GuíA Práctica De Microscopía Y Teoría Celular - 2024-1

PRACTICA 1 MICROSCOPIA Y TEORÍA CELULAR OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS 1. INTRODUCCIÓN Una de las principales aplicaciones del microscopio se presenta en el campo de la biología celular. La posibilidad de observar más detalladamente las estructur...

PRACTICA 1 MICROSCOPIA Y TEORÍA CELULAR OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS 1. INTRODUCCIÓN Una de las principales aplicaciones del microscopio se presenta en el campo de la biología celular. La posibilidad de observar más detalladamente las estructuras celulares amplio de forma impresionante nuestro conocimiento en esta área. Aun cuando existen los microscopios electrónicos, capaces de lograr magnificaciones de más de 100.000X con una resolución aproximada de 0.2 nm, es el microscopio óptico el de mayor uso en los laboratorios y por tanto es importante recalcar que muchas de las estructuras celulares, observadas con él, presentan en general muy poco contraste entre si y es necesario hacerlas resaltar selectivamente, va sea a través de reacciones químicas con tinciones específicas que destaquen la reacción química con elementos celulares, mediante reacciones que aumenten específicamente la densidad óptica de las mismos o bien mediante ciertas técnicas de sombreado que permitan apreciar los relieves de la superficie que se observa. El microscopio de luz empleado corrientemente en los laboratorios corresponde al microscopio compuesto, el cual está constituido por un dúo de lentes amplificadoras de la imagen. El microscopio compuesto, de hecho, es un sistema de amplificación de dos niveles en el cual la pieza es amplificada en primer lugar por un complejo sistema de lentes del objetivo y de nuevo por una segunda lente en el ocular. El microscopio merece su reconocimiento como herramienta indispensable para el estudio del mundo microscópico gracias a su capacidad de aumentar significativamente el tamaño de los objetos, pero es necesario considerar que una amplificación ilimitada de la imagen normalmente nos remite a una observación con poco detalle. Así, pues, al considerar el microscopio compuesto es necesario comprender que existen dos características esenciales: su poder de amplificación y su poder de resolución. El primero hace referencia al número de veces que puede amplificar el objeto, mientras el segundo indica que tanto puede amplificarse un objeto sin perder detalle de él. Realmente es el poder de resolución la característica más importante ya que de nada serviría un microscopio que permitiera ver los objetos de un gran tamaño si estos precisamente se observaran borrosos. En biología celular su uso es inevitable ya que precisamente el objeto de estudio de esta área de la biología es la célula, entidad de tamaño minúsculo, imposible de ver a simple vista. El microscopio ha permitido estudiar a la célula  a nivel morfológico y fisiológico. Actualmente se encuentran muchos tipos distintos de microscopios, cada uno fabricado con propósitos especiales, empleados en situaciones especiales. Hoy n dia es el microscopio electrónico el que mayor poder de amplificación y resolución ofrece; sin embargo, es el microscopio de luz el más empleado en los laboratorios, tanto por su bajo costo y fácil manejo. MICROSCOPIO Para observar a las células es necesario el microscopio. El microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticas. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek a. Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo. b. Objetivo: lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta. c. Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.  d. Diafragma: regula la cantidad de luz que entra en el condensador. e. Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador. f. Tubo: es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera. g. Revólver: Es un sistema que coge los objetivos, y que rota para utilizar un objetivo u otro. h. Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. i. Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa. En la parte posterior de uno de los laterales se encuentra un nonius que permite fijar las coordenadas de cualquier campo óptico. Resumiendo: OCULAR OBJETIVO CONDENSADOR DIAFRAGMA FOCO Lente Lente Lente que Regula la Dirige los rayos situada situada concentra los cantidad de luminosos Sistema cerca del ojo cerca de la rayos luminosos luz que entra hacia el óptico del preparación- sobre la en el condensador. observador. Amplía la preparación. condensador. Amplía la imagen de imagen del ésta. objetivo. TORNILLOS SOPORTE PLATINA TUBO REVÓLVER DE ENFOQUE Mantiene la Lugar donde Contiene los Permite, al El micrométrico parte óptica. se deposita sistemas de girar, cambiar que aproxima Sistema Tiene dos la lentes los objetivos. el enfoque y mecánico partes: el pie preparación. micrométrico y la que consigue el columna. enfoque correcto Reconozca las diferentes partes del microscopio  A____________________ B____________________ C____________________ D____________________ E____________________ F____________________ G____________________ H____________________ I_____________________ J_____________________ K____________________ L____________________ M___________________ Observe las muestras histológicas siguiendo las siguientes normas: Para transportar el microscopio:  Coger con las dos manos, con una se sujeta el brazo y con la palma de la otra se sostiene el pie.  