫سه قطره خون را روی الم می ریزیم‪،‬از آنتی بادی های تجاری آماده‪،‬روی هر قطره‬ ‫خون یکی از این آنتی بادی ها را اضافه می کنیم‬ ‫آنتی ‪ (A‬معموال به رنگ آبی)‪+‬سرم>>اگر واکنش داد>>گروه خونی‪A‬‬ ‫آنتی ‪ + B‬سرم>>اگر واکنش داد>>گروه خونی‪B‬‬ ‫آنتی ‪ + D‬سرم>>اگر واکنش داد>>گروه خونی‪ Rh‬مثبت‬ ‫اگر هیچکدام واکنش نداد گروه خونی ‪ O‬هست و اگر هم ‪ A‬و هم ‪ B‬واکنش داد گروه‬ ‫خونی ‪ AB‬هست‪.‬‬ ‫مثال‬ ‫‪22‬‬  ‫‪ Cell type‬لوله ای‪:‬‬ ‫بسیار شبیه روش قبلی با این تفاوت که به جای یک قطره خون مستقیم‪،‬از سوسپانسیون ‪3‬تا‪ 5‬درصدی خون استفاده‬ ‫می کنیم(خون‪+‬سرم فیزیولوژی)‬ ‫پس از تهیه ی سوسپانسیون یک قطره از همان آنتی بادی های تجاری استفاده می کنیم‪ ،‬با سانتریفیوژ مختصر برای‬ ‫برخورد آنتی ژن و آنتی بادی آگلوتیناسیون یا لخته را در لوله مشاهده می کنیم‪.‬‬ ‫نتیجه گیری مانند روش قبل‬ ‫‪23‬‬  ‫تکلیف‪:‬‬ ‫‪ -‬چرا در روش لوله ای ‪ cell type‬نتیجه با دقت بیشتر بدست می آوریم؟‬ ‫‪24‬‬  ‫‪:Back type‬‬ ‫مکانیسم عکس روش اول‬ ‫دو لوله ی ‪ A‬و‪ B‬تهیه می کنیم‬ ‫در لوله ی ‪ A‬دو قطره از سرم حاوی آنتی بادی می ریزیم و یک قطره از سوسپانسیونی به نام‬ ‫‪( Cell A‬سوسپانسیون ‪ 4‬تا ‪ 6‬درصدی گلبول گروه خونی ‪.A‬حاوی آنتی کور ضد ‪.)B‬‬ ‫اگر در این لوله آگلوتیناسیون را مشاهده کردیم یعنی گروه خونی ‪ B‬بوده است‪.‬‬ ‫به همین ترتیب برای لوله ی ‪B‬‬ ‫اگر هیچ لوله ای واکنش نداد ‪ AB‬و اگر هردو واکنش داد ‪ O‬می باشد‪.‬‬ ‫تکلیف ‪:‬‬ ‫در روش های ‪ cell type‬و ‪ back type‬جایگاه آنتی ژن و آنتی بادی (در سرم و کیت تجاری) را مقایسه کنید‬ ‫‪25‬‬ ‫‪CRP latex‬‬ ‫تشخیص پروتئین ‪CRP‬‬ ‫‪CRP= C-Reactive Protein‬‬ ‫این تست برای تشخیص پروتئین ‪ CRP‬که یکی از پروتئین های‬ ‫فازحاد انواع بیماری های عفونی و غیر عفونی می باشد‪،‬به کار می‬ ‫رود‪.‬‬ ‫به طور کلی پروتئین های واکنش دهنده ی فاز حاد بیماری‬ ‫را )‪ APR (Acute-Phase Reactants‬می نامند‪.‬‬ ‫بافتی‪،‬نکروز‬ ‫صدمات‬ ‫طی‬ ‫در‬ ‫پروتئینها‬ ‫*این‬ ‫ها‪،‬التهاب‪،‬سکته‪،‬عفونت‪،‬سرطان و انواع دیگر بیماری ها ایجاد می‬ ‫شوند یا مقدارشان افزایش می یابد‬ ‫*این پروتئین ها تحت تاثیر ترشحات سیستم ایمنی به ویژه لنفوسیت‬ ‫‪ T‬هستند که خود تحت مکانیسم های دیگری تولید می شود(غده ی‬ ‫هیپوفیز‪،‬مغز استخوان‪)...،‬‬  ‫‪CRP‬‬ ‫*محل تولید پروتئین های فاز حاد‪،‬سلول های کبدی و ماکروفاژهها هستند‪.‬‬ ‫*جنسشان از گلیکوپروتئین می باشد‪.‬‬ ‫*در بین این مجموعه‪ CRP،‬ها برای بررسی بیشتر مورد استفاده قرار می‬ ‫گیرند و یکی از قابل اعتمادترین وسیله ها برای تشخیص وضعیت یک‬ ‫بیمار هستند زیرا به محض وجود یک بیماری در بدن‪،‬مقدارشان افزایش‬ ‫می یابد و به محض بهبودی سریعا از بین می روند‬ ‫(اما نوع عفونت را مشخص نمی کنند)‬  ‫‪CRP‬‬ ‫*نقش مهمی در عفونت های پنوموکوکی دارد‪.‬‬ ‫*کمپلکان ها را فعال می کند(از مسیر کالسیک)‬ ‫*به عنوان اپسونین عمل می کند(سبب تسهیل فاگوسیتوز)‬ ‫*فقط در انسان و میمون وجود دارد‪.‬‬ ‫*از جفت رد نمی شود‪.