Métodos Alternativos para el Control de Calidad Microbiológico (PDF)

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És C i..”“”“-”!- € n. 13.0 : exicano5. presencia o ay pa de 10S Estados unidos M4 » pruebas cualitativas para la anisntimotats.ivas Sencj ía e micrebaoosrgcua Farmac0P7 i 1020 : - RA MATIVOPA , pru para la cuenta o eny Meración y e -NDICE IX. INFOR! s ficación microbiana ¡demo micrebaoos rgdeanis nti ADS [DVO » pru AP É os AL TERNcaAl TI ALIE MÉTO DO S DE ' er; en general se carelactta EL CONTROLÓGI O Las pruebas cualitativas rel acionados con s Por el, MICROBIO! mbios de la turbidez 9 ca de cultivo. El ejem IMiento o crob ia no en UN me di o ¡lidad (MGA 0 Plo más | uo. ' ars 381liz ( podría, rea por ad) Este,erilid Pruúneba*¿ eje. La Som NTRODUCCIÓN. a lic erici 180 de la pru ebaad decoest lid nv en on al tgación -yrem l seneni esteri r a 4 imp E tan ¡ne entar Con - es faci lina cencia o citome etríplode, fase El abictivo de esta guín pruebas pas ada"s ende lagasbiol uminisflo rescencia, Las tría : idad de la cal o aut o ativos AM ! rar ección tadas MICrobioIÓBICOS altern cniro y ASEBUT A sólida, det técnicas de ' : ! microbiológ!" o y £ también se p odos nucleicos u lamet eficiencia del contro amplificación de ácidos. eden Usar Pai ta , - , Un farmacéuICOS lex productos ¡do une coplasmas. la determinación de mi , di “ ión Loc métodos descritos EN esta «tilesoP"en la. deteccN io” Farmac ivas como el método de filt gramiienta IM aluable y ión AUN son ul alidad Las pruebas cuantitat Tación en herame recidn “identificac de microorganismos en 1 o en plason método ca con membrana 0 esel de vaciadpar a estimar , S de gurar a € - usa dos el número farmacéuticos para ase nal convencio | cabricación de productos estos métodos suelen ser d lentos, suede po! El presentes en una muestra. - iológi.i.7 de éstos. microorganismos odo del ca de éstos. €: "microb el resulta “ e MP) es otro ejemplo de de esterilidad. donde número mas probable (N ciemplo: la prueba de incubación. 1 er. € dic hos cor emitido antes de transcurr ir 14 días ollado como una man vez métodos y fue desarr de Estimar el s de estos métodos rara anismos viables Ta consecuencia. los resultado número de microorg T una Muestra se correctivas proact ivas. : el pl aq ueo directo. Los permiten tomar acciones " no detectable si se usa > Métodos s. han mostrado croorganismos odos alternativos que para cuenta de mi Incluyen la au actualmente existen mét tiempo real o casi de alternativos a de flujo, técnica d r resultados en fluorescencia, citometrí filtro potencial para obtene posibilid de [levar a cab o una (TFED) y citometri € > manera instantánea con la ad se val ida n y se La epifluorescente directa Estos métodos, si etria en fase Sólida. acción correctiva oportuna. también representar una ación microbiana clás; | adaptan al uso rutinario pueden ógica a lo Las pruebas de identificeri CAS SON las robiol ESI herramienta útil en las pruebas de calidad micica. caract zac ión bio quí mi que se basan en; la A 1ca y morfolóoi ón farmacéut -. largo de los procesos de fabricaci j un mic r e 7.. d me desconocido. Recientement se 1 orporados en el análisis Los mámétodos alternativos pueden ser inc seen caract erí sti cas d " de muestras de productos farmacéutico sen s proceso, para auto esa métodos que po ficación, especialm e: e fac,ilidad y matización en la. identi one de producción y monitoreo microbiológix co en instalaci nejo de datos. V es ras de 1:.: idad de estos análisis, almacenamiento y maos rnativas sisE temas críticos contribuyendo al control de la cal mét odo s i - Vari as alte o integradas en est. que han sid s incluyen reaccione productos. bioquímicas, utilización d e carbono co—mo sustrato > | La siguiente guía descri caracterización1ón de de | la composicici ió os gra sos métodos alternativos de u s mue pos