No tocar las lentes con los dedos. Para enfocar: Antes de conectar el enchufe a la toma de energía eléctrica verifique que el cable de luz esté bien conectado al microscopio. Después de encenderlo, realice los siguientes pasos mencionados a continuación: Regular la luz que ha de llegar a la lámpara. Poner la laminilla sobre la platina ajustándola con la pinza. Colocar el objetivo de 4X. Verificar y/o colocar el condensador en la posición adecuada para la observación. Observe en los oculares y comience a acortar la distancia pertinentemente con el macrométrico hasta que se observe la muestra e inmediatamente de nitidez con el micrométrico.  Una vez que observe la muestra tome una fotografía colocando la cámara en el ocular y realice por lo menos 3 observaciones con diferentes aperturas del diafragma e intensidades de luz. Cambiar al objetivo de 10X girando el revólver y graduando la nitidez con el micrométrico, repetir el paso 6. Se cambia al objetivo de 40X y se repiten el paso 6. Se cambia al objetivo de 100X girando el revólver, se debe poner una gota de aceite de inmersión y se repite el paso 6. Para determinar el aumento de cada imagen se multiplica el aumento del objetivo con el del ocular (Figura 4). ESTRUCTURA CELULAR La célula es la unidad morfológica y fisiológica esencial que compone a todo ser vivo. De acuerdo a la teoría celular es además la estructura anatómica y funcional fundamental de la materia viva. De hecho, la existencia de organismos unicelulares, esto es aquéllos compuestos por una única célula, indica que la célula es la unidad anatómica más simple con capacidad para la vida independiente. En oposición a estos organismos simples, los organismos pluricelulares constan de un número mayor de células. En cuanto a su estructura, las células presentan dos modelos básicos: procariota y eucariota, las cuales se diferencian entre sí debido a que estas últimas presentan un sistema de endomembranas. Las células eucariotas, a su vez, presentan dos variantes estructurales y funcionales: la animal y la vegetal. El concepto de célula como unidad anatómica y funcional de los organismos surgió entre los años 1830 y 1880, aunque fue en el siglo XVII cuando Robert Hooke describió por vez primera la existencia de células, al observar en una preparación vegetal la presencia de una estructura organizada que derivaba de la arquitectura de las paredes celulares vegetales. Para 1830 se disponía ya de microscopios con ópticas más desarrolladas, lo que permitió a investigadores como Theodor Schwann y Matthias Schleiden definir los postulados de la teoría celular, la cual afirma, que la célula es una unidad Mathias Schleiden Theodor Schwann morfológica de todo ser vivo: es decir, que en los seres vivos todo está formado por células o por sus productos de secreción. Este primer postulado sería completado por Rudolf Virchow con la afirmación “Omnis cellula e cellula”, la cual indica que toda célula deriva de una célula precedente (biogénesis). En otras palabras, este postulado constituye la refutación de la teoría de generación espontánea o ex novo, que hipotetizaba la posibilidad de que se generara vida a partir de elementos inanimados. Un tercer postulado de la teoría celular indica que las funciones vitales de los organismos ocurren dentro de las células, o en su entorno inmediato, y son controladas por sustancias que ellas secretan. Cada célula es un sistema abierto, que intercambia materia y energía con su medio. En una célula ocurren todas las funciones vitales, de manera que basta una célula para tener un ser vivo (que será un ser vivo unicelular). Así pues, la célula es la unidad fisiológica de la vida. Finalmente, el cuarto postulado de la teoría celular expresa que cada célula contiene toda la información hereditaria necesaria para el control de su propio ciclo y del desarrollo y el funcionamiento de un organismo de su especie, así como para la transmisión de esa información a la siguiente generación celular. En cuanto al tamaño, la mayoría de las células son microscópicas, es decir, no son observables a simple vista. A pesar de ser muy pequeñas (un milímetro cúbico de sangre puede contener unos cinco millones de células), el tamaño de las células es extremadamente variables desde 1 μm hasta 1 metro. Respecto de su forma, las células presentan una gran variabilidad, e, incluso, algunas no la poseen bien definida o permanente. Pueden ser: fusiformes (forma de huso), estrelladas, prismáticas, aplanadas, elípticas, globosas o redondeadas, etc. Algunas tienen una pared rígida y otras no, lo que les permite deformar la membrana y emitir prolongaciones citoplasmáticas (pseudópodos) para