‬‬ ‫*نسبت به حرارت حساس است(در ‪ 70‬درجه در مدت نیم ساعت از بین می رود)‬ ‫*به طور کلی به مقدار ناچیز در بدن وجود دارد(بجز در التهاب ها و عفونت ها‬  ‫روش انجام تست ‪CRP‬‬ ‫در آزمایش های سرولوژی‪،‬با استفاده از سرم (حاوی آنتی ژن یا آنتی بادی) به دنبال واکنش ‪ Ag-AB‬هستیم‬ ‫در این مورد نیز ما به دنبال آنتی ژن ‪ CRP‬هستیم‪.‬در نتیجه ماهیت کیت آنتی بادی(آنتی ‪ CRP‬نامیده می شود) است و متصل به ذرات التکس‬ ‫می باشد‪.‬‬ ‫در داخل کیت تجاری‪ ،‬یک کنترل مثبت (در کنترل مثبت ما پروتئینی را داریم که قطعا با آنتی ‪ CRP‬واکنش می دهد) و یک کنترل منفی(که قطعا‬ ‫واکنش نمی دهد‪.‬ممکن است فقط یک بافر باشد) و یک آنتی ‪ CRP‬متصل به ذرات التکس داریم‪.‬ذرات التکس سفیدرنگ می باشند و برای اینکه‬ ‫واکنش آگلوتیناسیون را مشاهده کنیم‪،‬در داخل کیت یک سری الم زمینه سیاه وجود دارد که از آنها برای بهتر مشاهده کردن واکنش لخته شدن‬ ‫استفاده می کنیم‪.‬‬ ‫روش انجام تست ‪CRP‬‬ ‫‪ -‬الم زمینه سیاه سه خانه ای – کیت تجاری – سرم حرارت دیده بیمار‬ ‫در خانه ی سمت چپ یک قطره کنترل منفی می ریزیم‪.‬یک قطره کنترل‬ ‫مثبت‪،‬در وسط و یک قطره سرمی که نمی دانیم ‪ CRP‬دارد یا ندارد در‬ ‫سمت راست الم قرار میدهیم‪.‬حال به هر سه خانه آنتی ‪ CRP‬اضافه می‬ ‫کنیم و با اپلیکاتورهای مختلف آن ها را مخلوط می کنیم و واکنش را‬ ‫گزارش می دهیم‪.‬‬ ‫نسبت به کنترل مثبت می توانیم تعیین کنیم که چه مقدار آگلوتیناسیون‬ ‫مشاهده کردیم‪.‬‬ ‫اگر در سرم بیمار مقدار مشابهی نسبت به کنترل مثبت آگلوتیناسیون‬ ‫داشتیم‪،‬سرم ما حاوی آنتی ژن ‪ CRP‬هست و مثبت گزارش می شود‪.‬‬  ‫روش انجام تست ‪CRP‬‬ ‫پس از هر آزمایشی‪،‬تفسیر آزمایش بسیار مهم است‪.‬‬ ‫به عنوان مثال از کسی که سرم را از او تهیه کرده ایم باید گزارش کاملی (سن‪ ،‬جنس‪ ،‬شغل‪ ).....،‬داشته باشیم‪.‬اهمیت این موضوع‬ ‫هنگامی آشکار می شود که مثال در فرد خاص بنا به شرایط ‪ CRP،‬باالست اما نشانه ی بیمار بودن نیست‪.‬‬ ‫گاهی نیز ممکن است نتیجه ی مثبت کیت ما‪،‬مثبت کاذب باشد( به دلیل واکنش آنتی بادی ما با آنتی ژن های مشابه)‬ ‫سرم ما نیز اگر حرارت(در ‪ 56‬درجه) دیده نباشد‪،‬ممکن است مثبت کاذب ایجاد کند‪.‬‬ ‫دمای ‪ 56‬درجه برای از بین بردن کمپلمان ها پیشنهاد می شود‪.‬بنابر این اگر کمپلمان فعال باشد می تواند واکنش بدهد و مثبت کاذب‬ ‫ایجاد کند‪.‬‬ Rheumatoid Arthritis RA latex  ‫‪Rheumatoid Arthritis‬‬ ‫ بیماری مزمن خودایمنی است که در این بیماری شخص بر علیه قسمت ‪ Fc‬آنتی بادی ‪ IgG‬خود آنتی‬ ‫بادی می سازد که این آنتی بادی از کالس ‪ IgG،IgA‬و ‪ IgM‬می باشد‪.‬‬ ‫بسته به اینکه مقدار یا تیتر کدام آنتی بادی در سرم بیشتر است‪،‬نشان دهنده ی پیشرفت بیماری می باشد‪.‬‬ ‫اگر تیتر ‪ IgG‬باال باشد به معنی پیشرفت بیماری است‪،‬اگر ‪ IgA‬بیشتر باشد نشان دهنده ی ضایعات‬ ‫مفصلی است‪.‬‬ ‫در این بیماری کمپلکس آنتی ژن‪-‬آنتی بادی (آنتی بادی ای که علیه آنتی بادی‬ ‫خودی تشرح شده است) در مفاصل رسوب پیدا می کند و سپس کمپلمان ها‬ ‫را فعال می کند‪(.