ón de ácid apli cacióne farmacéutdes ació f guí a icacri a uno ; :becadalg no stra sus ventajajas y í espectr scopía de masas í ” análisi pectro y espectroscopiaRaman, desventajas junto con los asp ect os c r í t i oli rfismo en fragmentos de restri1cc ó y el uso > aná cciión de lisismé de pectos críticos que deben ser polimo o de métodos | considerado S. El uso potencial debe ser analizado En Ta i | secuenciación genómi lis i de mica tales co mo el aná comparación con el mé m e , álisis de secuencias | método farmac opeico y no debe entenders € ca s 16S rA RN para procar iot as. que es un métod mandatoriofaro que la lista a dede métmé odos genómi | , ernatim alt vos a es completa 4 le ales bioguími Los procedimient os tradicion oquímicos y fenotípicos han odo, ni demostrado ser menos exacto es bi odos Esta guía no preten luye enddee recomendar uno u otro mét s y precisos que los mét , 1 tampoco inc genotípic 7. ser picos. óois alternativ 0s que pueden ? iolodo usados parparaa el control micosrobmét : Se , :. , co de productos requieren culti 1VOS puros farmacéuticos. La informació o Ógi ión inc lui da e n esta guí , para una identi:cacóns p e , usada en el proceso e " e ser para ello los cultivos ú e b y cul tiv ado en medios allenadvo s co m 0 de selección de métodos mi > pued d So : en ser fresco s S r Icr obi oló gicos apro piados. Jem ent o a los métmé odo s mic rob iol óvi ! Biimanoni iea copeicos y pro por cio Ógicos validación d (q na recomendaci Como part. ant,e la RE r una base , de datos dur aci y ONE S par a la sistema inclui parte del n. s. No se debe olv lviidar que los mé , primera validació. De Debi y cri tos en estaelloFar desscr “todos. métodos dela ide ntificacion ca son los métod (O) ido a quela los b a s e de di los cuales se deb er Mmacop s de referencia e, a de c pe nd en de u na base de datos, > ext ens ens ión de ión de la basé | ECurrir en caso de un a no conformidad ; los resultados on respecto al alca debe 1dad en c nce de los mi cr oorganismos de interés | A continuació ser to. mados en uen AGA validación. Un softwar" e rante la ón,: se abordan los tres stiti “cicas Microbiol Ógi Permite la adecuaciCIÓ a du base de datos, y por eso perm so. Pos de determinacion es que el usuario agr e n de ; la. na dos. EstEstá “ oorganismos no inclui gue micr Posibilidad debe re cion: se r considi erada durante la valida Scanned wit Scanned withh AC ACE Scanner E Scanner  -5 1021 PRIN NINCC IPIOS GENK APENDICES — VO S RALES DeE ALTERNATIA TIVO LOS mer TODOS tio de cultivo. El NO " “ dio A Los Metodos Microbiol recipientes de cultivo v en contacto con el E. un cambio detavción dirnoot: "Ologicos Mternas Punto final medib le es el ismos o de aMpPlificas: , N. e Indirecta: en Moo Vos Cmpican Método eléctrico: para microorganriemp que tintomir dee u lar, amañ tipo partic el o se TINOSlo casos la Señal ha hempo de detección es inversamente proporcional ak Ko ONoctendONo SCes alcanza PorCT Metodos de TE = ¿cuales solo del móculo inicial Para levaduras y hongos. los cur MCMa l tivos par: — estas diferen CAS “ax Y Par loa qn Entiques Menta == , ; setrica, puede Mv S Para el CONtrol mic CONVenioncia ) Producen pequeños cambios de resist encia ele T Aviden en 3 Chino MC tobiola a AOS Métodas. ancia, También To CSornias: RICO de la Calidad Wsarse ama medida indirecta de comductane! nd se ma - puede usarse ona medición directa de enpacitancia. Me s todos basados enel. (amacenamiento de energía) señal detoor: able n M CocimientoO. donde SE loprs * Medida útuca o Nu Periodo de cultivo Onra una -elación Un aspecto crítico a considerar es que no hay tina nr =. into N “A donde las sa. ha , al é | pt diferenciadas s elas os talas indix duale son. entre el nivel del mieroorganismo original com s p * El análicc - mal detectable MAlisis de SOMponentes celul CXPresión de ca SCulares, donde la