Frotiu Periferic - Formula Leucocitară PDF

Frotiul periferic. Formula leucocitară. 45 FROTIUL PERIFERIC. FORMULA LEUCOCITARĂ. Formula leucocitară reprezintă raportul dintre diferitele tipuri de leucocite. Această determinare se realizează examinând un frotiu de sânge perifer...

Frotiul periferic. Formula leucocitară. 45 FROTIUL PERIFERIC. FORMULA LEUCOCITARĂ. Formula leucocitară reprezintă raportul dintre diferitele tipuri de leucocite. Această determinare se realizează examinând un frotiu de sânge periferic. Frotiul periferic reprezintă o lamă de sticlă pe care s‐a întins o picătură de sânge. Se obţine prin punerea unei picături de sânge pe o lamă de sticlă și întinderea acestuia (utilizând o altă lamă de sticlă). Astfel se obţine un strat foarte subţire de sânge. Scopul 16 este de a obţine o zonă în care celulele sunt distanţate suficient pentru a fi numărate şi diferenţiate. Lama este lăsată să se usuce la aer după care se fixează prin imersie în metanol. După fixare se colorează prin metoda May‐Grünwald‐Giemsa. Pe lama astfel 20 pregătită se pot distinge unele caracteristici ale celulelor: structurile bazofile (care se colorează cu coloranţi bazici) se colorează în albastru; structurile acidofile sau eozinofile (care se colorează cu coloranţi acizi) se colorează în roşu în timp ce structurile neutrofile e, se colorează cu ambii coloranţi şi rezultă o coloraţie violet spre brun. gi Există mai multe tipuri de leucocite (globule albe). Diferenţa majoră între ele este reprezentată de prezenţa sau absenţa granulaţiilor din citoplasmă. Leucocitele sunt lo clasificate cel mai frecvent în granulocite şi agranulocite. io Granulocitele (leucocitele polimorfo‐nucleare) se împart în funcţie de caracteristici iz morfologice în: – Neutrofile: reprezintă cel mai numeros grup de leucocite prezente într‐o -F probă de sânge, în mod normal. Pe frotiul periferic citoplasma neutrofilelor prezintă numeroase granulaţii de culoare violacee şi cu un nucleu de culoare violet‐închis. Neutrofilele au un diametru de 10‐15 µm. Neutrofilele din sângele r periferic pot fi sub‐clasificate conform gradului de maturizare indicat de ta modificările de la nivelul nucleului: – metamielocit – forma cea mai tânără din sângele periferic, prezintă un ep nucleu mare rotund sau reniform cu citoplasmă abundentă colorată într‐un albastru deschis; – neutrofil tânăr nesegmentat prezintă un nucleu alungit şi curbat (în dr formă de potcoavă sau forma literei S) cu citoplasmă abundentă de culoare roz; – neutrofil segmentat – neutrofilul matur cu un nucleu format din 2 În până la 5 segmente sau lobi, cu citoplasmă colorată într‐un roşu pal. – Eozinofilul are un diametru de 12‐14 µm, nucleul este frecvent mare, caracteristic bilobat (doi lobi) cu o citoplasmă eozinofilică (roşu deschis), cu granulaţii mari de mărime uniformă de culoare roz‐roşu cărămiziu, prin colorare cu eozină.  46 Lucrări practice de fiziologie – Bazofilul are un diametru de 11‐13 µm. Nucleul este în general mare, neregulat, având câteodată trei lobi, cu o citoplasmă bazofilă conţinând granulaţii mari de culoare albastru‐închis care se pot suprapune cu nucleul. Agranulocitele (leucocite mononucleare) sunt caracterizate de aparenta absenţă a granulaţiilor din citoplasmă. Deşi numele lor arată o lipsă a granulaţiilor din citoplasmă și aceste celule conţin granulaţii (care eventual nu se colorează prin această metodă): – Limfocitele au un diametru de 8‐10 µm. Nucleul este mare, în general rotund, 16 ovalar, eventual uşor neregulat, dantelat. Citoplasma limfocitelor este bazofilă, de cantitate mică (în cerc sau semilună în jurul nucleului). 20 – Monocitele sunt cele mai mari dintre elementele figurate ale sângelui cu un diametru de 15‐25 µm. Nucleul este mare, rotund, dantelat sau lobat, iar citoplasma este de culoare cenuşiu‐albăstrui. e, MATERIALE NECESARE – frotiuri periferice colorate gi lo – microscop optic cu obiectiv de imersie (90x) – ulei de imersie (ulei de cedru) io METODA DE LUCRU iz -F Obţineţi iniţial o imagine clară a frotiului periferic cu obiectivul de putere mică (10x). Nu mai modificaţi focalizarea pentru pasul următor. Rotiţi parţial turela microscopului în aşa fel încât să aveţi acces la zona examinată a lamei între obiectivele 10x şi 90x. Puneţi o picătură de ulei de imersie în mijlocul lamei în zona luminată a frotiului. Rotiţi în poziţie r obiectivul de imersie de 90x, fixat corect acesta atinge picătura de ulei de imersie. ta Lucraţi din acest moment numai cu microviza. Scanaţi frotiul în zigzag examinând şi centrul şi părţile laterale ale lamei de sticlă. Găsiţi ep astfel 100 de leucocite consecutive şi identificați‐le pe baza caracterelor morfologice. Notaţi aceste leucocite identificate în tabelul lui Schilling (Tabelul 4). Treceţi câte 10 dr leucocite identificate în fiecare coloană. La sfârșit curăţaţi spaţiul de lucru! Ştergeţi uleiul vărsat de pe orice porţiune a În microscopului sau masa de lucru. Asiguraţi‐vă că aţi închis flaconul de ulei de imersie. NU CURĂŢAŢI obiectivul de imersie de ulei. Această operaţie va fi făcută de către asistentul desemnat! REZULTATE Adunaţi numărul de leucocite de pe fiecare coloană a tabelului lui Schilling. Exprimaţi rezultatul în procente  Frotiul periferic. Formula leucocitară. 47 Tabelul 4. Tabelul Schilling tipul de leucocit total (%) metamielocit neutrofil nesegmentat neutrofil segmentat eozinofil bazofil 16 limfocit monocit 20 total 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 100 e, INTERPRETAREA REZULTATELOR gi Raportul normal între diferitele tipuri leucocitare: lo metamielocit