‬وظیفه ی کمپلمان لیز سلولی است)>>بیماری خودایمنی‬ ‫بسیار دردناک روماتیسم مفصلی‬  ‫عوامل موثر در ایجاد اتو آنتی بادی ‪:‬‬ ‫*نوع سلول های گیرنده ی موجود در سطح این آنتی بادی ها‬ ‫*مسائل وراثتی‬ ‫*مسائل روانی مانند افسردگی(که سبب تضعیف سیستم ایمنی می شوند)‬ ‫*هورمون ها(هورمون های زنانه شانس ابتال را در خانم ها ‪ 3‬برابر بیشتر می کند)‬ ‫*ویروس ها‬ ‫*آلرژن ها‬ ‫*تغذیه ی نامناسب‬ ‫*گلیکوزیالسیون ناقص ‪( IgG‬ژنتیکی یا بر اثر یک جهش)‬  ‫روش تشخیص‪:‬‬ ‫برای تشخیص فاکتور روماتوئید(‪ )RF‬معموال تست های مختلفی وجود دارد‪:‬‬ ‫*غیر مستقیم‪:‬‬ ‫اندازه گیری سرعت رسوب گلبول قرمز‬ ‫اندازه گیری کمی اجزای مختلف کمپلمان‬ ‫تست های التهابی(‪)CRP‬‬ ‫*مستقیم و اختصاصی‪:‬‬ ‫‪( RA Latex‬حساسیت باال)‬ ‫‪( Rose Waaler‬دقت باال)‬  ‫روش تشخیص‪:‬‬ ‫تست ‪ RA Latex‬تست حساسی است به همین دلیل می تواند مثبت کاذب ایجاد کند پس تست دقیقی محسوب نمی شود‪.‬‬ ‫در حدود ‪ 1‬تا ‪ 4‬درصد افرادی که بیمار نیستند با این تست ممکن است نتیجه شان مثبت شود‪.‬‬ ‫اما تست ‪ Rose Waaler‬یک تست اختصاصی است که بجای ذرات التکس از گلبول قرمز در این تست استفاده می‬ ‫شود‪.‬‬ ‫در این تست فقط ‪ 0.01‬درصد از افراد غیربیمار‪،‬نتیجه شان مثبت گزارش می شوند‪.‬‬ ‫این تست هم به صورت المی و هم به صورت لوله ای انجام می شود‪.‬‬  ‫تست المی ‪ RA‬التکس ‪:‬‬ ‫‪ RF‬یا ‪ RA‬آنتی ژنی است که متصل به ذرات التکس است وآنتی بادی موجود‬ ‫درسرم خون فرد بیمار بر ضد این آنتی ژن واکنش خواهد دلد‪.‬‬ ‫الم زمینه سیاه سه خانه ای>>‬ ‫مرکز‪:‬سرم بیمار‬ ‫سمت راست‪:‬کنترل مثبت حاوی آنتی آنتی بادی‬ ‫سمت چپ‪:‬کنترل منفی‬ ‫‪+‬افزودن آنتی ژن ‪ RF Latex‬تجاری شیری رنگ به هر سه خانه‬ ‫‪+‬حرکت دادن اپلیکاتور‬ ‫‪+‬مشاهده ی واکنش و مقایسه با کنترل مثبت‬ ‫‪+‬نتیجه گیری مانند تست های قبل‬ ‫‪+‬داشتن گزارش بالینی از شرح حال بیمار‪،‬برای تفسیر دقیق تر‬  ‫تفسیر نتیجه آزمایش‪:‬‬ ‫مثبت کاذب‪:‬‬ ‫*بعضی از بیماری های التهابی مثل بیماری های مزمن عفونی‪،‬بیماری های کبدی‪،‬هپاتیت مزمن و بیماری‬ ‫منونوکلئوزعفونی و حتی برخی از سرطان ها میتولنند مثبت کاذب ایجاد کنند‬ ‫*باال بودن غیرطبیعی چربی خون‬ ‫*سرم حرارت ندیده(به دلیل وجود اجزای فعال کمپلمان)‬ ‫و‪...‬‬  ‫تست المی رز والر‬ ‫روش انجام آزمایش‪:‬‬ ‫تکلیف ‪:‬‬ ‫توضیح دهید واکنش آنتی ژن – انتی بادی در این تست از چه نوعی است و چرا در این تست از الم زمینه سفید استفاده شد؟‬ ‫‪Wright test‬‬ ‫(تشخیص بروسلوزیس)‬  ‫بروسلوز‬ ‫بروسلوز(تب مالت ‪.‬تب مواج) به عنوان یکی از مهمترین بیماری های مشترک انسان و دام محسوب می شود‪.‬این بیماری همواره از دو‬ ‫بعد اقتصادی و بهداشتی مورد توجه قرار گرفته است‪.‬دام های مبتال به بروسلوز‪ ،‬معموال در اولین دوره آبستنی سقط جنین نموده و در‬ ‫هنگام سقط و تا مدتی پس از آن‪ ،‬با دفع ترشحات به شدت آلوده رحمی ‪ ،‬باعث آلودگی محیط ‪ ،‬مزارع و مراتع می شوند که این موضوع‬ ‫خود زمینه آلودگی را برای سایر حیوانات گله و نیز انسان فراهم می سازد‪.‬دفع دوره ای باکتری عامل بیماری (گونه های باکتری بروسال)‬ ‫از طریق شیر حیوانات و هم چنین از طریق ترشحات رحمی در دام های فاقد عالئم بالینی مخاطرات فراوانی را برای سایر دام ها و نیز‬ ‫انسان در بردارد‪.‬‬ ‫انواع بروسال در حیوانات (مخزن) شامل سویههایی زیر است‪:‬‬ ‫‪.1‬بروسلوز ملیتنسیس ‪( B. melitensis‬بز)‬ ‫‪.2‬بروسلوز آبورتوس ‪( B. abortus‬گاو)‬ ‫‪.3‬بروسلوز سویس ‪(B. suis‬خوک)‬ ‫‪.4‬بروسلوز کانیس ‪( B. canis‬سگ)‬ ‫‪.5‬بروسلوز نئوتوم‪( B. Neotomae‬اسب)‬ ‫‪.6‬بروسلوز اویس ‪( B. ovis‬گوسفند)‬ ‫و شایعترین آن در سراسر جهان ملیتنسیس میباشد‪.