desplazarse o conseguir alimento. LA CELULA La célula es la unidad anatómica y fisiológica de los seres vivos. Todos los organismos están compuestos por células y toda la célula procede por división de otra preexistente. Su variedad en estructura, tamaño y funcionalidad, de las células pueden dividir esencialmente en dos grandes grupos, las eucariotas (animales y vegetales) y las procariotas. Las primeras se caracterizan porque el material genético esta contenido dentro de un núcleo, rodeado de nucleoplasma y protegido por su propia membrana. Estas células son las típicas de nuestro cuerpo y además de ser más grandes, poseen una disposición interna más compleja. Así, pueden realizar funciones específicas, como coordinar la química celular (reacciones internas) a través del accionar de sus organelas celulares. CELULAS PROCARIOTAS Se podrían imaginar la emoción que sintió en 1674 el biólogo holandés Antón van Leeuwenhoek cuando examinó con sus lentes de microscopio una gota de agua y descubrió un mundo formado por millones de diminutos «animáculos». El mundo descubierto por Van Leeuwenhoek era complejo y estaba formado por protozoos y bacterias de todas las formas y tamaños. Sin embargo, la complejidad de la microbiología médica actual se acerca al límite de la imaginación. Se llama Célula Procariota (del idioma griego πρό, pro: «antes de»; κάρυον, karion: «núcleo») a las células sin núcleo celular definido, es decir, cuyo material genético se encuentra disperso en el citoplasma, reunido en una zona denominada nucleoide. Se cree que todos los organismos que existen actualmente derivan de una forma unicelular procariótica (LUCA). Existe una teoría, Endosimbiosis seriada, que considera que a lo largo de un lento proceso evolutivo, hace unos 1500 millones de años, las procariotas derivaron en unas células más complejas, las eucariotas. Estas se clasifican en Arqueobacterias y Eubacterias, siendo el mayor representante las bacterias. Las bacterias son microorganismos procariotas, es decir, unicelulares sencillos, sin membrana nuclear, mitocondrias, aparato de Golgi ni retículo endoplásmico que se reproducen por división asexual. La pared celular que rodea a las bacterias es compleja, y existen dos formas básicas: una pared celular grampositiva con una gruesa capa de peptidoglicano y una pared celular gramnegativa con una delgada capa de peptidoglicano, así como una membrana externa. La tinción de Gram es una prueba útil y de fácil realización que permite al personal de salud, diferenciar las dos principales clases de bacterias con el objeto de instaurar un tratamiento. Se colocan sobre un portaobjetos bacterias fijadas por calor o secadas de algún otro modo y se tiñen con cristal violeta; a continuación, se añade una solución yodada que actúa como mordiente y luego se realiza un lavado con un agente decolorante (acetona) y agua con el fin de eliminar el colorante no fijado. Posteriormente se cubre con un colorante de contraste, safranina, para teñir de rojo las células que no hayan retenido el cristal violeta. Todo este proceso tiene una duración inferior a 10 minutos. En las bacterias grampositivas, las cuales se tiñen de color púrpura, el colorante queda atrapado en la capa de peptidoglicano (una estructura entrecruzada y gruesa que tiene forma de malla y rodea a la célula). En cambio, las bacterias gramnegativas presentan una delgada capa de peptidoglicano incapaz de retener el colorante cristal violeta, por lo que las células se tiñen con el colorante de contraste y adquieren un color rojo. COLOREANDO A LA CÉLULA Las células generalmente son tratadas para coagular las proteínas antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Para fijar las bacterias, el calor es el más comúnmente utilizado, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como formaldehido y alcoholes. Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente en células que han sido colocadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el Coloración con azul de metileno proceso de tinción. La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles. Si se desea simplemente incrementar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientos simples de tinción. El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe. Los métodos de tinción deben usarse siempre con precaución, ya que pueden conducir a errores. Las moléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen estructuras celulares auténticas, pero que son formaciones completamente artificiales inducidas por el mismo colorante. Tales estructuras se denominan artefactos, y deben tomarse muchas precauciones para tener la seguridad de que no nos estamos equivocando al creer que un artefacto es una estructura realmente existente. 