em medida in direc Ponentes Específicos afoc. N Los usos potenciales incluyen el ensayo microbiológico L a > los los. — “Ta de la presencia sa. > una antibióticas Y : ECU ón | -robianay IMNCMorganismos Presencia e Wentificación de antibióticos, la eficacia de preservación mm 14 - prueba de presencia/ausen cia algunos SO CANOS En hs e , MEDIDA DEL CONSUMO O PRODUCCIÓN NA ". er GAS DE GA estas creania. PESTeE lala creac permit ión STas distinciones son artificiales, de UNA clasifican: nales A «e AsMicación de trabajo pero ud : ODOS MET —_ Se basa en el uso de un medio de cultivo apropiado para UNS BASBasADOS CER EN CRECIMIENTO.. r la multiplica activa MD. ción y el metabolismo del microorganis srt mo L permitiendo la producción de metabolitos o la desaparición de S DSASPECtos SASpe ente cas ctos críti. dos basados en la detecció as de los méto nutri, entes específico Í s. Estos , ; os detectan erectimi métod miento Mprana de crecimiento dependen completament ección microbiano por los cambios en las propiedades eléctricas de un E — rollo a desar microbiano para proporcionar unaamente y N delde. Sensor en respuesta a los cambios en la composición del gas o NE. ya ncia y/o prese o el máme : ro de microorganis S mos sefp a e la. colorimétr por cambios MT icos de un sensor en respuesta a niveles típicos de contaminación microbiana e mida cambios fisicoquímicos en el medio de crecimiento en farmaceuticos, la detección toma 24 horas o N productos contacto con el sensor. Los sistemas están basados en técnicas incrementarse la sensibilidad Edi productos fe Puede no destructivas las cuales permiten la identificación caso, después de la filtración la E. trados. En este subsecuente o la tipificación de los microorganismos. Los en o sobre el medio de cultivo Le y el L re ulaa lUtrante se incuba se |. hongos y/o bacterias Ss se hacen crecer en recip ientes cerrados y el res ex... A presencia o ausencia en la can tidad O Se Expresa como el monitoreo continuo se puede realizar usando instrumentos ol men filtrado. Si. estos sistemas usan volu que corre sponda al automáticos que miden la producción (por ejemplo: CO,) o el un pa dei ió ! N. en mediosOS líquidoosnoo frecen ¡ Ec - paso S: de incub ación consumo (por ejemplo: O) de gas, como un indicador del E deseo a 1Ó en información cuantitativa, pero e " creciamiento micro N biano *. Por ".. lo tanto, la producción de SI. Pp senci a 0 ausencia en la canti; dad anali;zada.. que. metabolitos o la eliminación de nutrientes pueden permitir. El análisis d sd , cambios en el pH o en el potencial redox, y todos estos aná isis e más e una cantidad de muestra permite obtener cambios pueden ser medidos directa o indirectamente como una estimación semicuantitativa (límite de prueba). El cambios en marcadores colorimétricos en el medio de beneficio principal de usar los métodos de detección temprana crecimiento. comparados con los métodos clásicos, es con frecuencia la capacidad de procesar simultáneamente un gran número de Los aspectos críticos a considerar es que no existe una relación muestras y el potencial de obtener un resultado en un tiempo entre el nivel inicial del microorganismo y el punto final más corto. detectable. Además, la temperatura de incubación, las condiciones fisiológicas y tipo de microorganismo, así como el Los métodos que se describen a continuación pueden ser algoritmo para el procesamiento de datos, son factores que usados para análisis cuantitativo, semicuantitativo o pueden impactar significativamente en el resultado o en el cualitativo. También tienen la característica de no ser tiempo de detección. destructivos y es posible la identificación del (los) microorganismo(s). El uso potencial es en la determinación de presencia/ausencia de muestras filtrables y no filtrables (por ejemplo: productos ' ODOS s COS ELECTROQUÍMI Suti cos en e