‬‬  ‫بروسلوز‬ ‫عالئم‪:‬‬ ‫دوره نهفتگیبیماری (از زمان تماس با منبع عفونت تا بروز عالیم) اغلب بین ‪ ۱‬تا ‪ ۳‬هفتهاست‪ ،‬ولی گاهی تا ‪ ۶‬ماه طول می کشد‪.‬‬ ‫براساس شدت بیماری‪ ،‬عالیم به سه شکل حاد‪ ،‬تحت حاد و مزمن بروز میکند‪:‬‬ ‫شکل حاد‪ :‬بیمار دچار لرز ناگهانی‪ ،‬درد عمومی بدن به خصوصدرد پشت و تعریق شدید میشود‪ ،‬اشتهای خود را از دست میدهد و‬ ‫دچارضعف و سستی میگردد‪.‬ضمنا ازشروع عالیم بیش از ‪ ۳‬ماه نمیگذرد‪.‬‬ ‫شکل تحت حاد‪ :‬آغاز آن بیسروصدا میباشد و شکایت اصلیبیمار از ضعف و خستگی می باشد‪.‬از آغاز بیماری نیز ‪ ۳‬تا ‪ ۱۲‬ماه‬ ‫میگذرد‪.‬‬ ‫شکل مزمن‪ :‬اگر از زمان تشخیص بیماری بیش از یک سال بگذرد و فرد هنوز مبتال باشد‪ ،‬به آن حالت مزمنگفته میشود‪.‬عالئم می‬ ‫تواند شامل خستگی‪ ،‬تب های عود کننده‪ ،‬آرتریت‪ ،‬تورم قلب (اندوکاردیت) و اسپوندیلیت (نوعی آرتریت التهابی) باشد‪.‬‬ ‫افرادی که دچار تب‪ ،‬بیاشتهایی‪ ،‬درد عضالنی و تعریق شبانه بوده وسابقه تماس با دامهای آلوده یا مشکوک به تب مالت را‬ ‫عنوان مینمایند یا از فرآوردههای لبنی آلوده استفاده نمودهاند‪ ،‬الزم است برای انجام آزمایش به آزمایشگاه مراجعه نمایند‪.‬‬ ‫شیوه ی انتقال‪:‬‬ ‫محصوالت لبنی خام‪ :‬باکتری بروسال می تواند در شیر حیوانات آلوده‪ ،‬بستنی‪ ،‬کره و پنیر های غیر پاستوریزه وجود داشته باشد و در صورت‬ ‫مصرف این محصوالت به انسان منتقل شود‪.‬همچنین این باکتری می تواند از طریق گوشت خام آلوده نیز انتقال یابد‪.‬‬ ‫استنشاق باکتری‪ :‬باکتری بروسال به راحتی در هوا پخش شده و در صورت استنشاق هوای آلوده به این باکتری‪ ،‬می تواند به انسان انتقال‬ ‫یابد‪.‬‬ ‫تماس مستقیم‪ :‬تماس مستقیم با خون‪ ،‬اسپرم یا جنین حیوان آلوده احتمال ابتال به بیماری‪ ،‬بخصوص در افرادی که بیش از حد با حیوانات در‬ ‫ارتباط هستند‪ ،‬را باال می برد‪.‬همچنین در صورت وجود زخم های باز روی پوست احتمال انتقال‪ ،‬چندین برابر می شود‪.‬‬ ‫بروسلوز به طور معمول از فرد به فرد گسترش نمی یابد‪ ،‬اما در برخی موارد زنان در حین زایمان یا از طریق شیر دادن به نوزاد‪ ،‬عفونت‬ ‫را به فرزندان خود منتقل می کنند‪.‬این عفونت بسیار به ندرت از طریق فعالیت جنسی یا انتقال خون آلوده پخش می شود‪.‬‬  ‫بروسلوز‬ ‫چه افرادی در معرض آلودگی با تب مالت هستند؟‬ ‫دامپزشکان‪ ،‬دامداران‪ ،‬مزرعه داران‪ ،‬کارگران کشتارگاه‪ ،‬شکارچیان و میکروب شناسان بیشتر در معرض آلودگی به این باکتری می باشند‪.‬‬ ‫هرچند که مردم عادی نیز از طریق مصرف محصوالت آلوده احتمال ابتالی خود به این بیماری را افزایش می دهند‪.‬‬ ‫شیوع بیماری در نقاط مختلف جهان‪:‬‬ ‫این بیماری در آسیا‪ ،‬خاورمیانه‪ ،‬حوزه ی دریای مدیترانه‪ ،‬اروپای شرقی‪ ،‬آمریکا التین و آفریقا شیوع بیشتری نسبت به سایر مکان ها دارد‪.‬‬ ‫عوارض‪:‬‬ ‫بروسلوز تقریبا می تواند بر سیستم تولید مثل‪ ،‬کبد‪ ،‬قلب و سیستم عصبی مرکزی تاثیر بگذارد‪.‬بروسلوز مزمن ممکن است فقط در یک عضو یا‬ ‫در سراسر بدن شما عوارض ایجاد کند‪.‬عوارض احتمالی عبارتند از‪:‬‬ ‫اندوکاردیت‪ :‬این وضعیت یکی از جدی ترین عوارض بروسلوز است‪.