2. OBJETIVO a. Describe y maneja apropiadamente el microscopio óptico. b. Reconocer el manejo y la importancia del microscopio óptico como herramienta de trabajo en el campo de la biología celular y molecular. c. Realiza varias observaciones de muestras traídas al laboratorio d. Realiza varios frotis y los colorea adecuadamente con una tinción simple (azul de metileno ) y con una tinción diferencial (Gram) e. Analiza las propiedades básicas de la célula. Explica la teoría celular, describe y compara los tipos de células según la presencia de núcleo y de pared celular. f. Reconocer las diferentes formas de organismos procariotas en muestras biológicas  g. Reconocer los distintos tipos de bacterias según se tiñan o no con la Coloración de Gram. h. Observar y reconocer células eucariotas de tipo vegetal (epidermis de cebolla) i. Observar y reconocer células eucariotas de tipo protozoos (agua estancada). j. Observar y reconocer células eucariotas de tipo animal (mucosa bucal y sangre). 3. MATERIALES  Laminas portaobjetos  Microscopio  Lugol  Epidermis de cebolla.  Agua estancada  Hisopos  Lancetas  Mechero de Bunsen  Alcohol al 96%  Azul de metileno de de Loeffler  Lugol  Alcohol-acetona  Safranina  Colonias de bacterias  Aceite de inmersión  Hematoxilina  Eosina  Solución Wright  Lanceta estéril  Muestras de sangre  Epidermis de cebolla.  Algodón estéril  bisturí 4. PROCEDIMIENTOS  a) Realiza varios frotis y los colorea adecuadamente con una tinción simple (azul de metileno) y con una tinción diferencial (Gram) Realice frotis de células: a) Sobre un portaobjetos de vidrio, limpio y seco, se coloca una gota del material (sangre) que se va a teñir (si es líquido) o se hace rodar el hisopo con que se tomó la muestra (mucosa yugal,) b) Puede usar una aguja estéril para transferir una pequeña cantidad de un cultivo bacteriano a la superficie del portaobjetos. Este material es suspendido en una gota de agua o solución salina previamente colocada sobre el portaobjetos. c) El material se frota directamente sobre el portaobjetos, donde puede visualizarse con facilidad. El material colocado en el portaobjetos se deja secar al aire o se pasa por la llama azul del mechero de bunsen hasta que esté caliente. Eritrocitos y linfocitos Eritrocitos Sangre  La gráfica muestra la forma correcta de desplazar el cubreobjetos sobre el portaobjetos y la manera en como debe ser manipulado. Nota que una vez se coloca la gota de sangre, el portaobjetos se posa sobre esta hasta hacer que se desplace a todo lo ancho del portaobjetos, luego de esta operación debe realizarse el extendido. Realice la COLORACIÓN CON AZUL DE METILENO DE LOEFFLER siguiendo el procedimiento: a. Realice un frotis de células epiteliales de la mucosa yugal (pared interna de las mejillas) b. Cubrir el frotis con azul de metileno por 1 a 2 minutos. c. Lavar con agua corriente. d. Secar al aire. e. Observar al microscopio Muestra: ________________ Muestra: ________________ Coloración: ______________ Coloración: _______________ Aumento: _______________ Aumento: ________________  Realice la coloración de Gram con un frotis de bacterias Tinción diferencial GRAM Sobre una lámina portaobjetos limpia realizar una extensión delgada y uniforme de mucosa labial extraída con un hisopo. (muestra liquida) ó Sobre una lámina portaobjetos limpia colocar una gotita de agua y realizar una extensión delgada y uniforme de una colonia de bacterias tomadas con un asa bacteriológica. (Muestra solida) Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el portaobjetos a la llama del mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado pues las células pueden deformarse o romperse. Añadir cristal violeta hasta cubrir toda la muestra y dejar colorear durante 1 - 2 minutos. Tirar el exceso de colorante sacudiendo la lámina portaobjetos (No lavar con agua). Añadir lugol hasta cubrir toda la muestra, esperar 1 minuto. Decolorar con etanol (20 segundos) y lavar con agua (chorro de agua con poca presión) añadir safranina (colorante de contraste) hasta cubrir toda la muestra, esperar 1 minuto. Lavar con agua. secar a temperatura ambiente o al mechero (cuidado de no calentar mucho la lámina).  Observar a (40X, 100X). Diferenciar las bacterias Gram positivas y las Gram negativas. Bacterias Gram positivas: Retienen el colorante cristal violeta luego de la decoloración y aparecen de color azul profundo. Bacterias Gram negativas: No son capaces de retener el cristal violeta luego de la decoloración y son teñidas por el colorante de contraste (safranina), de color rojo o rosado. Muestra: ________________ Muestra: ________________ Coloración: ______________ Coloración: _______________ Aumento: _______________ Aumento: ________________ b) Células sanguíneas de vertebrados (Células Eucariotas) Colocar una gota de sangre en el tercio externo de una lámina portaobjetos limpia y seca. Con otra lamina portaobjeto y en posición adecuada (ángulo de 45º) hacer contacto con la gota de sangre, tratando de que esta se extienda a lo largo de arista de contacto. Realizar un frotis rápido y uniforme Fijar a temperatura ambiente. Cubrir el preparado con el colorante Giemsa, agregando seguidamente doble volumen de agua destilada. Colorear 10 minutos Lavar al chorro, secar y observar con objetivo de inmersión. Dibuja lo observado Muestra: ________________ Muestra: ________________ Coloración: ______________ Coloración: _______________ Aumento: _______________ Aumento: ________________ c) Observación de células vegetales y protozoos CÉLULAS DE EPIDERMIS DE CEBOLLA. - Las cebollas parecen materiales muertos cuando las compramos en el merca do. En realidad, son bulbos formados por células vivas de las cuales pueden crecer raíces y hojas cuando las cebollas se plantan o se almacenan en un sitio húmedo Preparación del extendido: 1. Corta un bulbo de cebolla en cuatro partes. Observarás que cada parte se separa por sí sola en capas llamadas catafilos. 