nvase final, > muest MÉT farmacéuti mue ras de co ntrol de proceso, llenado simulado o en pruebas de integridad del envase o. ES LARIA : do). cerraado) Bases de la medición: La multiplicación y el metabolismo de los microorganismos en un medio de cultivo apropiado, ONNCTA producen metabolito itos s 1ónic Itamente cargadosVE ióni os alta a partir de BIOLUMINI ficación de las =— E. ániicos que e iten nutrii entes orgán dio lade modicultivo. Estos c ambios Los principios de la medición incluyen el conocimiento bien a.. el dos incluidos en los documentado del marcador ATP (adenosintrifosfato) de eléctricos son monitoreados con electrodos Scanned with Scanned Scanner ACE Scanner with ACE  s Mexicanos 13.0 acopea de los Estados Unido han hecho intentos:por mu —————— ítico se tiene que se. Jel Como aspecto er inicial de microorganismos í e a partir del Í nic. : + En este merodoJo €el * ATP debe ser extraido cuado. de estimar la cantidad pero esto se limita a microorganismos viabilidad celula. e deteccion. ue E. a un compuesto químico o. a temp" E de te activos con caracteristicas de crecimiento microorganismo usan pa ATP en presencia del sistem metabólicamen L ceguido de Ja E. ; ferasa. el cual emite ” - 1ede ser reproducibles. e Iycifenna lua >» puede 5 n7imático de hucitern relación señal a no o > proporción lala porATP adición prop presente La rela »ir esc ADP en ATI hotenciales: Determinación. 7 del tamañoñ del inóculo cu de las de ADP y conv Usos po microbianas para uso en pruebas farmacopeicas, incrementada por 7 mspensiones liberado MIC e : er: " medio de gráficos de calibración. En el modo automatizado ; A por - —. ai ibióti alitativo CONSIStE entcultivar los MICTOOFRANISINOS = — n es til en los análisis microbiológicos de antibióticos y en las. ,.. : : : c E pedo de cultivo " liquido 1 ' La luz emitida CXPresa en iinidades 1 lava. >» de una lyuminóMEetro y — niscencia en UN mbo 0 EN UN pozt ( DETERMINACIÓN DE CRECIMIENTO MICROBIANO are +mplo hrs e - comparan , y , " a sel 1 microplaca! jac 145 le El RI obtenidas de Mela mue vado. quitado Es USANDO MEDIOS SELECTIVOS Y/O al previamente determin El result: 4 " y L se X IALES. con un valor umbral a » das con la Muestra analizada exceden DIFERENC ancitivo e las URI obtenid:. el valor del umbral Bases de la medición. La capacidad para determinar la : : Í ¡lizando sustratos los por incubación ados microorganismos ensonagar. capturados presencia.—. de enzimas ” En el métoda rado cur e ativo to CU E N El ATP pre cromogénicos específicas adecuados utilizan par d esarrollar ha sido Pa utilizada 1 un en una má mi ye ndrias puede ser detectado por la gran número de métodos para la identificación de merado por las MITOCO < - 5 “- ; 4 , : - a luz emitida usando una cámara con un dispositivo microorganismos empleando técnicas manuales o ¡me co (CCD) automatizadas. La incorporación de tales sustratos en medios ea de cultivo de aislamiento primario selectivo o no selectivo Lox aspectos críticos a considerar son. por ejemplo, si la puede eliminar la necesidad de un cultivo posterior y pruebas muestra tiene un alto nivel de contaminación bacteriana, la bioquímicas para la identificación de ciertos microorganismos. derección es rápida. Para niveles bajos de contaminación es En estos medios de cultivo particulares los sustratos definidos necesario incrementar el número de microorganismos usando se introducen en la formulación y son metabolizados por la un n n pase de incubación en medio de cultivo (líquido o sólido). enzima celular específica de un hongo o una bacteria dada.. - de la cantidad de ATP producida varía de un microorganismo a Estos sustratos, los cuales están asociados a indicadores otro y puede depender de varios factores incluyendo la especie, colorimétricos, se seleccionan de acuerdo con el diagnóstico de la fase de crecimiento de las células