Biopsychologische Messmethoden B PDF

Klinische Psychologie und Psychotherapie Biopsychologische Messmethoden B Methodenblock 1 Endokrinologie: Immunoassays (ELISA) Modul: 200e705l / HS2023 Verantwortliche: Dr. phil. Janek Lobmaier M. Sc. Michèle Schneeberger 28.09...

Klinische Psychologie und Psychotherapie Biopsychologische Messmethoden B Methodenblock 1 Endokrinologie: Immunoassays (ELISA) Modul: 200e705l / HS2023 Verantwortliche: Dr. phil. Janek Lobmaier M. Sc. Michèle Schneeberger 28.09.23 Klinische Psychologie und Psychotherapie Programm Termin Datum Thema Dozent/-in 1 21.09.2023 Einführung JL / MS 2 28.09.2023 Methodenblock 1 JL / MS Endokrinologie 3 05.10.2023 Methodenblock 2 JL / MS Genetik 4 12.10.2023 Methodenblock 3 AW Gastreferat 5 19.10.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 1 MS Depression und Genetik/(Epigenetik) 6 26.10.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 2 MS Depression und Stressreaktivität 7 02.11.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 3 MS Depression und Intervention 8 09.11.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 4 JL PTBS und Genetik 9 16.11.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 5 JL PTBS und Stressreaktivität 10 23.11.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 6 JL PTBS und Interventionen 11 30.11.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 7 JL Schizophrenie und Genetik 12 07.12.2023 Störungsspezifisches Methodenwissen 8 MS Schizophrenie und biochemische Theorien 13 14.12.2023 Rekapitulation und Fragen / Prüfungsvorbereitung JL / MS 14 21.12.2023 Schriftliche Prüfung JL / MS 2 Klinische Psychologie und Psychotherapie Agenda Besuch im biochemischen Labors des Psychologischen Institut Theorie: Immunoassays Postenlauf - Speichelproben - Haarproben - Dried Blood Spots (DBS) Page 3 Klinische Psychologie und Psychotherapie Immunoassays Grundprinzip: Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Phase durch die Bindung eines Antigens an einen Antikörper → Nutzen der Immunreaktion um bestimmte Stoffe nachzuweisen br.de, 16.09.22 fruchtpaar.ch, 16.09.22 Sicher-testen.ch, 16.09.22 Page 4 Klinische Psychologie und Psychotherapie Antigen-Antikörper-Reaktion (AAR) Page 5 Klinische Psychologie und Psychotherapie Immunoassays Verschiedene Arten von Immunoassays: – ELISA = Enzyme-Linked Immunosorbent Assay – FIA (Fluorescent Immunoassay: Fluoreszenzfarbstoffe) – CLIA (Chemiluminescent Immunoassay: Enzym → Reaktion → Licht) – RIA (Radioimmunoassay: Strahlung eines Radioisotops) → Klassifikation auf Basis des gemessenen Signals Auch für Hormone gibt es Antikörper https://www.antikoerper-online.de/ Page 6  Klinische Psychologie und Psychotherapie Verschiedene Arten von ELISA Indirekt Direkt Sandwich Kompetitiv Hat Patient Antikörper? Antigen-Spiegel messen Verwendung: Antigen-Spiegel messen z.B. HIV-Test - Wenig Antigen in Probe - Hohe Spezifität - Sensibles Verfahren - Hohe Flexibilität A A A A A Page 7 Klinische Psychologie und Psychotherapie Indirekter ELISA Hat der/die Patient/-in Antikörper? 1) Das Antigen wird an den Boden einer Mikrotiterplatte gebunden 2) Zugabe Probe des Patienten → Enthält Probe Antikörper, binden diese an die Antigene 3) Waschschritt → Entfernt ungebundenes Material 4) Zugabe zweiter Antikörper mit Enzym (z.B. Meerrettichperoxidase) 5) Zugabe Substrat →Substrat wird durch das Enzym zu einem Farbstoff umgewandelt. Je stärker die Farbe, desto mehr Antikörper befinden sich in der Probe des Patienten. Page 8 Klinische Psychologie und Psychotherapie Direkter ELISA Messung des Antigen-Spiegels in der Probe – Nachweisantikörper ist direkt an das Enzym gekoppelt und bindet an das Antigen aus der Probe Vorteile: − günstiger − schneller Page 9 Klinische Psychologie und Psychotherapie Sandwich ELISA Messung des Antigen-Spiegels in der Probe Antigen aus der Probe wird zwischen zwei Antikörpern «gefangen» → capture und detection antibody 1) Capture antibody am Plattenboden gebunden 2) Zugabe Probe → Antigene in der Probe binden an AK 3) Zugabe detection antibody → bindet an Antigene 4) Zugabe Substrat →Farbumschlag Page 10 Klinische Psychologie und Psychotherapie Kompetitiver ELISA Messung des Antigen-Spiegels in der Probe Kompetitiv – Enzymmarkiertes Antigen und Antigen aus der Probe «konkurrieren» um Bindung an Antikörper 1) Bindung zwischen Antikörper am Plattenboden und Antigen aus der Probe →Je weniger Antigene enthalten sind, desto mehr freie Antikörper- Bindestellen gibt es noch 2) Daran bindet nun ein zweites, künstlich hergestelltes Antigen 3) Nachweis des zweiten Antigens durch Farbreaktion – Farbintensität umgekehrt proportional zur Antigen-Konzentration in der A A Probe – Je weniger Antigen in der Probe war, desto mehr zweites Antigen hat gebunden und desto stärker ist die Färbung Page 11 Klinische Psychologie und Psychotherapie Auszug aus einem Laborprotokoll 9/28/2023 Title of the presentation, Author Page 12 Klinische Psychologie und Psychotherapie Get them samples! Dried Blood Spots (DBS) Speichelproben Salicaps Haarproben Page 13 Klinische Psychologie und Psychotherapie Dried Blood Spots - DBS Page 14 Klinische Psychologie und Psychotherapie Speichelproben Mehr Infos zu Probensammlung und Probenhandling: Saliva Collection Handbook https://salimetrics.com/ Page 15 Klinische Psychologie und Psychotherapie Haarproben Haarwachstum von ca. 1cm / Monat Mit einer Haaranalyse lassen sich daher Informationen über vergangene Zeiträume (z.B. Testosteronwerte über die letzten 3 Monate) oder vergangenes Verhalten (z.B. Substanzkonsum) gewinnen Meist werden die letzten 3 Monate (3cm Haar) als Analysezeitraum festgesetzt Aufbewahrung: Trocken und lichtgeschützt Achtung! Haarbehandlungen können die Messung des interessierenden Analyten erschweren oder im schlimmsten Fall verunmöglichen →meist wird daher zusätzlich ein Haarprotokoll erfasst