‬اندوکاردیت درمان نشده می تواند دریچه های قلب را از بین ببرد و در‬ ‫واقع علت اصلی مرگ و میر ناشی از بروسلوز است‪.‬‬ ‫آرتروز‪ :‬عفونت مفاصل می تواند باعث درد‪ ،‬سفتی و التهاب مفاصل بخصوص در زانوها‪ ،‬لگن‪ ،‬مچ پا‪ ،‬دست و همچنین ستون فقرات شود‪.‬‬ ‫التهاب و عفونت بیضه ها‪ :‬اپیدیدیم (لوله هایی مارپیچی هستند که محل بلوغ و ذخیره اسپرم ها هستند) در طی آلودگی با باکتری بروسال آلوده‬ ‫می شود و باکتری از طریق همین لوله ها به بیضه ها گسترش یافته و می تواند باعث تورم و درد شدید شود‪.‬‬ ‫التهاب طحال و کبد‪ :‬التهاب و بزرگی طحال و کبد (هپاتواسپلنومگالی)‪ ،‬می تواند از عوارض دیگر آلودگی با این باکتری باشد‪.‬‬ ‫عفونت سیستم اعصاب مرکزی‪ :‬این عفونت می تواند باعث بیماری های تهدیدکننده حیات مانند التهاب مغز و بافت های محافظت کننده از مغز‬ ‫شود‪.‬‬  ‫بروسلوز‬ ‫پیشگیری‪:‬‬ ‫برای پیشگیری از ابتال به بیماری تب مالت بهتر است موارد زیر رعایت شود‪:‬‬ ‫اجتناب از مصرف غذاهای لبنی غیر پاستوریزه‬ ‫اجتناب از مصرف گوشت خام آلوده‬ ‫پوشیدن دستکش هنگام تماس با حیوانات یا باکتری بروسال‪ :‬اگر شما یک دامپزشک‪ ،‬کشاورز‪ ،‬شکارچی‪ ،‬کارمند کشتارگاه یا پرسنل بخش‬ ‫میکروب شناسی آزمایشگاه هستید هنگام حمل حیوانات بیمار‪ ،‬مرده‪ ،‬بافت حیوانی‪ ،‬کمک به حیواناتی که به دنیا آمده اند یا کار بر روی‬ ‫باکتری بروسال حتما از دستکش های پالستیکی (التکس) استفاده نمائید‪.‬‬ ‫بهترین راه تشخیص بیماری‪،‬جدا کردن میکروب از میزبان می باشد‪.‬بخصوص مواردی که شخص دچار تب باال است‪.‬در این موارد از خون‬ ‫یا مایع مغزی نخاعی یا مایع مفصلی‪،‬نمونه می گیرند و کشت می دهند‪.‬اگر در کشت باکتری دیده شود‪،‬مشخصا فرد بیمار می باشد‪.‬ولی در‬ ‫بسیاری از مواقع حتی با کشت هم تشخیص بیماری امکان پذیر نیست‪.‬بنا براین تست های سرولوژیک برای تشخیص مورد استفاده قرار می‬ ‫گیرند‪.‬‬ ‫روش های تشخیص آزمایشگاهی‪:‬‬ ‫تست های سرولوژی‪:‬‬ ‫ تست ‪Rose Bengal‬‬ ‫ تست ‪Wright‬‬ ‫ تست ‪2ME Wright‬‬ ‫ تست ‪Coombs Wright‬‬ ‫ فیکساسیون کمپلمان‬ ‫تست مولکولی‪:‬‬ ‫ تست ‪PCR‬‬  ‫تست رزبنگال‬ ‫ تست سریع المی‬ ‫ کیت محتوی آنتی ژن تجاری رزبنگال (به رنگ صورتی ست)‬ ‫ آنتی ژن های تجاری باید در دمای یخچال(‪ 4‬درجه) نگهداری شوند‪.‬حدودا ‪ 20‬تا ‪ 30‬دقیقه قبل از آزمایش‬ ‫به دمای محیط انتقال داده شوند‪.‬نباید اتوآگلوتینه یا یخ زده یا در معرض نور باشند‪.‬‬ ‫روش انجام آزمایش‪:‬‬ ‫بر روی یک الم یک قطره سرم بیمار و یک قطره از آنتی ژن رزبنگال(بدون رقیق سازی) می ریزیم و با اپلیکاتور‬ ‫آن را پخش کرده و روی شیکر مقداری حرکت می دهیم و آگلوتیناسیون را بررسی می کنیم‪.‬اگر آگلوتیناسیون‬ ‫مشاهده شود‪،‬نتیجه مثبت است‪.‬‬ ‫ممکن است مثبت کاذب باشد پس مثبت بودن دلیل قطعی بر بیمار بودن نیست‪.‬‬ ‫حتما باید تست های تکمیلی(مثل رایت لوله ای) انجام شود‪.‬‬ ‫نکته‪:‬‬ ‫در زمان ابتال به این بیماری‪ 3،‬فاز ابتال وجود دارد‪:‬‬ ‫فاز حاد(زمانی که میزان ‪ IgM‬بشدت باالتر از ‪ IgG‬است)‬ ‫فاز تحت حاد(میزان ‪ IgG‬به مراتب بیشتر است)‬ ‫فاز مزمن(دیگر ‪ IgM‬ای وجود ندارد)‬ ‫معموال تست مثبت رزبنگال = شرایط حاد بیماری‬  ‫*تست رایت لوله ای‪:‬‬ ‫از نمونه سرم خون مورد آزمایش سری رقت تهیه می کنیم ( توسط سرم فیزیولوژی ) و سپس آنتی ژن تجاری مربوطه را‬ ‫اضافه می کنیم‪.