el estatus nutricional, el la actividad enzimática que se busca. También el caldo estrés de las células o la edad del cultivo. Otros factores tales cromogénico puede ser usado para la detección temprana de como la turbidez, el color de la muestra o los efectos contaminación microbiana (por ejemplo: llenado simulado principales del producto pueden también influir en la medida o en de métodos de detección basados en medios de cultivo la bioluminiscencia. La extracción del ATP es generalmente líquidos). un o destructivo, que se debe considerar respecto a El uso de medios de cultivo innovadores ec quie1er em cruecuente para identificación presenta diversas 1 1 7 de los Ventajass principalmente.. microorganismos detec OS. porque mejoran " la. e.. discriminación en 5 : : — une mezcla de microorganismos, facilitan el. uso de los medios Los usos potenciales pueden ser en las pruebas de e cultivo y la inte te ici los ti men u los resultados. Adicionalmente presencia/ausencia: de muestras filtrables Os tiempos de respuesta son más cortos ya que - y no filtrables (por la identificación de los mi el crecimient ==. PE. productos farmacéuticos en envase final, muestras i 1croorganismos se b obtienen N_. de simultánea. como de proceso y llenado simulado), E Md cuenta total de croorganismos aerobios (CTMA), abierde del , moni Moni > ) itoreo del medio: Los aspectos críticosAE (6 agua y en pruebas de eficacia de preservación incluyen que la validació antimicrobiana. de cultivo d i e Ivo debe ser tomada en cuenta va cación de cuidadosamentelos paramedios TURBIDIMETRÍA migurar t combinación inació Ie de especificidad, “_ selectividad y Stez. La calidad de la señal debe L o selecció estar basada no solo en la i ;. OS principios “ ción E. de las enzimas o indicadores usados como micrabis Eoión son pios de la medición e que el crecimiento. € para inació present a e.. edo no Permite pe ; , (como que esas Enzimas deben estar observar cambios en la opacidad lo cual es : : " ! A cuantificada exactamente por medio de Ja densidad tambié en diferentes géneros de Microorganismos), sino ién en las Características fisicoquímicas del medio de sim P'€Y! tal o medida je.puede de onda específica, En su forma más 1 vO: por ejemplo, el -. , reali alizarse usando un Espectrofotómetro estáándar, onda entre 420 y 615 nm So , a determinació Lad inació i i venía a una longitud de Cualitativas ; s Icroorganismos específicos y las pruebas emplean lectores de microp| Ls deque auomatizados alternativos integridad a de Lenado simulado Y las pruebas de con detección N temprana dePlacas car? N N ocen una lectura continua. El sellad (Como el e p , de los Envases) así como las cuantitativas 1 la densi dad óptica. ónti El agua), método. gua), s son los Usos potenciales : de este Scanned with Scanned with ACE ACE Scanner  — o APENDICES 1% MEDICIÓN DIRECTA DD CITOMETRÍA DE FASE só ID lega a 1DA Incubación en medio de cultivo. en cuyo caso el método lleg. N. una combinación de método basado en pq el Estos métodos se basan cn que los mier. cuando son viables, por exposición a (e Organismos Se tiñen metodo de detección directa. El tamaño de las Ta , significativo E e inicialmente no fMluorogénico, flutres: N conjugado __— de ellas puede tener efecto celular intacta es requerida Men es Una Membrana Pas rpretación, y las muestras pueden en - similares comeiones | on excepción de la Altrabilidad, ap. fluoróforo dentro del citoplasma. Ya de y acumular el pri ya sun respecto al me a a niumes Un microbianas metabólicamente aUtivas _ de las células intracelularmente. Los Microorganismos so ealuctos Se libera ma (por ejemplo: Staphylnenecus « — membrane Macs después de tiros eo En contraste con la citometría de fase sólida, este método tiene — > uso potencial para detectar y contabilizar contaminación Las superficies de las membranas retienen las