2. Toma un de estos catafilos con la superficie cóncava hacia ti y rómpela, entonces veras que se desprende con facilidad una capa muy delgada y transparente que es la epidermis. 3. Toma un fragmento de epidermis y colócala en un portaobjeto con una gota de agua de modo que la superficie que estaba en contacto con el catafilo quede hacia arriba. 4. Colócale un cubreobjetos y observa al microscopio. Dibuja. Tinción 1. Ahora saca la preparación del microscopio y colócale una gota de Lugol en el borde del cubreobjetos para que la solución penetre por difusión. 2. Extrae el líquido sobrenadante con papel toalla. 3. Observa al microscopio nuevamente. Dibuja Responde: a. ¿Qué forma tienen estas células?  b. Con el objetivo de 10X ¿cuál es el color y la forma del núcleo después de la adición del Lugol? c. ¿Qué diferencias se encuentran entre la célula teñida y la que no lo está? PROTOZOARIOS Y ALGAS Las algas y los protozoarios son organismos unicelulares de mayor tamaño que las bacterias. Las primeras consideradas vegetales y los segundos considerados como animales. Cuando las algas alcanzan un determinado tamaño se dividen: las dos células hijas pueden separarse o permanecer en cadenas (filamentos) o masas (colonias). Preparación Coloca una gota de agua estancada sobre el portaobjetos, coloca una laminilla o cubre objeto y observa al microscopio empleando el objetivo de 10X. Si algunos microorganismos se mueven tan rápidamente que se dificulta su observación usa una gota de una solución azucarada sobre la gota de agua estancada, luego colócale la laminilla y observa. – ¿Qué diferencias existen entre las algas y los protozoarios? _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ – Dibuja por lo menos tres diferentes organismos de los que has observado. 5. CUESTIONARIO a. ¿Por qué la célula es la mínima unidad de la vida? _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ ___________________________________ b. ¿Por qué se consideran que los virus no son células? _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ c. ¿Cuáles son los tipos de células según si poseen o no núcleo? i. __________________________ ii. __________________________ d. ¿Cuáles son los tipos de células eucariotas según si poseen o no pared celular? i. _________________ ii. _________________ e. ¿A cuál de los 3 dominios corresponden las células? i. ________________________ ii. ________________________ iii. ________________________ f. ¿Por qué es necesario colorear una célula para poder observarla al microscopio? ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ g. ¿Cuáles son los postulados de la teoría celular? ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ h. Haga una tabla comparativa entre célula procariota y célula eucariota (5 diferencias) N Célula Procariota Célula Eucariota 1 2  3 4 5 i. Haga una tabla comparativa entre célula animal y célula vegetal (5 diferencias) N Célula Animal Célula Vegetal 1 2 3 4 5 j. Investiga sobre las características celulares de los 3 dominios Archaea Bacteria Eucarya Pared celular Membrana celular Genoma k. ¿Por qué hay bacterias Gram positivas y Gram negativas? __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ l. ¿A que se denomina colorante?__________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ m. ¿Qué tipo de tinciones conoces?__________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ n. ¿Los priones son considerados células?__________________________ o. ¿Cómo se clasifican las células? __________________________________________________________ __________________________________________________________ ñ. ¿Sabes de que compuestos están formadas las paredes celulares de los procariotas?_________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ p. ¿Qué formas presentan las bacterias? ____________________________________________________________ ____________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ q. ¿Porque los eritrocitos se tiñen de eosina y los leucocitos de hematoxilina? _______________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ r. ¿Cuáles son los fundamentos de la coloración Wright? ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ 6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS y enlaces consultados 1. __________________________________________________________ 2. __________________________________________________________ 3. __________________________________________________________ 4. __________________________________________________________