‬در ‪ 37‬درجه‪ 24،‬تا ‪ 48‬ساعت انکوبه می کنیم و بعد از آن واکنش آگلوتیناسیون را گزارش می کنیم‪.‬‬ ‫برای تعیین تیتر یا عیار سرم (باالترین رقت سرمی که با آنتیژن واکنش قابل مشاهده ایجاد کند) ‪ ،‬مواردی مثل سابقه ی فرد‬ ‫‪1‬‬ ‫را باید در نظر گرفت‪.‬در افرادی که با دام سر و کار دارند واکنش در رقت های پایین تر ( ) مثبت گزارش میشود ولی‬ ‫‪320‬‬ ‫‪1‬‬ ‫به بعد مثبت گزارش میشود‪.‬‬ ‫در افراد معمولی واکنش در سری رقت‬ ‫‪80‬‬  ‫*تست لوله ای ‪:2ME wright‬‬ ‫‪2‬مرکاپتو اتانول احیاکننده ای است که پیوندهای دی سولفیدی را تجزیه می کند‪.‬برای آنتی بادی اگر غلظت زیادی از آن استفاده شود‪،‬همه ی‬ ‫آنتی بادی ها را تجزیه می کند اما در کیت های آزمایشگاهی‪IgM ،‬ها را فقط از بین می برد زیرا پنتامر هستند‪.‬‬ ‫دلیل استفاده از این تست‪،‬تشخیص فاز حاد از مزمن است‪.‬‬ ‫اگر این تست و تست رایت لوله ای هردو مثبت شد‪،‬پس بیماری در فاز حاد نبوده است‪.‬ولی اگر این تست منفی شد به دلیل از بین رفتن ‪IgM‬‬ ‫ها‪،‬بنابراین بیماری در فاز حاد است‪.‬‬ ‫فاز حاد(زمانی که میزان ‪ IgM‬بشدت باالتر از ‪ IgG‬است)‬ ‫فاز تحت حاد(میزان ‪ IgG‬به مراتب بیشتر است)‬ ‫فاز مزمن(دیگر ‪ IgM‬ای وجود ندارد)‬ ‫در این تست برای رقیق سازی از بافر خود ‪ 2me‬استفاده می شود‪.‬‬ ‫به همان ترتیب تست لوله ای(و معموال همزمان با آن) انجام می شود‪.‬‬  ‫*تست لوله ای ‪:Coombs wright‬‬ ‫گاهی اوقات در تب مالت آنتی بادی هایی تولید می شوند در بدن فرد که آنتی بادی های بلوکه کننده یا مسدودکننده نام‬ ‫دارند‪.‬این آنتی بادی ها مانع از واکنش آنتی ژن و آنتی بادی می شوند و معموال از زیرکالس های ‪ IgG 3‬و‪IgG 4‬‬ ‫و ‪ IgA‬هستند‪.‬این افراد معموال دارای عالیم بالینی هستند ولی با تست های معمول بیماری قابل تشخیص نیست‪.‬‬ ‫برای تشخیص این آنتی بادی ها از آنتی آنتی بادی استفاده می کنند(آنتی گاماگلوبولین انسانی) که به این آنتی بادی ها‬ ‫متصل می شود و اگر کمپلکس تشکیل شود به معنی حضوراین آنتی بادی ها میباشد‪.‬‬ ‫این تست برای تشخیص مراحل مزمن استفاده میشود چون این نوع از آنتی بادی ها در مراحل مزمن و در عود‬ ‫بیماری حضور دارند‪.‬‬ ‫روش انجام تست همانند تست لوله ای با تهیه سری رقت سرمی و در حضور کنترل مثبت و انکوباسیون در ‪37‬‬ ‫درجه انجام میشود‪.‬‬ ‫‪1‬‬ ‫به بعد مثبت گزارش میشود‬ ‫برای این تست در افراد معمولی واکنش در سری رقت‬ ‫‪40‬‬  RPR ‫تست‬ Rapid Plasma Reagin guard  ‫تست ‪RPR‬‬ ‫برای تشخیص بیماری سفیلیس استفاده می شود‪.‬‬ ‫سفیلیس نوعی بیماری مقاربتی می باشد که بر اثر نوعی باکتری به نام تریپونما پالیدوم (‪ )Treponema pallidum‬ایجاد می شود‪.‬‬ ‫این باکتری در آب و هوا و خاک وجود ندارد و در بدن انسان بیمار زندگی می کند و‬ ‫بطور مصنوعی برای آن محیط کشت درست می کنند(در بدن حیوان آزمایشگاهی(‬ ‫باکتری را در بیضه ی خرگوش تلقیح می کنند و باعث تکثیر آن می شوند‪.‬‬ ‫این باکتری نسبت به حرارت‪،‬خشکی و صابون حساس می باشد و از بین می رود‪.