células vi microbiana en materiales que contienen material particulado y teñidas y entonces Son escaneadas con un rayo ln: as viables también si el material no puede ser filtrado. Si se requiere un excitación epifluorescente permite la determinación d l paso de pre-incubación, el método llega a ser una microorganismos fluorescentes, viables e individual Mm. determinación cualitativa. software apropiado permite la diferenciación de es. Un microorganismos viables de partículas autoflorescent TÉCNICA DE FILTRACIÓN POR FLUORESCENCIA sensibilidad y la rapidez del método permite la determi “ a DIRECTA (TFDE de contaminantes microbianos dentro de unas cuantas ación El método puede ser considerado como un precursor de la cuenta celular total (viables y no viables) puede se r ob ve. La citometría de fase sólida. Los microorganismos, concentrados utilizando la tintión fluorescente. er obtenida por filtración de la muestra, se tiñen con un colorante fluorescente (con naranja de acridina y en la actualidad más Los aspectos críticos incluyen que pueden determinarse comúnmente con 4,6 diamidino-diamidino-2-fenilindol microorganismos metabólicamente activos, difíciles de cultivar ea ae. , — MD o - y no cultivables viables. Esto puede resultar en revalorar los Y ne ” meo 06 v. E e E o cos límites microbianos previamente establecidos para las muestras pr —.. ——— de o en evaluación. Las esporas requieren la iniciación de la di olyltetrazolio Mr e (CTC) ie On que puedene usarse para resaltar células : o es Ne. germinación para permitir la determinación. La determinación respirando. Acoplado con el microscopio el método permite una rápida detección de microorganismos con una sensibilidad A os nividuales puede logr arse, pero la identificación de mi E - , DE que pueden dificultar la diferenciación entre microorganismos. Los signos número de campos examinados. Los sistemas sem!- automatizados auto-enfocables acoplados al análisis de imagen de discriminación y la mejora pueden ser auxiliados por el han servido para mejorar la utilidad de este método. Una crecimiento de micro-colonias. modificación del principio involucra muestrear usando una hoja adhesiva (que permita colectar las células de una superficie), y Este método rápido y sensible tiene un uso potencialen la luego teñirla, seguida por la observación directa en un evaluación de contaminación microbiana no específica. microscopio de epifluorescencia. CITOMETRÍA DE FLUJO Un aspecto crítico a considerar es que la distribución de los microorganismos sobre la membrana puede afectar la robustez El método se basa en que los microorganismos marcados con del método. Otro es que la intensidad de la fluorescencia puede un fluoróforo pueden ser determinados en suspensión cuando ser influenciada por el proceso de tinción y el estatus pasan a través de un citómetro de flujo. Los microorganismos metabólico de los microorganismos. Debe tenerse en cuenta viables pueden ser diferenciados de partículas no-viables con el que la fluorescencia no necesariamente es un indicador de uso de un fluoróforo indicador de viabilidad. El flujo de la viabilidad. Un breve período de cultivo sobre la superficie suspensión celular se dispersa en un canal estrecho y se expone antes de teñirla permite la formación de microcolonias; éstas a un rayo láser el cual excita al fluoróforo. Los microcolonias inmediatamente teñidas, pueden ser contadas microorganismos y las partículas se cuentan en diferentes fácilmente y demuestran de manera evidente su viabilidad. : : , canales dependiendo de si contienen o no células fluorescentes. Los usos potenciales de este método están generalmente limitados a fluidos a baja E. “apesar de que una pre- Los aspectos críticos incluyen el hecho de que la citometría de de dilución o una = tración pue “ Deremate ser flujo puede ser aplicada en análisis microbiológicos monitoreo de materiales filtrables y no-filtrables, y después del aplicadas a pa eros VESCOSOS:O PARIS ADOS - o -. : ó la contaminación microbiana ha sido exitosamente aplicado a enriquecimiento en el caso de bajos niveles de contaminación. dos farmacéuticos acuosos - po preparadas ua Este aspecto permite determinaciones cercanas a er sólida. Para ero no es t 1 o la citometría en fase incrementar la pr el uso en el campo AUTORLUORE TS E. Los princip1os de este método se basan en que la presencia farmacéutico, frecuentemente es necesario agregar un paso de , Scanned with Scanned ACE Scanner with ACE —_ Los aspectos críticos a considerar son que endógena de moléculas : me sabolitos Muorescentes el uso de ls (por per fil tenierese deuniáci dos dosos para identificación Microb e desnro de los cie mplo: NADPH. fia pro. an emrana Y 16 cuenta y alto gragra de estandarización. Es Críticiana microorganismos permite la € — composición de ácidos grasos de células Microb o Dar micrnonlanias Para mediciones direc tas, ianas a la o eSlulis u— aislamientos hayan sido La atofiumescancia induri o y. de microorganis crecidos en medios de Cul dd que. para sistemas mos Es estandarizados y en tiy que los basados con anturada nov un deter Deben ser empleadas lasdiciones estándar de Íncubacie mie de imagen secuen condiciones Estándar par cial a e eo oA An eirerficios de membrana en medio operación de la cromat ografía de gases, con eutomitivado de - un a. (An v de agar frecuentes de estándares de cal Corridas la imagen recubierta re ibración y también ec ur "- “ " “ erocimier importante el uso de ais to de lus micro e lamien tos bien conoci dos. Los usos potenciales Muy de estos métodos SON sumada: para |a cámara de — —— disnesiti La vo acoplaluz emi do a latidcám a se aprilia - determinació ara e.. “ de identificación Lo) la contaminación microbiana del CE del medio AMbien n no destructiva permite produc la identifie aci to (para raz te as de y contaminación y det E inación contam ección de Microorg al final del período de incuba ción anismos especin nara ESPECTROSCOPIA, Cos), Lot aspectos erinicos import INFRAROJA CON co dillo bauadas en oro antes son. por ejemplo. que, par stmiento microbiano, 10% TRANSFORMADA DE FO microorganismos viable s. pero no cultivables. pue " Los principios de la tra URIER (FTIR) den "l L nsformación de Fourie infrarrojo de microo rganismos comple r del es detect s, pero esto rep entre ado resenta una dificultad par tos, da un De Y microorganismos cul tivables de microorganisa NA recono mos via bles micr oocim rganien isto mos.establ Lose, aná típ icois dedel grupos taxonómic lis pero no cultivables y/o Patrón FTIR me. IUde. otras partículas. , llevados a cabo con ins trumen islado se toscre comercialmente dispone E-ntre los usos potenciales están : l el monitoreo mientas cto muestras en proceso filtra estándar y eg os o ;. | bles. muestras de agua y pro masa celular e. du una celda y se registra el liberado estériles y no estéri espectro in frarrojo, La tra nsto. a les. ANÁLISIS DE € OMPO NENTES CELULARE de Fourier se calcula y se S compara con una base de TÉCNICAS aislamientos con datos de FENOTÍPICAS MÉTODOS ocidos para unaposible identificación INMUNOLÓGICOS Los aspectos críticos a considerar son que requiere el uso de FTIR El principio de esta medición se un alto grado de estandari encuentra en las reacciones zación. Es Crítico para el anugeno-anticuerpo que pue patrón FTIR de aislamientos determinantes celulares úni den ser empleadas para de células Microbianas que los cos de microorganismos microorganismo s hayan sido crecidos en med Especificos. Estas rea estandarizados y en con ios de cultivo cciones pueden estar unidas a los diciones estándar de inc fenómenos de aglutinación o detecc células deb en Estar en el mism ubación. Las ión colorimétrica y o estado del