‬‬ ‫این بیماری در ‪ ۹۰‬درصد موارد از طریق مقاربت و در ‪ ۱۰‬درصد از سایر طرق منتقل‬ ‫می شود(مانند انتقال از مادر به جنین بعد از ‪ ۴‬ماهگی_از طریق زخم)‬ ‫بهترین راه تشخیص بیماری‪،‬جداسازی میکروب از میزبان است‪.‬‬ ‫عالئم بالینی بیمار نشان دهنده ی بیماری می باشد‪.‬‬  ‫سفیلیس ( ‪ )Syphilis‬چیست‬ ‫اولین نشانهی سفیلیس یک زخم کوچک بدون درد است‪.‬این زخم ممکن است روی اندام جنسی‪ ،‬مقعد یا داخل دهان ایجاد‬ ‫شود‪.‬این زخم شانکر‪ Chancre‬نامیده میشود و بیشتر افراد متوجه آن نمیشوند‪.‬تشخیص سفیلیس میتواند سخت باشد‪.‬‬ ‫افراد میتوانند سالها بدون بروز هیچ عالئمی حامل این بیماری باشند‪.‬هر چه زودتر این بیماری تشخیص داده شود‬ ‫بهتر است‪.‬اگر این بیماری مدت زیادی در بدن بماند و درمان نشود میتواند منجر به آسیب اساسی به اندامهایی مانند‬ ‫قلب و مغز شود‪.‬‬ ‫سفیلیس فقط از راه تماس مستقیم با شانکر منتقل میشود‪.‬این بیماری از طریق استفاده از توالت مشترک‪ ،‬پوشیدن لباس‬ ‫افراد بیمار یا غذا خوردن در ظرف مشترک منتقل نمیشود‬  ‫مراحل بیماری سفیلیس‬ ‫ اولیه‬ ‫ ثانویه‬ ‫ نهفتگی‬ ‫ مرحلهی سوم‪.‬‬ ‫این بیماری در دو مرحلهی اول بیشترین میزان انتقال و واگیر را دارد‪.‬در مرحلهی نهفته بیماری فعال است‪ ،‬اما‬ ‫نشانهای ندارد‪.‬مرحلهی سوم بیشترین خطر را برای سالمت فرد دارد‪.‬‬  ‫‪.۱‬سفیلیس اولیه‬ ‫مرحله اول بیماری سه تا چهار هفته بعد از تماس با باکتری رخ میدهد‪.‬این مرحله با یک‬ ‫زخم دایرهای کوچک به نام شانکر شروع میشود‪.‬شانکر درد ندارد‪ ،‬اما بهشدت عفونی‬ ‫است‪.‬این زخم هر کجا که در تماس با باکتری بوده‪ ،‬مثال داخل دهان‪ ،‬اندام جنسی یا مقعد‬ ‫ظاهر میشود‪.‬بهطور میانگین سه هفته طول میکشد تا زخم ایجاد شود اما ممکن است بین‬ ‫‪ ۱۰‬تا ‪ ۹۰‬روز طول بکشد‪.‬زخم بین دو تا شش هفته باقی میماند‪.‬‬ ‫شود‪.‬‬ ‫غدد لنفاوی نزدیک به زخم متورم می شود که به آن خیارک گفته می‬ ‫میشود‪.‬‬ ‫سفیلیس از طریق رابطهی مستقیم با این زخم و معموال حین رابطهی جنسی منتقل‬  ‫‪.۲‬سفیلیس ثانویه‬ ‫در مرحلهی دوم‪ ،‬ممکن است قرمزی پوست و گلودرد ظاهر شود‪.‬قرمزی پوست با خارش پوست همراه نیست و‬ ‫میتواند هر جای بدن ظاهر شود‪ ،‬اما معموال کف دستها و پاها دیده میشود‪.‬بعضی افراد تا هنگامیکه التهاب از‬ ‫بین نرفته متوجه آن نمیشوند‪.‬عالئم دیگر مرحلهی دوم سفیلیس‪:‬‬ ‫ سردرد‬ ‫ تورم گرههای لنفاوی‬ ‫ بی حالی‬ ‫ تب‬ ‫ کاهش وزن‬ ‫ ریزش مو‬ ‫ درد مفاصل‬ ‫این مرحله از ‪ 6‬هفتع تا ‪ 6‬ماه طول میکشد‪.‬پس از مدتی‪ ،‬این عالئم خودبهخود از بین‬ ‫میروند‪ ،‬اما در صورتی که فرد درمان نشود همچنان مبتال به سفیلیس میماند‪.‬مرحلهی‬ ‫دوم سفیلیس معموال بهاشتباه بهعنوان بیماری دیگری تشخیص داده میشود‪.‬‬  ‫‪.۳‬سفلیس نهفته‬ ‫سومین مرحله‪ ،‬مرحلهی نهفته یا مخفی است‪.‬عالئم اولیه و ثانویه از بین میروند و این مرحله هیچ عالئم‬ ‫ظاهری ندارد‪ ،‬اما باکتری در بدن حضور دارد‪.‬این مرحله ممکن است تا ‪ 40‬سال طول بکشدکه در ‪4‬‬ ‫سال اول خطر سرایت زیاد است‪.‬‬  ‫‪.۴‬مرحلهی سوم سفیلیس‬ ‫مرحلهی سوم آخرین مرحلهی عفونت سفیلیس است‪.‬تقریبا ‪ ۱۵‬تا ‪ ۳۰‬درصد از افرادی که درمان نمیشوند به این‬ ‫مرحله میرسند‪.‬مرحلهی سوم ممکن است سالها یا دهها سال (‪ 30-2‬سال) بعد از تماس با عفونت اولیه رخ دهد‪.‬‬ ‫این مرحله‪ ،‬زندگی انسان را بهخطر میاندازد‪.‬بعضی عالئم شامل موارد زیر است‪:‬‬ ‫ نابینایی‬ ‫ ناشنوایی‬ ‫ بیماریهای ذهنی‬ ‫ از دست دادن حافظه‬ ‫ تخریب بافتهای نرم و استخوانها‬ ‫ اختالالت عصبی مانند سکته مغزی و مننژیت‬ ‫ بیماریهای قلبی‬ ‫ نوروسفیلیس که عفونت مغز یا نخاع است‪.‬‬  ‫درمان سیفلیس‬ ‫بیماری به وسیله ی آنتی بیوتیک پنی سیلین قابل درمان است ولی ضایعات ایجاد شده بهبود پیدا نمی کنند‪.‬‬ ‫شود‪.‬‬ ‫یک شخص ممکن است بارها در طول زندگی به این بیماری مبتال‬ ‫ سیفلیس مرحل ٔه اول و دوم یا سیفلیس نهفته زودرس‪ ۱ ( :‬سال)‬ ‫– پنیسیلین عضالنی ‪ ۱‬دوز یا‬ ‫– داکسی سایکلین خوراکی ‪ ۲‬هفته در صورت حساسیت به پنیسیلین‬ ‫–سیفلیس نهفته دیررس‪ ۱ ( :‬سال)‬ ‫– پنیسیلین عضالنی هفتهای ‪ ۳‬دوز‬ ‫– داکسی سایکلین خوراکی ‪ ۴‬هفته‬ ‫ نورو سیفلیس‪ :‬پنیسیلین وریدی ‪ ۱۴-۱۰‬روز‬ ‫ در بیماران ‪HIV‬مثبت باید از درمان تهاجمیتری استفاده کرد‬ ‫ سیر بالینی سیفلیس‬ ‫ عوارض سیفلیس ثانویه (آئورتیت) یا مرحل ٔه سوم ممکن است بهبود نیابد و به درمانهای حمایتی دیگری نیاز داشته‬ ‫باشد‪.‬‬ ‫ باید برای همه افراد در معرض خطربیماری های مقاربتی ‪RPR,‬بعنوان آزمایش روتین انجام شود‪.‬‬ ‫ آزمایش مبتالیان به سیفلیس از نظر وجود سایر عفونت ها مانند ‪HIV‬‬  ‫برای تشخیص آزمایشگاهی با روش های سرولوژیک چندین تست وجود دارد‪:‬‬ ‫‪RPR.1‬‬ ‫‪(Rapid plasma reagin guard‬واکنش سریع‪.‬مشاهده با چشم غیرمسلح)‬ ‫‪VDRL.2‬‬ ‫‪venereal disease research laboratory‬‬ ‫که هردو از آنتی بادی های غیراختصاصی استفاده می کنند‪.‬اگر شخصی این دو تست را انجام داد و نتیجه مثبت‬ ‫به عنوان تکلیف پاسخ دهید چرا؟‬ ‫شد‪ ،‬لزوما دلیل بر بیماری شخص نیست‪.‬‬ ‫آنتی بادی های غیراختصاصی که علیه تریپونما ایجاد می شوند از کالس ‪ IgG‬و آنتی بادی واسرمن از کالس‬ ‫‪ IgM‬هستند‪.‬‬  ‫‪TPI.3‬‬ ‫‪treponema pallidum immobilization test‬‬ ‫در این تست از )‪ Treponema Pallidum (Nichols Strain‬استفاده می شود که در بیضه ی خرگوش آن را تلقیح‬ ‫می کنند و آنتی بادی اختصاصی علیه آنرا استخراج میکنند در نتیجه این آنتی بادی تجاری اختصاصی است‪.‬‬ ‫سرم بیمار را گرفته و آنتی بادی تجاری به آن اضافه می شود‪.‬اگر اختصاصی باشد‪،‬کمپلمان به آنتی ژن متصل شده‬ ‫و باکتری را لیز می کند‬ ‫اگر این اتفاق بیوفتد‪،‬حرکت باکتری زیر میکروسکوپ فلئورسنت متوقف می شود(نتیجه مثبت گزارش می‬ ‫شود‪.‬یعنی باکتری از بین رفته است)‬ ‫این تست بسیار دقیق است‬  ‫روش آزمایش‬ ‫بطور روتین در آزمایشگاه ها از کیت های ‪ RPR‬استفاده می کنند‪.‬‬ ‫یک قطره سرم بیمار را روی یک قطره آنتی ژن می ریزیم‪.‬با اپلیکاتور مخلوط می کنیم‪.‬طی ‪ 8‬دقیقه نتیجه را بررسی‬ ‫می کنیم‪.‬آنتی ژن در این تست بزرگ است‪.‬در واقع آنتی ژن سنتتیک تجاری از نوع تریپونما نیست و با واکنش‬ ‫متقاطع با انتی بادی واکنش میدهد(‪.)cross reactivity‬این آنتی ژن از کاردیولیپین قلب گاو استخراج می شود و به‬ ‫ذرات شارکول متصل می شود‪.‬به همین دلیل هم تست کامال غیر اختصاصی است و می تواند مثبت کاذب باشد‪.‬‬ ‫نتیجه به صورت فلوکولیشن دیده می شود‪.‬واکنش ذرات شارکول را بصورت ابر و بادی مشاهده می کنیم و نتیجه را‬ ‫کنیم‪.‬‬ ‫مثبت گزارش می‬